Лабораторная диагностика паротита, кори, краснухи.
Паротит | Корь | Краснуха | |
Семество | Paramyxoviridae | Paramyxoviridae | Togaviridae |
Род | Rubulavirus | Morbilivirus | Rubivirus |
Тип НК | Линейная несегментированная “-” РНК | Линейная несегментированная “-” РНК | Несегментированная “+” РНК |
Форма | Куполоподобная, неправильная | Овальная | Сферическая |
Размер | 150-170 нм | 120-250 нм | 50-60 нм |
Тип симетрии | Спиральный (у нуклеокапсида) | Спиральный (у нуклеокапсида, который состоит из белка NP и полимеразных белков Р и L | Капсид икосаэдрический |
Наличие суперкапсида | Двухслойная липидная мембрана, пронизана гликопротеиновыми шипами: HN (гемаллютинирующая и нейраминидазная активность) и F (ответственен за слияние с клеточной мембраной, образование симпластов, проявляет гемолитическую и цитотоксическую активность) | Двухслойная липидная мембрана, включающая гликопротеины Н (гемагглютинин – агглютинирует эритроциты обезьян) и F (белок слияния); под суперкапсидом расположен матриксный белок М. | Двухслойная липидная мембрана, включающая гликопротеины Е1 (агглютинирует эритроциты кур) и Е2 (служит рецептором при контакте с клеткой). Состав антигенов стабилен. Вирион имеет гемагглютинирующую, гемолитическую и слабую нейраминидазную активность |
Эпидемиология
Паротит | Корь | Краснуха | |
Источник инфекции | Больной человек | Больной человек, наиболее заразен в продромальный (катаральный) период и период кожных высыпаний | Инфицированный человек |
Механизмы и пути передачи | Аэрогенный – воздушно-капельный | Аэрогенный – воздушно-капельный, имеются данные о трансплацентарной передаче | Аэрогенный – воздушно-капельный, реже трансплацентарно |
Примечание | Наиболее чувствительны дети 5-10 лет, мальчики болеют чаще. | Вспышки каждые 1-2 года; крупные вспышки – каждые 6-9 лет |
Вирусологическая диагностика
Биологич. объект | Паротит | Корь | Краснуха |
Материал для исследования | Слюна, СМЖ (при подозрении на менингит и менингоэнцефалит), моча | Смывы из носоглотки, выделения с конъюктивы, моча, кровь, СМЖ, секционный материал | |
Куриный эмбрион | Амниотическая полость 7-8-дневного эмбриона, индикация с использованием РГА с 1% суспензией эритроцитов петуха | ||
Культура клеток | Клетки почек обезьян, эмбриона человека, перевиваемые культуры клеток Vero, BHK-21. Индикация по ЦПД (симпластообразование), а также в РГА и РГАдс. Идентификация – РСК, РТГА, РН (цветная проба), РИФ | Первично-трипсинизированные культуры клеток эмбриона человека, почек обезьян или перевиваемые линии Hela, Hep-2 и др (наблюдение ведется 30 дней). ЦПД (образование гигантских клеток и/или синцетиев, либо образует зернистые тельца включений в цитоплазме и ядре). Идентификация – РСК, РТГАдс, РН в культуре клеток по феномену гемадсорбции, ИФА | Культивируется во многих культурах клеток без проявления ЦПД. Его можно наблюдать на перевиваемых культурах ВНК-21, Vero, RK-21, первичных культурах клеток эмбриона человека или кролика. ЦПД – на поверхности монослоя появляются клетки с усиленным светопреломлением, а позже возникают очаги измененных вакуолизированных клеток, которые отслаиваются от стекла. Идентификация – РТГА, РН, РИФ, ПЦР |
Серологическая диагностика.
Паротит: Исследуют парные сыворотки в РТГА, РСК, РН, РТГАдс. Как антиген используют стандартный диагностикум из возбудителей или антигены, которые получают из амниотической или алантоисной жидкости зараженных куриных эмбрионов. Диагностическим считается прирост титра антител во второй сыворотке не менее чем в 4 раза.
Корь: В парных сыворотках (1-я – в первые дни болезни, 2-я – через 10-14 дней) выявляют вируснейтрализующие, антигемагглютинирующие и комплементсвязывающие антитела в РН, РТГА, РПГА, РСК.. Титры антител достигают высоких значений с появлением сыпи.
Краснуха: выявление прироста антител в парных сыворотках проводят с использованием РТГА, РСК, РН, ИФА. Вируснейтрализующие антитела определяются уже на 4-7 день после появления сыпи, комплементсвязывающие – через 2-3 недели после появления сыпи. Диагностическое значение имеет выявление в сыворотке специфических IgM, что говорит о перенесенном недавно заболевании или инфекцию в момент исследования. Обнаружение в сыворотке крови новорожденных специфических IgM свидетельствует о перенесенной внутриутробной краснушной инфекции.
Экспресс-методы диагностики.
Паротит: РИФ (чаще всего метод непрямой РИФ), в специализированных лабораториях используется ПЦР.
Корь: РИФ позволяет выявить вирус в эпителиальных клетках носоглоточных смывов, осадке мочи, лейкоцитах крови, секционном материале; специализированных лабораториях используется ПЦР (определение нуклеиновой кислоты вирионов непосредственно в материале).
Краснуха: РИФ, ИФА, латекс-агглютинация.