Возбудитель псевдотуберкулеза по О - и Н- антигенам подразделены на 13 сероваров, чаще встречаются серовар I, а также III и IV, иерсиниоза - на 34 серовара по О - антигену, чаще от человека выделяют серовары О3 и О9. При температуре от +22 до +25С Y.pseudotuberculosis и Y.enterocolitica имеют жгутиковый антиген и подвижны, при +37C теряют Н - антиген и подвижность.
Y.pestis более однородна в антигенном отношении, имея капсульный антиген (фракция I), антигены T, V - W, белки плазмокоагулазы, фибринолизина, наружной мембраны и др. Чумной микроб выделяет бактериоцины (пестицины), оказывающие бактерицидное действие на псевдотуберкулезный микроб и штаммы кишечной палочки.
Патогенные свойства.
Возбудитель чумы обладает наибольшим патогенным потенциалом среди бактерий. Он подавляет функции фагоцитарной системы, поскольку подавляет окислительный взрыв в фагоцитах и беспрепятственно в них размножается. Факторы патогенности контролируются плазмидами трех классов. В патогенезе выделяют три основных стадии - лимфогенного заноса, бактеремии, генерализованной септицемии.
Возбудители псевдотуберкулеза и иерсиниоза имеют адгезины и инвазины, низкомолекулярные протеины (ингибируют бактерицидные факторы), энтеротоксин. Часть факторов контролируется плазмидами вирулентности.
Клинические особенности.
Чума чаще протекает в бубонной, легочной и кишечной формах. Наиболее опасны больные легочной чумой, которые выделяют с мокротой огромное количество возбудителя).
Иерсиниоз и псевдотуберкулез - кишечные инфекции. Клиника многообразна - региональная лимфоаденопатия (имитирует аппендицит), энтероколиты, реактивные артриты, анкилозирующий спондилит, скарлатиноподобная лихорадка.
Эпидемиологические особенности.
Чума - классический природноочаговый зооноз диких животных. Основные носители в природе - сурки, суслики, песчанки, пищухи, в антропургических (городских) условиях - крысы (чума портовых городов). В передаче возбудителя, особенно в очагах, где преобладают незимноспящие животные, имеют блохи животных, способные нападать и заражать человека. В песчаночных очагах могут заражаться верблюды и представлять эпидемическую опасность.
Псевдотуберкулез и кишечный иерсиниоз в природе передаются грызунами. Способны длительно сохраняться и даже накапливаться при низких температурах, например, в овощехранилищах. Способны вызывать заболевания у сельскохозяйственных животных. Человеку передаются преимущественно с пищевыми продуктами от животных, а также растительного происхождения.
Лабораторная диагностика.
Бактериологической диагностикой чумы могут заниматься только специализированные лаборатории противочумных станций и институтов (1 группа патогенности). Методами экспресс - выявления антигена являются МФА, РПГА с эритроцитарным дагностикумом, сенсибилизированным моноклональными антителами к капсульному антигену, ИФА, РНАТ. Для серологической диагностики может использоваться ИФА, РНАГ, ИФА.
При бактериологической диагностике кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза в связи с накоплением возбудителя при низких температурах (в отличии от большинства других микроорганизмов) материал предварительно забирают в забуференный физиологический раствор и сохраняют в холодильнике с периодическими высевами на среды Эндо, Плоскирева, Серова. Подозрительные колонии пересевают для получения чистых культур, изучают их по биохимическим свойствам и идентифицируют в РА с диагностическими сыворотками.
Для серологической диагностики используют РА и РНГА (на псевдотуберкулез - с I сероваром, на иерсиниоз - с сероварами О3 и О9) с исследованием взятых в динамике инфекционного процесса парных сывороток.
Специфическая профилактика.
Применяется в очагах чумы. Используется живая ослабленная вакцина из штамма EV. Имеется сухая таблетированная вакцина для перорального применения. Для оценки иммунитета к чуме (естественного постинфекционного и вакцинального) может применяться внутрикожная аллергическая проба с пестином.
