Лабораторная диагностика.




Микробиология Газовой Гангрены

Видовое название возбудителя и его систематическое положение.

C.perfringens, C.novyi, C.septicum, C.histolyticum, C.sordellii, C.difficile, C.sporogenes. Род Clostridium относится к классу Clostridia.

Морфологические свойства.

C.perfringens: толстая неподвижная палочка со слегка закруглёнными концами длинной 3,0-9,0 мкм и диаметром 0,9-1,3 мкм. Споры овальные, располагаются субтерминально или, чаще, центрально, образуются лучше в щелочной среде. В материале из ран и на среде с сывороткой образуют капсулу.

C.novyi: полиморфная толстая палочка с закругленными концами диаметром 0,8 – 1,4 мкм и длиной 1,6 – 2,5 мкм, нередко располагается в виде цепочек из 2—5 клеток. Капсулы не образу­ет, подвижный перитрих (серотип С неподвижен). Споры овальные или круглые, располагаются субтерминально, редко — центрально.

Тинкториальные свойства.

Грамположительны.

Культуральные свойства.

C.perfringens: на жидких средах быстро растёт, вызывая помутнение. Молоко створаживает через 3—5 ч с образованием рыхлого сгустка и с отделением прозрачной сыворот­ки. На кровяном агаре образует колонии диаметром 2—5 мм с зоной гемолиза и приподнятым центром. В столбике агара образуются дисковидные колонии.

C.novyi: на жидких средах растет в виде легкого помутнения, дает большой осадок. На кровяном агаре она образует серые бугристые колонии с приподнятым центром, отходящими отростками и зоной гемолиза. В столбике с агаром дает хлопьевидные колонии.

Физиологические свойства.

C.perfringens – анаэробы, температурный оптимум для роста 45 °С.

C.novyi – анаэробы, Оптимальная температура для роста 40 – 45 °С.

Биохимические свойства.

C.perfringens: ферментирует глюкозу, лактозу, мальтозу и сахарозу с образованием кислоты и газа, но не ферментирует маннит. Разжижает желатин.

C.novyi: ферментирует глюкозу, мальтозу с образованием газа, не ферментирует лактозу. Желатин разжижает.

Факторы патогенности.

C.perfringens: обладает высокой инвазивностью и сильной токсигенностью. Первая связана со способностью возбудителя вырабатывать гиалуронидазу и дру­гие ферменты, которые оказывают также и разрушающее действие на клетки соединительной ткани и мышцы. Главным фактором патогенности является вырабатываемый им сложного состава экзотоксин. Гемотоксическое, некротоксическое, нейротоксическое, лейкотоксическое и летальное действия свя­заны с различными компонентами экзотоксина. Отдельные штаммы С. perfringens синтезируют экзотоксины разного состава и разной антигенной специфичности, в соответствии с которой различают 6 серологических типов этого возбудителя: А, В, С, D, Е, F.

Серотип А – один из главных возбудителей газовой гангрены у людей. Его ток­син содержит не менее 6 компонентов: альфа, эта, тэта, каппа, мю, ню, главным из которых является альфа-лецитиназа С.

C.novyi: Патогенность обусловлена его способностью продуцировать очень сильный экзотоксин сложного состава, вызывающий при за­ражении животных характерный бесцветный или розового цвета отек желеобраз­ной консистенции. Токсин обладает также гемолитическим и летальным свойствами. Различают 3 основных типа С. Novyi – А, В и С. Тип А продуцирует альфа-, гамма-, дельта-, эпсилон-экзотоксины, с которыми связана его способность вызывать за­болевание у людей.

Эпидемиология инфекции.

Заражение происходит при проникновении возбудителей газовой гангрены в рану. Клостридии чрезвычайно широко распространены в природе. Естест­венной средой их обитания служит кишечник травоядных животных и человека, а также почва, куда они поступают с испражнениями.

Патогенез инфекции.

Инкубационный период длится от нескольких часов до 5 дней, иногда дольше. Анаэробная инфекция продолжается 5—6 дней.

Различают следующие формы газовой гангрены:

1. Анаэробная инфекция мягких тканей конечностей и туловища.

2. Анаэробная инфекция мозга.

3. Послеродовая или послеабортная анаэробная инфекция.

4. Анаэ­робная инфекция органов брюшной полости и брюшины.

5. Анаэробная инфекция органов грудной полости.

6. Анаэробный остеомиелит.

Для газовой гангрены характерны: прогрессирующий некроз тканей, отек, газообразова­ние в тканях и отравление организма токсинами возбудителя и продуктами рас­пада тканей. Клостридии — некропаразиты, благоприятной средой для их размножения служат мертвые или повреж­денные ткани. Поэтому наиболее опасны тяжелые повреждения с обширной ране­вой поверхностью, нарушением кровообращения, гематомами, размозжением мышц, раздроблением костей, образованием слепых ходов и т. п.

Попадая в такие раны, клостридии начинают быстро размножаться в глубине поврежденной тка­ни (анаэробные условия) и выделять экзотоксины. Обладая высокой инвазивностью, они проникают и в здоровую ткань, вначале повреждая ее, а затем и некротизируя своими токсинами и ферментами. Особенно бурно процесс протекает в мышечной ткани, содержащей гликоген и являющейся хорошей питательной сре­дой для клостридий.

