Занятие №3
Тема: Про- и эукариоты. Актиномицеты. Микоплазмы. Хламидии. Риккетсии.
Спирохеты.
Вопросы для обсуждения
1. Понятие об эукариотах и прокариотах, представители. Отличительные признаки эукариотических и прокариотических клеток.
2. Морфология спирохет, классификация, структура, патогенные представители. Методы изучения спирохет. Способы окраски.
3. Риккетсии. Систематическое положение. Сходство с бактериями и вирусами. Морфологические типы риккетсий. Патогенные представители. Способы окраски.
4. Микоплазмы. Положение среди микроорганизмов. Особенности морфологии, значение в патологии человека.
5. Хламидии. Положение среди микроорганизмов. Морфология, патогенные представители.
6. Актиномицеты. Положение среди микроорганизмов. Особенности морфологии, значение в патологии человека.
В практическую тетрадь
1. Заполнить сравнительную таблицу промежуточных групп м/о по следующим признакам (размеры, форма; особенности строения; методы окраски и результаты; методы выделения; окраска по Граму; особенности жизненного цикла; заболевания; сходство промежуточными группами):
Актиномицеты, Микоплазмы, Хламидии, Риккетсии, Спирохеты
2. Зарисовать жизненный цикл:
Хламидий из атласа Воробьёва стр. 100 рис. 3.134
Риккетсии стр. 97 рис 3.129 или стр. 98 рис 3.131
Актиномицеты (со стенда лаборатории)
Спирохеты (три сектора
3. Переписать таблицу «Основные различия клеток прокариотов и эукариотов» +
рисунок и схему «Мир микроорганизмов и промежуточные морфо-физиологические формы»
Задания для выполнения лабораторной работы
1. Изучить под микроскопом и зарисовать демонстрационные препараты прокариотических микроорганизмов: актиномицетов, спирохет, риккетсий.
2. Приготовить мазок из зубного налета, окрасить по методу Романовского- Гимзы, изучить под микроскопом и зарисовать обнаруженные формы микроорганизмов.
Окраска по методу Романовскому-Гимзы относится к сложным универсальным методам окраски микроорганизмов, позволяет выявить ядерные элементы и включения у простейших.
При окрашивании простейших их цитоплазма приобретает голубой цвет, а ядра - красно-фиолетовый. Этот метод используют также для обнаружения риккетсий, хламидий, спирохет, и определения форменных элементов крови.
Техника выполнения окраски по Романовскому-Гимза.
- на мазок нанести рабочий раствор красителя (смесь метиленового синего, эозина и азура - 2 капли на 1 мл дистиллированной воды) на 10-20 мин;
- промыть водой и высушить.
Боррелии - возбудители возвратного тифа (В.гесиггепйз) окрашиваются в фиолетовый, эритроциты крови и цитоплазма лейкоцитов - в розово-красный, ядра лейкоцитов - в фиолетовый цвет. Трепонемы окрашиваются в бледно-розовый цвет, лептоспиры - в розово-сиреневатый цвет.
Окраска по Бурри (Вurri): на тщательно обезжиренном предметном стекле каплю исследуемой культуры микробов смешивают с каплей китайской туши, затем краем другого стекла тонким, ровным слоем распределяют по поверхности предметного стекла, как это делается при исследовании крови, высушивают на воздухе и исследуют с иммерсионной системой под микроскопом. На равномерно серо-черном фоне бледная спирохета имеет вид серебристо-белой спирали.
3. Приготовить мазок актиномицетов, окрасить по Граму, промикроскопиро- вать и зарисовать.
Вопросы для обсуждения
1. Понятие об эукариотах и прокариотах, представители. 2. Отличительные признаки эукариотических и прокариотических клеток. 3. Структурноморфологические особенности актиномицетов. 4. Актиномицеты как переходная группа от истинных бактерий к грибам. 5. Морфология и структура спирохет. 6. Классификация спирохет. 7. Спирохеты как переходная группа от прокариот к простейшим. 8. Особенности морфологии и структуры микоплазм. 9. Полиморфизм микоплазм. 10. Стабильные и нестабильные L-формы бактерий. 11. Морфология и структура риккетсий и хламидий. 12. Отличительные признаки риккетсий и хламидий от вирусов и истинных бактерий. 13. Основные методы окраски актиномицетов, спирохет, риккетсий, хламидий и микоплазм. 14. Техника окраски микроорганизмов по методам Романовского-Гимза и Здродовского.
Дополнительный материал
Основные различия клеток прокариотов и эукариотов
| Признак | Прокариотическая клетка | Эукариотическая клетка | ||
| Размер Анаэробное дыхание Фиксация азота Мембранные структуры | 1-10 мкм Возможно Возможна Только ЦПМ | 10-100 мкм Обычно отсутствует Невозможна Имеются | ||
| Генетический материал | ||||
| Расположение | Нет мембраны, отграничивающей его от цитоплазмы | Отграничен от цитоплазмы ядерной мембраной | ||
| Форма Внехромосомная ДНК Гистоны Тип деления | Кольцевая молекула ДНК (гаплоидность, 1 п) Располагается в плазмидах Отсутствуют Бинарный | Хромосома (диплоидность, 2 п) Располагается в митохондриях Имеются Митоз, мейоз | ||
| Синтез белка | ||||
| Рибосомы Место синтеза | 708 (508и308 субъединицы) Рибосомы, свободно расположенные в цитоплазме | 808 (608 и 408 субъединицы) Рибосомы в составе шероховатой эндоплазматической цепи | ||
| Оболочка | ||||
| Структурные элементы | Клеточная стенка и ЦПМ | ЦПМ | ||
| Наличие пептидогликана Стеролы | Имеется Отсутствуют | Отсутствует (у микроскопических грибов хитин и целлюлоза) Имеются | ||
Рис.3. Основные различия между прокариотической (А) и эукариотической клетками (Б)
Бактериальная (прокариотическая) клетка (А) окружена клеточной стенкой (КС) и цитоплазматической мембраной (ЦПМ). Цитоплазма обильно насыщена рибосомами. Молекула ДНК обычно расположена в центре клетки. Цитоплазма эукариотической клетки (Б) окружена цитоплазматической мембраной (ЦПМ), включает митохондрии (М), вакуоли (В), шероховатую эндоплазматическую сеть с рибосомами (ШЭС), гладкую эндоплазматическую сеть (ГЭС), запасные гранулы (ЗГ) и ядро (Я).