16. Бруцеллы. Лабораторная диагностика бруцеллёза.
Бруцеллы (род Brucella) – возбудители бруцеллеза человека и животных. В. melitensis, В. abortus и В. suis – вызывают заболевание у человека; B. ovis, B. canis, B. neotomae заболевания человека не вызывают.
Морфология, физиология. Мелкие Гр– коккобактерии размером 0,5-0,7х0,6-1,5 мкм. Также могут быть палочковидной формы; в мазках обычно расположены беспорядочно. Жгутиков не имеют. Спор не образуют. Свежевыделенные штаммы могут образовывать нежную капсулу при культивировании на средах, содержащих 10% иммунной сыворотки барана или лошади, а также при выращивании на куриных эмбрионах.
Требовательны к питательным средам. Для выращивания обычно применяют триптозный, триптозо-казеиново-соевый и кровяной (5% овечьей крови) агары; оптимальная среда для культивирования - печёночный агар Хеддльсона. Выделяемые из организма больных они размножаются очень медленно, рост может быть обнаружен только через 1–3 недели после посева исходного материала. Многократное пересевание в лабораторных условиях делает культуры способными расти в течение 1–2 дней. На плотных питательных средах образуют мелкие, выпуклые, бесцветные с перламутровым блеском колонии S-формы (жемчужины), легко переходят в мукоидную и шероховатую. В жидких средах возникает равномерное помутнение. Под влиянием антибиотиков образуют L-формы.
Бруцеллы строгие аэробы, а В. abortus в первых поколениях требует увеличенной концентрации (5–10%) СО2.
БХ: расщепляют глюкозу и некоторые другие углеводы, разлагать мочевину и аспарагин, гидролизовать белок, пептоны, аминокислоты, выделять каталазу, гиалуронидазу, пероксидазу, липазу, фосфатазу и другие ферменты. Внутри видов бруцелл различают биовары. Их дифференциация основана как на биохимических различиях, так и на способности расти на средах с фуксином и тионином, лизабельности фагом Т6, агглютинабельности моноспецифическими сыворотками.
АГ. Содержат поверхностно расположенный Vi-АГ и соматические видоспецифические АГ А и М, количественное соотношение которых различно у разных видов. У В.melitensis преобладают М-АГы. у В. abortus и В. suis – А-АГ. Для идентификации бруцелл по антигенным свойствам используют реакцию адсорбции агглютининов или монорецепторные сыворотки.
Экология и распространение. Зоонозная инфекция. Возбудители разных видов циркулируют среди животных, от которых заражаются и люди. В.melitensis вызывает заболевания мелкого рогатого скота, В. abortus – КРС, В.suis – свиней. Непатогенные для человека
Бруцеллы устойчивы к действию факторов окружающей среды. Они длительно сохраняют жизнеспособность при низкой температуре. В почве, моче, испражнениях животных, больных бруцеллезом, в навозе, сенной трухе возбудители выживают 4–5 мес., в шерсти– 3– 4 мес., в пыли – 1 мес., в замороженном мясе – до 5 мес. К высокой температуре и дезинфицирующим веществам бруцеллы высокочувствительны: при 60°С погибают за 30 мин, при кипячении – мгновенно. Все дезинфектанты губят бруцелл в течение нескольких минут.
Патогенность и патогенез. Проникновение – алиментарным, контактным и воздушно-капельным путями. Алиментарный путь заражения связан с употреблением в пищу продуктов животноводства (масла, молока, мяса), полученных от больных животных. Контактным путем заражаются чаще ветеринары, зоотехники, работники мясокомбинатов при уходе за больными животными, обработке сырья. Заражение возможно при работе с инфицированной шерстью, ветошью, когда имеет место распыление, попадание бруцелл в воздух. Для человека наиболее патогенными являются В.melitensis – возбудитель болезни мелкого рогатого скота (овец, коз).