 

В патогенном действии клостридий и их токсинов различа­ют две стадии:

1. Образование отека. Вследствие действия токсина повышается проницае­мость кровеносных сосудов для плазмы и клеток крови. Развитие отека приводит к сдавливанию ткани; кроме того, с отечной жидкостью поступает токсин. Все это приводит к повреждению тканей и делает их доступными для размножения клост­ридий.

2. Развитие газовой гангрены, т. е. некроз мышечной и соединительной тка­ней. Газообразование является результатом ферментативной активности клостри­дий, а некроз — следствием некротоксического действия токсинов и ферментов. Токсины не только действуют местно, но и вызывают сильнейшую общую инток­сикацию (нейротоксическое действие). К специфической бактериальной инток­сикации присоединяется отравление продуктами тканевого разложения. Чем больше зона поражения, тем сильнее и разнообразнее интоксикация организма.

 

Иммунитет.

В основном опосре­дуется антитоксинами. Роль антимикробных антител второстепенна.

Лабораторная диагностика.

Материалом для исследования служат кусочки по­раженных тканей (некротизированная и пограничные с ней участки) и отечная жид­кость. Кроме того, исследованию в случае необходимости подвергают перевязочный и шовный материал (шелк, кетгут), одежду, образцы почвы; при пищевых интокси­кациях, вызванных клостридиями – испражнения и продукты.

Микробиологичес­кая диагностика заключается в выделении из исследуемого материала возбудителя и его идентификации, основанной на изучении морфологических, культуральных, биохимических свойств и определении токсигенности. Исследование состоит из не­скольких этапов:

1. Бактериоскопия отделяемого раны или экссудата.

2. Выделение возбудителя и его идентификация.

3. Заражение белых мышей исследуемым материалом, фильтратом бульонной культуры или кровью больных для обнаружения токсина.

4. Идентификация токсина клостридий с помощью реакций нейтрализации спе­цифическими антитоксическими сыворотками в биологических пробах на белых мышах или культурах клеток.

Для выделения клостридий используют следующие среды:

1. Жидкие накопи­тельные (казеиновые или мясные, содержащие 1 % глюкозы и кусочки печени, пе­ред посевом кипятят и заливают вазелиновым маслом для создания анаэробных ус­ловий), молоко.

2. Плотные — кровяной агар Цейсслера (15 % дефибринированной крови + 2 % глюкозы); кровяной агар с бензидином (колонии С. novyi на такой сре­де чернеют на воздухе); среда Вильсона—Блера в длинных стеклянных трубочках (С. perfringens в такой среде уже через 3—4 ч вызывает почернение в месте своего раз­множения за счет образования сернистого железа из Na2S.H FeCl3 и бурное газообра­зование за счет ферментации глюкозы); среда Виллиса—Хоббса (содержит, кроме питательного агара, лактозу, индикатор, яичный желток и обезжиренное молоко). На этой среде колонии С. perfringens окрашены в цвет индикатора (ферментируют лактозу), имеют ореол опалесценции (наличие лецитиназы); колонии С.novyi бес­цветные (не ферментируют лактозу), окружены зоной опалесценции (лецитиназа); колонии С. septicum окрашены в красный цвет (ферментируют лактозу), но не имеют зоны опалесценции; колонии С. histolyticum — бесцветны, окружены зоной просвет­ления; колонии С.sordellii, С.sporogenesи С.difficile — бесцветные (не ферментируют лактозу), но колонии С.sordellii имеют ореол опалесценции (имеют лецитиназу).

Для ускоренной диагностики газовой гангрены предложен следующий метод: посев производится в столбик полужидкого агара, к которому добавляется антитоксическая сыворотка. В такой среде с гомологичной антиток­сической сывороткой клостридии вместо диффузного помутнения образуют изо­лированные колонии, а в препаратах-мазках из них имеют вид стрептобацилл (располагаются цепочками).

 

Лечение и профилактика.

Главный метод предупреждения газовой гангрены – своевременная и правильная хирургическая обработка ран. В случае особо тяжелых ранений, которые могут повлечь развитие газовой гангрены, больному с профилак­тической целью вводят антитоксические сыворотки против наиболее частых возбудителей – С. perfringens, С.novyi и С.s epticum. При отсутствии эффекта сыворотки вводят повтор­но. Серотерапия должна обязательно сочетаться с эффективной антибиотикотерапией и соответствующим общеукрепляющим лечением.

Противогангренозные моно- и поливалентные сыворотки. Состав: очищенные и концентрированные методом ферментативного гидролиза сыворотки лошадей, иммунизированных анатоксинами или токсинами возбудителей газовой гангрены. Назначение: для лечения и профилактики. Способ применения: внутримышечно, в тяжёлых случаях – внутривенно капельным способом.

 

 



Поделиться:




Поиск по сайту

©2015-2024 poisk-ru.ru
Все права принадлежать их авторам. Данный сайт не претендует на авторства, а предоставляет бесплатное использование.
Дата создания страницы: 2017-06-11 Нарушение авторских прав и Нарушение персональных данных


Поиск по сайту: