Расчета количества антикоагулянта для стабилизации крови.

ВЗЯТИЕ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ДОСТАВКИ МАТЕРИАЛА

ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ СИСТЕМЫГЕМОСТАЗА

Забор крови для коагулограммы наиболее ответственная процедура при оценке состояния свертывающей системы крови из-за того, что, в отличии от других биологических исследований, она сама по себе обуславливает начало гемокоагуляции. Как только кровь покидает кровеносный сосуд и начинает взаимодействовать с пункционной иглой, стенками пробирки, воздухом, происходит активация факторов контакта и тромбоцитов. От степени включения этих реакций во время взятия крови и последующих манипуляций весьма зависят результаты исследования факторов свертывания и форменных элементов крови.

Исследуемый материал. Венозная кровь (сыворотка, плазма), капил­лярная кровь.

Взятие венозной крови проводит медсестра, капиллярной крови — лаборант.

Методика взятия крови из вены. Кровь у обследуемого берут утром, натощак путем пункции локтевой вены сухой острой короткой иглой (для многих исследований силиконированной) с широким просветом без шприца, желательно без наложения жгута на руку. При плохих ве­нах допустим кратковременный веностаз, лишь во время ввода иглы в вену, наложение слабой перетяжки — не более 30 мм ртутного столба. Допустимо производить легкий массаж предплечья по направлению от кисти к локтевому сгибу. Первые 0,5-1 мл крови нельзя использовать для коагулограммы, в частности эта порция крови не годится для исследования свертываемости крови. С первыми 0,5-1 мл вытекающей крови удаляются тканевые примеси следы гемолиза и продукты частичного разрушения эритроцитов.

Кровь в пробирки набирают свободным током, перемешивая ее с антикоагулянтом покачиванием или легким встряхиванием, не допуская образования воздушных пузырьков. До центрифугирования пробирки ставятся в ледяную баню (кружка со льдом и водой). Кровь для иссле­дования функции тромбоцитов охлаждать нельзя. Интервал времени между забором крови и началом исследования существенно сказыва­ется на многих параметрах коагулограммы. Поэтому в результатах анализа следует отмечать время забора крови и время проведения исследования, чтобы при наблюдении за коагулограммой в динамике интервал времени был одинаков и резуль­таты сопоставимы.

Продукты гемолиза, даже когда не видно розоватого подкрашивания плазмы, очень активны и иногда полностью маскируют дефект тромбопластинообразования у больных с тромбоцитопатиями. Они усиливают также антигепариновые свойства плазмы, тормозят фибринолиз и повышают активность фибриназы. В результате создается ложное представление о предтромботическом или гиперкоагуляционном состоянии.

Подготовка лабораторной посуды. Перед взятием крови для иссле­дования системы гемостаза подготавливают секундомеры, иглы, шпри­цы, лабораторную посуду: центрифужные пробирки стеклянные силиконированные (для уменьшения контактной активации гемостаза) или пластиковые, вместимостью 5—10 мл, и кюветы в количестве, необхо­димом для планируемых исследований.

Крайне важно строго соблюдать соотношение между антикоагулянтом и кровью. Потому, как правило пробирки должны быть мерными или иметь метку, до которой должна быть набрана кровь, антикоагулянт в пробирку набирают в лаборатории и стеклографом отмечают уровень, до которого необходимо набрать кровь чтобы было соблюдено правильное объ­емное соотношение крови и антикоагулянта—стабилизатора, равное 9:1, если гематокритный показатель близок к нормальному. Избыток антикоагулянта ведет к ложной гипокоагуляции, а недостаток — к час­тичному или полному свертыванию крови. При больших отклонениях гематокрита от нормы это соотношение меняется, чем выше гематокрит, тем меньше требуется антикоагулянта. Существует специальная таблица (табл. 1), позволяющая точно рассчитать необходимое количество антикоагулянта при различных значениях гематокрита.

Таблица 1.

Расчета количества антикоагулянта для стабилизации крови.

У новорожденных кровь и антикоагулянт следует брать в отношении 19:1 (учитывая гипокоагуляцию новорожденных), то же при врожденных пороках сердца, полицитемии.

В тех случаях, когда для исследования используются различные антикоагулянты, взятие крови целесообразно производить не в одну пробирку, а дробно — в несколько пробирок с соответствующей расфасовкой анти­коагулянта.

Антикоагулянты. В качестве антикоагулянта рекомендуется использо­вать 3,8% раствор цитрата натрия или тринатрийцитрата, поскольку в цитратной крови (плазме) лучше сохраняются лабильные факторы свертывания крови и тромбоциты.

Раствор оксалата натрия (1,34%) используется ограниченно, так как оксалаты образуют с кальцием растворимое соединение (в плазме появляется мелкая зернистость), ускоряется агрегация тромбоцитов, ускоряется инактивация V и VIII факторов.

При использовании ЭДТА (1% раствор двунатриевой соли этилен-диаминотетрацетата) в качестве антикоагулянта из плазмы удаляются ионы Са, Мд. что снижает адгезивно-агрегационную функцию тромбо­цитов.

Некоторые тесты могут быть выполнены из плазмы, полученной из капиллярной крови.

Такие модифицированные микрометоды используются в экспресс-диагностике, а также в случаях, когда получить кровь из вены не удает­ся.

Бывают случаи, когда, несмотря на присутствие антикоагулянта во взятой крови, образуются сгустки, иногда же кровь в пробирке свертывается целиком. Следует иметь в виду, что даже небольшой сгусток исключает проведение исследований в стабилизированной крови так как его образование приводит к частичному или полному снижению уровня фибриногена, имитирующему гипо- или даже афибриногенемическую фазу ДВС-синдрома. В связи с этим лаборантам рекомендуется после взятия плазмы вылить оставшуюся в пробирке эритроцитарную массу в чашку Петри и посмотреть, нет ли в ней нитей фибрина или сгустка. При их наличии выполнение анализа бессмысленно и взятие крови необходимо повторить.

Согласно Методическим рекомендациям Министерства здравоохранения СССР (1979 год) ответственность за соблюдение правил сбора биологического материала для лабораторных исследований несут работники процедурных кабинетов и дежурный персонал.