Выраженные инвазивные и агрессивные свойства бруцелл обусловливают способность возбудителя проникать в организм через неповрежденные слизистые оболочки. После проникновения в организм распространяются лимфогенным путем, попадают в кровь, а из крови – в селезенку, костный мозг, лимфоузлы, где, локализуясь внутриклеточно, могут длительно сохраняться.
Болезнетворность бруцелл определяется действием эндотоксина. Выделяющиеся ферменты (гиалуронидаза и др.) способствуют распространению микробов в тканях. В патогенезе бруцеллеза имеет значение способность возбудителя размножаться в клетках лимфоидно-макрофагальной системы.
С первых дней болезни возникает реакций ГЗТ, которая сохраняется в течение всей болезни и длительное время после выздоровления.
Иммунитет. В основе иммунитета при бруцеллезе лежит активность системы Т-лимфоцитов. Важную роль играет фагоцитоз и состояние аллергии. Обезвреживание бруцелл происходит при участии антител – опсонинов, агглютининов.
Лабораторная диагностика. Проводится бактериологическим и серологическим методами. Материалом для бактериологического исследования служат кровь, испражнения и моча больных, иногда – спинномозговая жидкость. Выделением возбудителя занимается специальная режимная лаборатория.
Образцы инкубируют в МПБ или бульоне Мартена (можно использовать соевый бульон) при 37°С. При проведении исследования засевают 2 порции среды и в одной создают повышенную концентрацию СО. Через 4-5 сут наблюдают рост бруцелл, нередко в виде мелких колоний, вкрапленных в тяжи фибрина; среда остаётся слегка мутной или прозрачной. После пересева на твёрдые среды отмечают характерный рост колоний, из которых отвивают чистые культуры с последующими идентификацией биохимических свойств, определением способности расти на средах с добавлением некоторых анилиновых красителей (бактериостатический метод Хеддльсона) и определением биотипа реакциями агглютинации.
Серологические исследования. Реакция агглютинации (реакция Райта) - один из основных методов диагностики бруцеллёза. Динамика реакции может быть различной, для неё характерно колебание титров в течение суток; положительная реакция с первого дня заболевания; наиболее высокие титры отмечают через 1-2 мес. Для получения адекватных результатов необходимо использовать негемолизированную сыворотку и Аг, приготовленный из S-форм бруцелл (применять Аг диссоциированных форм нельзя); в эндемичных очагах, вызванных Brucella melitensis, рекомендуют применять гомологичный Аг. Следует помнить, что для реакции Райта характерны проагглютинационные зоны, или прозоны (отсутствие агглютинации в первых разведениях и чёткое её проявление в более высоких разведениях сыворотки). Часто применяют микрометод реакции агглютинации на стекле (реакция Хеддльсона). В острой фазе заболевания диагностическую ценность имеет иммуноферментный метод, выявляющий IgM в сыворотке больного. Выявление неполных AT (реакция Кумбса) с применением антиглобулиновой сыворотки. Для диагностики, особенно при отрицательных результатах бактериологических и серологических исследований, используют аллергические кожные пробы (проба Бюрне), обычно положительные у 70-85% пациентов к концу 1 мес заболевания. В качестве Аг применяют бруцеллин (мелитин, абортин) - протеиновый экстракт культуры бруцелл. Пробу также применяют для проведения эпидемиологических обследований; бывает положительной после вакцинации.
Для выявления возбудителя в молоке широко применяется кольцевая проба Банга.
Профилактика и лечение. Общие и специфические мероприятия ветеринарной службы. Выявляют и ликвидируют бруцеллез среди сельскохозяйственных животных, обезвреживают продукты и сырье животного происхождения. Людей, подвергающихся опасности заражения, вакцинируют живой бруцеллезной вакциной. Лечение бруцеллёза затруднено внутриклеточным паразитизмом бруцелл, что защищает их от действия антимикробных препаратов и AT. Препаратами выбора считают тетрациклин и стрептомицин. В тяжёлых и упорных случаях можно назначить рифампин (рифамицин). Смертность без лечения может достигать 5-10%.
