Слияние опухолевых и дендритных клеток используется при приготовлении пациент-специфичных противоопухолевых вакцин. Технология предусматривает объединение дендритных клеток пациента и его инактивированных опухолевых клеток, при использовании химического или электрослияния. Полученные клетки вводятся обратно пациенту. Технология слияния клеток опять же обходит необходимость идентификации соответствующих специфических опухолевых антигенов, так как они представлены в совокупности всех антигенов, полученных из опухоли. Однажды введённая, опухолевая вакцина стимулирует распознавание и уничтожение иммунной системой опухолевых клеток, имеющих антигены, представленные в вакцине. Антигены, фрагменты протеинов, представленных в опухолевых клетках, выполняют роль маркеров, направляющих иммунную реакцию на эти клетки. Благодаря тому, что вакцины вызывают системный иммунный ответ, они потенциально способны уничтожать опухолевые клетки во всём организме.
Как было показано на различных крысиных моделях, иммунизация гибридами дендритных и опухолевых клеток приводила к возникновению защитного иммунитета и препятствовала развитию опухолей. Имеются как данные работ in vitro, так и опубликованные результаты 1-2 фаз клинических испытаний среди пациентов с прогрессирующей метастатической почечноклеточной карциномой, в которых использовались предшественники дендритных клеток от здоровых людей, слитые с аллогенными либо аутологичными клетками опухоли пациента (Marten et al 2003). В последних было показано увеличение реактивности против возвращаемых антигенов, что наблюдалось у большинства пациентов в виде возросшей цитотоксичности лимфоцитов периферической крови к клеткам почечноклеточной карциномы и увеличения числа интерферон-продуцирующих клеток.
Высокопроизводительная технология электрослияний, используя дендритные и различные мышиные и человеческие опухолевые клетки, способна давать хороший выход эффективных гибридов (15-54%) (Kuriyama et al 2004). Полученные клетки демонстрируют фенотип зрелых дендритных клеток и экспрессируют опухоль-ассоциированные антигены. В преклинических испытаниях на животных модели меланомы B16, трансдуцированной геном LacZ, однократная вакцинация мышей с опухолями, локализованными в лёгких, коже и мозге, привела к опухолевой регрессии и улучшению их выживаемости. Терапевтическая эффективность DCs гибридной вакцины сейчас оценивается в лечении пациентов с метастатической меланомой.
Генетически модифицированные дендритные клетки
При создании DCs-вакцин может быть использована генная инженерия. Получаемые in vitro дендритные клетки трансдуцируют генами, кодирующими опухолеспецифические антигены либо схожие с ними антигены или пептиды. Такие клетки могут быть использованы для индукции цитотоксического Т-клеточного ответа. Генно-инженерные технологии для эффективного генного переноса используют рекомбинантные вирусные векторы, неспособные к репликации. Но наличие на мембране дендритных клеток вирусных (и поэтому чужеродных) антигенов кроме возможности усиления иммунного ответа несёт вероятность ускоренной элиминации этих клеток при последующих курсах иммунизации вследствие развития противовирусного иммунитета к обработанным таким образом дендритным клеткам. Один из способов преодоления этого - использование вирусных векторов, которые не приводят к презентации продуктов вирусных генов на поверхности клетки. Это такие векторы, как ретровирусные или «ослабленные» аденовирусные. Лентивирусы также могут использоваться в приготовлении DCs вакцин, но пока сведений об их использовании в доклинических испытаниях на животных нет. Перед ретровирусами у лентивирусов есть преимущество в том, что для эффективной трансдукции им не требуется репликация В-клетках-мишенях. Преимущество аденовирусов в том, что они обладают малой иммуногенностью за счёт малого количества вирусных эпитопов. В работе Ribas (Ribas et al 2002) обобщаются результаты 52 преклинических исследований противоопухолевых генетически-модифицированных DCs вакцин и представляется информация об оптимальных методиках генного переноса в дендритные клетки, алгоритме введения и механизмах последующего противоопухолевого эффекта. Эти данные смогут помочь выходу этих методов в клинику.