Методическое указание для студентов к практическому занятию 1
Тема: Правила работы в микробиологической лаборатории. Иммерсионный микро-
Скоп. Шаровидные бактерии. Простые методы окраски.
Цель: Освоения практических навыков работы в микробиологической лаборатории,
приготовление мазков, окраска простыми методами.
Модуль1. Морфология и физиология микроорганизмов.
Содержательный модуль 2. Морфология и структура прокариотов и паразитических одноклеточных эукариотов.
Тема занятия 1. Правила работы в микробиологической лаборатории. Иммерсион-ный микроскоп. Шаровидные бактерии. Простые методы окраски.
Актуальность темы. Современные бактериологические лаборатории требуют особого режима работы. При организации лабораторий, прежде всего, необходимо обеспечить безопасность работы сотрудников. Учебная комната тоже есть, в некоторой мере, бактериологической лабораторией и студенты при выполнении самостоятельной работы тоже должны выполнять правила техники безопасности.
При изучении микроскопических препаратов используются иммерсионные микроскопы, которые имеют преимущество перед световыми. Благодаря использованию иммерсионного масла (кедрового или вазелинового), показатель преломления которого равняется показателю преломление стекла, разрешающая способность иммерсионного микроскопа равняется 0,2 мкм.
Знание морфологии бактерий имеет большое значение для микроскопического метода лабораторной диагностики инфекционных заболеваний. Изучение морфологии бактерий осуществляется при микроскопии окрашенных микроскопических препаратов. К простым методам окраски относятся: методы окраски метиленовым синим и карболовым фуксином. Окраска метиленовым синим проводится на протяжении 3-5 минут, а окраска карболовым фуксином 1-2 минуты.
Кокки - это шаровидные бактерии, которые в зависимости от расположения делятся на микрококки, диплококки, стафилококки, стрептококки, тетракокки и сарцины. Микрококки располагаются в виде отдельных клеток, диплококки – парами (гонококк, пневмококк, менингококк), так как клетки после деления не расходятся, стрептококки – в виде цепи, стафилококки – неправильными скоплениями в виде гроздьев винограда.
Пневмококк (возбудитель пневмонии) имеет с противоположных сторон ланцетовидную форму, а гонококк (возбудитель гонореи) и менингококк (возбудитель эпидемического менингита) - форму кофейных зерен, обращенных вогнутой поверхностью друг к другу. Стрептококки (от греч. streptos - цепочка) - клетки округлой или вытянутой формы, составляющие цепочку вследствие деления клеток в одной плоскости и сохранения связи между ними в месте деления. Сарцины (от лат. sarcina - связка, тюк) располагаются в виде пакетов из 8 и более кокков, так как они образуются при делении клетки в трех взаимно перпендикулярных областях. Стафилококки (от греч. staphyle - виноградная гроздь) представляют собой кокки, расположенные группами (гроздьями) в результате деления в разных плоскостях.
Конкретные цели:
- Ознакомиться с правилами работы в бактериологической лаборатории.
- Трактовать методики приготовления бактериологических препаратов.
- Описывать морфологические формы шаровидных бактерий.
- Трактовать результаты микроскопического исследования микроорганизмов.
- Анализировать морфологию шаровидных бактерий.
Уметь:
- Готовить микропрепараты из чистых культур шаровидных бактерий.
· Красить микропрепараты простыми методами (метиленовым синим и фуксином)
· Проводить микроскопию микропрепаратов с помощью иммерсионного микроскопа.
· Анализировать морфологию шаровидных бактерий.
Теоретические вопросы:
1. Правила работы в бактериологической лаборатории.
2. Строение иммерсионного микроскопа.
3. Характеристики иммерсионного объектива.
4. Правила использования иммерсионного микроскопа при микроскопии окрашенных препаратов.
5. Красители для простых методов окраски.
6. Техника приготовления препаратов из культур бактерий и окраска их простыми методами.
7. Шаровидные бактерии, их морфология.
8. Примеры кокков патогенных для человека и заболеваний, вызванных ними.
Практические задачи, которые выполняются на занятии:
1. Приготовление микропрепаратов из чистых культур шаровидных бактерий.
2. Окраска микропрепаратов простыми методами.
3. Микроскопия микропрепаратов из чистых культур бактерий, их анализ и зарисовка в протокол.
4. Микроскопия демонстрационных микропрепаратов: стафилококк (окраска метиле-новым синим), стрептококк (окраска метиленовым синим), пневмококк (окраска метиленовым синим),
5. Зарисовка демонстрационных микропрепаратов в протокол.
6. Оформление протокола.
Литература:
1. Пяткін К.Д., Кривошеїн Ю.С. Микробиология с вирусологией и иммунологией. – Киев: Высшая шк.., 1992. – 431 с.
2. Воробьев А.В., Быков А.С., Пашков Э.П., Рыбакова А.М. Микробиология. – Г.: Медицина,1998. – 336с.
3. Медицинская микробиология / Под редакцией В.И.Покровского. – Г.: ГЄОТАР-МЕД, 2001. – 768с.
4. Конспект лекции.