17. Ортомиксовирусы. Лабораторная диагностика гриппа.
Сем PARAMYXOVIRIDAE (лат. para – около, myxa – слизь) включает три патогенных: Paramyxavirus (парагриппа и эпидемического паротита), Morbillivirus (корь) и Pneumovirus (респираторно–синтициальный).
Структура и химический состав. Вирионы сферической формы. В центре – нуклеокапсид со спиральным типом симметрии, окружен внешней оболочкой с шиловидными отростками. Односпиральная «–» РНК. В составе нуклеокапсида есть несколько вирусспецифических ферментов, в том числе РНК-полимераза. Имеет суперкапсид и 3 вирусспецифических белка: 2 – гликопротеины NH (обладают гемагглютинирующей и нейраминидазной активностью), 3 – белок F (участвует в слиянии клеточных мембран с вирусной оболочкой).
АГ. 2 видоспецифических АГ: внутренний S- (нуклеопротеин) и наружный Y-АГ (гликопротеины шиповидных отростков). Общий АГ для всего семейства отсутствует. У ряда парамиксовирусов Y-АГ содержит 2 самостоятельных компонента – гемагглютинин (Н-АГ), др – нейраминидаза (N-АГ).
Репродукция. Парамиксовирусы с помощью рецепторов адсорбируются на клетках. Проникновение – путем рецепторного эндоцитоза или при слиянии вирусной оболочки с цитоплазматической мембраной. Репликация вирусной РНК происходит в цитоплазме. При формировании вирионов происходит модификация отдельных участков мембраны клетки-хозяина (снаружи встраиваются гликопротеины, изнутри – мембранный белок). К этим участкам мембраны по актиновым нитям цитоскелета транспортируются вирусные нуклеокапсиды. Выход вирусных частиц происходит путем почкования. В цитоплазме инфицированных клеток образуются ацидофильные включения.
Экология и распространение. Высокочувствительны к действию детергентов, дезинфектантов, к изменениям температуры. Источник заражения – больные и вирусоносители. Передаются вирусы аэрозольным, иногда контактным путем. Наиболее тяжело протекает у детей раннего возраста. При паротите, кори больной опасен для окружающих начиная с инкубационного периода.
Диагностика. Вирус выделяют из материала (слюна, моча, кровь, смывы из зева и др.) в культуре клеток. Идентификацию вирусов производят по характеру ЦПД и в серологических реакциях (РСК, РВН, РТГА). Для обнаружения вирусных АГ в материале используют иммунофлюоресцентный метод.
Серодиагностика проводится в РСК, РВН, РТГА – с парными сыворотками больных.
ВИРУСЫПАРАГРИППА ЧЕЛОВЕКА (ВПГЧ)
Известно 5 серотипов вируса парагриппа (ВПГЧ-1– ВПГЧ-5).
Парагриппозные вирусы обладают гемадсорбирующей активностью, которая проявляется в инфицированных культурах клеток при добавлении эритроцитов морской свинки. Имеют гемагглютинирующие свойства (у разных серотипов выражены по разному). Все серотипы обладают нейраминидазной активностью и умеренно выраженными гемолитическими и симпластобразующими свойствами. Репродуцируются в первичных, и перевиваемых культурах клеток человека и обезьян. Выраженность ЦПД варьирует в зависимости от серотипа и штамма. Вирусы ВПГЧ-1 и ВПГЧ-4 типов наименее цитопатогенны.
Патогенез. Парагриппозные инфекции протекают по типу ОРЗ. Среди ОРЗ встречается примерно в 10% случаев. Вирусы репродуцируются в эпителиальных клетках слизистой носоглотки, затем поступают в кровь и вызывают вирусемия.
Иммунитет. Типоспецифический гуморальный, сохраняется в течение нескольких лет. В сыворотке обнаруживаются комплементсвязывающие, вируснейтрализующие, антигемагглютинирующие АТ. Большое значение имеют SIgA.
Вакцинопрофилактика не применяется.
Сем ORTHOMYXOVIRIDAE (греч. orthos – правильный, myxa – слизь) – вирусы гриппа типов А, В и С, как и парамиксовирусы, обладают сродством к муцину. Вирус типа А поражают человека и некоторых животных и птиц. Вирусы типов В и С патогенны только для людей.
При классификации возникают трудности, связанные с АГ изменчивостью. Вирусы подразделены на три типа А, В и С.
К типу А отнесены несколько подтипов, отличающихся друг от друга по АГ (NH). По классификации ВОЗ вирусы гриппа типа А разделены на 13 подтипов по гемагглютинину (Н1–13) и на 10 по нейраминидазе (N1–10). Из них в состав вируса гриппа человека типа А входит 3 гемагглютинина (H1–3) и две нейраминидазы (N1 и N2). Но недостатком этой классификации является объединение в единый подтип H1 трех вирусов, отличающихся по характеру вызываемых ими пандемий и эпидемий прошлых лет.
Вирусы типов В и С имеют стабильные АГ, хотя гемагглютинин вируса гриппа В также претерпевает во времени антигенный дрейф.
НОМЕНКЛАТУРА включает ряд обязательных показателей:
тип вируса (А, В и С);
естественный хозяин, если не человек Þ животное;
географическое место выделения;
лабораторный номер штамма;
год выделения
у вирусов типа А в скобках указывается подтип гемагглютинина и нейраминидазы (Хабаровск/90/77 (H1N1)).
Структура и химический состав. Имеет сферическую форму, реже – нитевидные формы. Нуклеокапсид спиральной симметрии – это РНП тяж, уложенный в виде двойной спирали, которая составляет сердцевину вириона. С ней связаны РНК-полимераза (белок Р1) и эндонуклеазы (Р3). Сердцевина окружена мембраной, состоящей из белка M (соединяет РНП с липидным бислоем внешней оболочки и шиловидными отростками, состоящими из Н и N). Липиды и углеводы в составе внешней оболочки и имеют клеточное происхождение. Геном – фрагментированная РНК (вирусы типов А и В имеют 8 фрагментов, из них 5 кодируют по одному белку, а 3 – по 2 белка).
АГ. Вирусы гриппа А, В и С отличаются по типоспецифическому АГ, связанному с РНП и М-матриксным белком, стабилизирующим структуру вириона. Эти АГ выявляются в РСК. Более специфичны для вируса типа А два других АГ – Н и N. Гемагглютинин – сложный гликопротеид, обладает протективными свойствами, индуцирует в образование вируснейтрализующих АТ, выявляемых в РТГА. Изменчивость Н-АГ определяет антигенный дрейф и шифт вирусов гриппа. АГ дрейф – незначительные изменения Н-АГ, вызванные точечными мутациями. При накоплении изменений в потомстве возникает изменение АГ свойств Н. АГ шифте – полная замена гена, в основе – рекомбинации между двумя вирусами. Это приводит к смене подтипа Н или N, и появлению принципиально новых АГ вариантов → крупные эпидемии и пандемии.
С помощью гемагглютинина вирусы адсорбируется на чувствительных клетках (в т.ч. эритроцитах, в результате происходит их склеивание и гемолиз).
Нейраминидаза – фермент, катализирующий отщепление сиаловой кислоты от субстрата. Обладает АГ свойствами, участвует в освобождении вирионов из клеток хозяина.
Культивирование и репродукция. Культивируются в куриных эмбрионах и в культурах клеток (первичные культуры клеток почек эмбриона человека и некоторых животных).
Адсорбируются на гликопротеиновых рецепторах эпителиальных клеток, в дальнейшем проникают путем рецепторного эндоцитоза. В ядре – транскрипция и репликация.
Патогенез. Первичная репродукция – в эпителиальных клетках дыхательных путей, оттуда в кровь (вирусемия), в результате возникает повреждение эндотелиальных клеток капилляров Þ возрастает их проницаемость. В тяжелых случаях – кровоизлияния в легкие, сердце и другие внутренние органы. Попадая в лимфоузлы, повреждают лимфоциты, возникает приобретенный иммунодефицит, а впоследствии - вторичные белковые инфекции.
Может быть интоксикация организма различной степени тяжести.
Иммунитет. Механизм связан с неспецифической защитой (интерферон и НКК).
Специфический иммунитет – макрофаги и Т-киллеры (клеточный) + Ig (антигемагглютинины и антинейроминидазные АТ). Последние в отличие от антигемагглютининов только частично нейтрализуют вирус гриппа, препятствуя его распространению.
АТ обнаруживаются в сыворотке через 3–4 сут. после начала заболевания, достигают максимума через 2–3 нед. Продолжительность специфического иммунитета – несколько десятилетий, т.е. напряженный, строго специфический к тому подтипу вируса (по Н- и N-АГ), который вызвал его образование.
У новорожденных – пассивный, обусловлен IgG к соответствующему подтипу вируса А, сохраняется в течение 6–8 мес.
Эпидемиология. Источник – больные и вирусоносители. Передача воздушно-капельным путем. Грипп относится к эпидемическим инфекциям, возникают в зимние и зимне-весенние месяцы. Примерно через каждые 10 лет эпидемии гриппа принимают характер пандемий, охватывающих население разных континентов. Объясняется сменой у гриппа А типа Н- и N-АГ вируса типа А (АГ дрейф и шифт). Например, вирус гриппа А с гемагглютинином HSW1 вызвал в 1918 г. пандемию «испанки» (20 млн. погибло). В 1968 г. появился новый вариант – вирус гриппа A (H3N2) «гонконгский», он продолжает циркулировать до настоящего времени. В 1977 г. к нему присоединился вирус типа А (H1N1).
Прекращение циркуляции вируса объясняется коллективным иммунитетом населения к данному варианту Þ селекция вариантов, иммунитет к которым еще не сформировался.
Возможно, что резервуаром вирусов являются дикие и домашние животные, особенно птицы. При этом в организме птиц происходят рекомбинации между птичьими и человеческими вирусами, вследствие чего возникают новые АГ варианты.
По другой гипотезе вирусы постоянно циркулируют среди населения, но становятся эпидемически актуальными лишь при снижении коллективного иммунитета.
Вирусы типов В и С более стабильны, вызывают менее интенсивные эпидемии и локальные вспышки.
Вирусы быстро разрушается под действием высокой температуры, УФ, дезинфектантов, детергентов, но сохраняются при низких температурах.
Специфическая профилактика. Для профилактики используют ремантадин, который подавляет репродукцию вируса гриппа типа А. Для пассивной профилактики – противогриппозный Ig из сыворотки доноров, иммунизированных гриппозной вакциной. Используют также человеческий лейкоцитарный интерферон.
Для вакцинопрофилактики – живые и инактивированные вакцины. При введении живых вакцин формируется как общий, так и местный иммунитет.
Получены инактивированные вакцины различных типов:
Вирионные – получают путем высококачественной очистки вирусов, выращенных в куриных эмбрионах.
Субъединичные – очищенные поверхностные АГ (Н и N) – снижена реактогенность и увеличена иммуногенность.
Расщепленные или дезинтегрированные – получают из очищенной суспензии вирионов путем обработки детергентами.
Инактивированные вакцины индуцируют иммунный ответ в системе общего и местного гуморального иммунитета, но в меньшей степени по сравнению с живыми вакцинами индуцируют синтез интерферона.
Вакцины неэффективны, т.к. вакцинные штаммы не соответствуют эпидемическим
Диагностика. ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ– выявление вирусных АГ в цитоплазме эпителиальных клеток слизистой носа и носоглотки в мазках-отпечатках с помощью ИФА и иммуноферментного анализа.
Выделение путем заражения вируссодержащим материалом (смывы из носоглотки в первые дни заболевания) куриных эмбрионов или культур клеток.
Типовую принадлежность определяют РСК. Подтип гемагглютинина – РТГА, подтип нейраминидазы – в реакции ингибирования нейраминидазной активности.
Для серодиагностики используют парные сыворотки, взятые с интервалом в 8-14 дней: в начале заболевания и в период выздоровления. Нарастание титра вирусспецифических антител устанавливают в РСК и РТГА и др. методами.
18. Вирус кори. Лабораторная диагностика кори.
Сем. PARAMYXOVIRIDAE (лат. para – около, myxa – слизь) включает три патогенных: Paramyxavirus (парагриппа и эпидемического паротита), Morbillivirus (корь) и Pneumovirus (респираторно–синтициальный).
Структура и химический состав. Вирионы сферической формы. В центре – нуклеокапсид со спиральным типом симметрии, окружен внешней оболочкой с шиловидными отростками. Односпиральная «–» РНК. В составе нуклеокапсида есть несколько вирусспецифических ферментов, в том числе РНК-полимераза. Имеет суперкапсид и 3 вирусспецифических белка: 2 – гликопротеины NH (обладают гемагглютинирующей и нейраминидазной активностью), 3 – белок F (участвует в слиянии клеточных мембран с вирусной оболочкой).
АГ. 2 видоспецифических АГ: внутренний S- (нуклеопротеин) и наружный Y-АГ (гликопротеины шиповидных отростков). Общий АГ для всего семейства отсутствует. У ряда парамиксовирусов Y-АГ содержит 2 самостоятельных компонента –гемагглютинин (Н-АГ), др – нейраминидаза (N-АГ).
Репродукция. Парамиксовирусы с помощью рецепторов адсорбируются на клетках. Проникновение – путем рецепторного эндоцитоза или при слиянии вирусной оболочки с цитоплазматической мембраной. Репликация вирусной РНК происходит в цитоплазме. При формировании вирионов происходит модификация отдельных участков мембраны клетки-хозяина (снаружи встраиваются гликопротеины, изнутри – мембранный белок). К этим участкам мембраны по актиновым нитям цитоскелета транспортируются вирусные нуклеокапсиды. Выход вирусных частиц происходит путем почкованием. В цитоплазме инфицированных ## образуются ацидофильные включения.
Экология и распространение. Высокочувствительны к действию детергентов, дезинфектантов, к высокой температуре. Источник заражения – больные и вирусоносители. Передаются аэрозольным, иногда контактным путем. Наиболее тяжело протекает у детей раннего возраста. При паротите, кори больной опасен для окружающих начиная с инкубационного периода.
Диагностика. Вирус выделяют из материала (слюна, моча, кровь, смывы из зева и др.) в культуре клеток. Идентификацию вирусов производят по характеру ЦПД и в серологических реакциях (РСК, РВН, РТГА). Для обнаружения вирусных АГ в материале используют иммунофлюоресцентный метод.
Серодиагностика проводится в РСК, РВН, РТГА – с парными сыворотками больных.
ВИРУС КОРИ – обладает признаками, которые присущи другим представителям семейства парамиксовирусов. Но агглютинирует только эритроциты обезьян (макака резус), т.к. они имеют специфические рецепторы, отсутствующие у эритроцитов других видов животных. Не имеет нейраминидазы.
Вирус кори содержит стабильные АГ. Серотипы не обнаружены. Для культивирования используются первичные культуры клеток почек обезьян и эмбриона человека, перевиваемые линии клеток Hela и др. ЦПД проявляется в образовании симпластов.
Патогенез и иммунитет. Первичная репродукция вируса – в эпителиальных клетках слизистой носоглотки и верхних дыхательных путей, откуда вирус проникает в кровь, поражает эндотелий капилляров. Вследствие некротизации этих клеток появляется сыпь. Вместе с тем, подавляет активность Т-лимфоцитов из-за чего возникает вторичный иммунодефицит. В редких случаях проникает в ЦНС, что приводит к энцефаломиелиту. В случае персистирования вируса в лимфоидных тканях и нейронах ЦНС через несколько лет после перенесения заболевания может развиться подострый склерозирующий панэнцефалит – медленная инфекция с летальным исходом.
После перенесения кори формируется гуморальный пожизненный иммунитет. В сыворотке присутствуют комплементсвязывающие АТ и антигемагглютинины. Противокоревые IgG проникают через плаценту и защищают новорожденных на протяжении первых 6 мес жизни.
Специфическая профилактика. Для активной иммунизации детей применяется живая вакцина. Для пассивной – вводят противокоревой Ig, полученный из донорской или плацентарной крови. Продолжительность пассивного иммунитета до 1 мес.
19. Энтеровирусы. Лабораторная диагностика полиомиелита и других энтеровирусных инфекций.
Полиовирусы, вирусы Коксаки и ECHO объединены в род энтеровирусов по патогенетическому признаку - первичной локализации в лимфатических узлах тонкой кишки или носоглотки.
Структура и химический состав. Энтеровирусы представляют собой мелкие вирионы размером 25-40 нм. Их капсид достроен из четырех типов молекул полипептида, уложенных по икосаэдрическому типу симметрии. Внутри капсида содержится однонитчатая линейная молекула РНК. Она входит в нуклеопротеид вириона, состоящий на 20-30% из РНК и на 70-80% из белка. Углеводы и липиды не обнаружены. Внешней оболочки нет.
Резистентность. Энтеровирусы хорошо переносят низкие температуры (-20 -70°С), в замороженном состоянии сохраняются в течение нескольких лет. В составе вирионов нет липидов, в связи с чем они устойчивы к эфиру, хлороформу, дезоксихолату, устойчивы также к рН в диапазоне 3,8-8,5. Чувствительны к нагреванию и окислителям (йод, перманганат калия, хлор и др.). Энтеровирусы не утрачивают своих инфекционных свойств в воде открытых водоемов, что имеет эпидемиологическое значение.
Антигены. Энтеровирусы имеют группоспецифические комплементсвязываюшие антигены, общие для каждого рода, и индивидуальныe типоспецифические, которые выявляются в реакции нейтрализации.Антигенные свойства энтеровирусов связаны с нуклеопротеидом и белками капсида.
Культивирование и репродукция. Энтеровирусы репродуцируются в культуре клеток человека и обезьян, которые обладают специфическими рецепторами липопротеидной природы, адсорбирующими данные вирусы.
Вирион проникает в клетку хозяина прямым путем, не образуя пиноцитарной вакуоли. Дезинтеграция вириона начинается во время адсорбции и проникновения вклетку. Биосинтез вирусной нуклеиновой кислоты и белков осуществляется в цитоплазме. При этом вирусная РНК сама связывается с рибосомами, выполняя функции иРНК, и целиком транслируется с образованием гигантской молекулы полипептида. Затем происходит расщепление полипептида на отдельные фрагменты при помощи протеолитических ферментов. Один из фрагментов является вирусспецифической РНК-зависимой РНК-полимеразой (РНК-репликаза), участвующей в репликации вирусной нуклеиновой кислоты. После образования фонда РНК и фонда капсидных полипептидов начинается сборка вирионов. В одной клетке синтезируется около 150 вирионов полиовируса, которые могут образовывать кристаллические скопления в цитоплазме. На ранних стадиях репродукции энтеровирусов происходят подавление синтеза клеточных белков, РНК и ДНК и освобождение рибосом для синтеза вирионных белков.