определение токсигенности дифтерийной палочки с помощью реакции преципитации в геле




.

Засев дифтерийной палочки на среду. Метод на агаре-преципитация, для обнаруж экзотоксина у токсигенных культур-диф. пал. на ч.Петри со средой Макклаута кладут бумагу с антитоксмч. сыв. Культуру засевают штрихами, если культура токсигенна-токсин переходит в агар и место соед-я-,,стрелки,, или,,усы,,. Так больны 1 и 3 человек.

Колицинотипирование с целью определения источника инфицирования.

Берут мазки от больных детей, врачей, мед сестер и определяют Аг в мазках и смотрят, где такие же результаты как у ребенка, раковина не является источником.

Реакция нейтрализации ботулинистического токсина антитоксической сывороткой.

Пользуются биологической пробой на любом животном, 1вводят 0,5-1 мл эмульгированного и профильтрованного материала.2, 3 и4 животному смесь материала с 500АЕ антибутулистической сыв типа А, Б и Е. одно животное выживает р-я нейтралийзации. Существуют противобутулистические лечебно-профилактические сыворотки А, В, С, Е.

Р-я флокуляции для определения титра антитоксической сыворотки или анатоксина.

 

Р-я нейтр –флокуляция.Помутненее и выпад в осадок при смешивании токс и анатокс.1ИЕ(иммуногенная Ед-ца)-кол-во анатоксина, котор в смеси с 1 антитокс ед сыв дает начальн флоккул-ю. 1АЕ(анитоксическая единица)- минимальное кол-восыворотки, которая инактивтрует определенное число DLM, происходит р-я иммунологической нейтрализации. В 1 мл-280 ИЕ, в 0.3мл-х,х=84. в 84 ИЕ-2мл,х в 1мл

Х=42

           
Антитоксич сыв 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1
Анотоксин(280ИЕ) 2мл        
результат - - + - -

 

Методы индикации и титрования вирусов при культивировании их в культуре клеток или курином эмбрионе: РГА, цветная проба.

РГА-гемаглютинация, культура Кл+вирус+эритроциты. Если вирус есть то адсорбируются и не смывается. Цв проба: культура Кл+вирус+индикатор. Если нет ЦПД –желтый цвет, есть вирус-красный цвет.

Вирусолигический метод диагностики: идентификация вирусов с помощью РСК, РТГА, РНГА с учетом по цветной пробе.

Вирусологический: 1-забор, 2-размножение, подбор модели культивирования часто Куринный эмбрион, 3-обнаружение. Гемадсорбция, гемагглютинация ЦПД цитопатогенное действие –бляшкообразование или цв проба(красный), 4-идентификация-серологические р-и, по цв пробе, РТГА, р-я торможения гемадсорбции-эр+имун диагност сыв+вирус

РСК- не протекает в организме. Использ. для обнаруж Ат. Опытная система-Аг Ат и С. Индикаторная система-гем сыв и эр барана. титр Аг-наиб кол Аг при котором гемолиз. Титр С –мин кол-во при котором полн гемолиз.Исполз для клещ энцеф.Если р-я при 0.2-это титр а 0.25-рабочая доза, т.е. 25% от титра. При наличии свобод С-гемолиз, а положит рез-т отстствие видимых измен. Интенсивность задержки гемолиза обозначают знаками ++++.Реакция специфична и чувств, использ для серодиагност.

РНГА(непрямой)-нагружают эритроциты, можно латекс или уголь и белок А стафилококка., ищут Ат. Нагруженные Аг эритроциты+исследуемая сыв=агглютинация.

РТГА (торможение) для обнаружения Ат в сыворотке вольного и типа вируса. Сыв разводят 1:5 +в каждую по 0,25 мл суспензии вируса, содержащей 4 гемагглютинирующие дозы вируса(1 ед-наибольшее разведение которое возвают полную агглютинацию эритроцтов.) +эритроциты. Если сыв нейтр. вирус то + р-я задержки. Цв проба вирус есть –кр цвет, нет-желтый.

Серологические методы диагностики вирусных инфекций: РСК, РН, РТГА.

РСК- не протекает в организме. Использ. для обнаруж Ат. Опытная система-Аг Ат и С. Индикаторная система-гем сыв и эр барана. титр Аг-наиб кол Аг при котором гемолиз. Титр С –мин кол-во при котором полн гемолиз.Исполз для клещ энцеф.Если р-я при 0.2-это титр а 0.25-рабочая доза, т.е. 25% от титра. При наличии свобод С-гемолиз, а положит рез-т отстствие видимых измен. Интенсивность задержки гемолиза обозначают знаками ++++.Реакция специфична и чувств, использ для серодиагност.

РТГА (торможение) для обнаружения Ат в сыворотке вольного и типа вируса. Сыв разводят 1:5 +в каждую по 0,25 мл суспензии вируса, содержащей 4 гемагглютинирующие дозы вируса(1 ед-наибольшее разведение которое возвают полную агглютинацию эритроцтов.) +эритроциты. Если сыв нейтр. вирус то + р-я задержки. Цв проба вирус есть –кр цвет, нет-желтый.

РН-идентификаця, титрование. Вводят животным т.к. не дает р-и в пробирке

1. Аг+Ат в пробирке. 2. вводят животнму.

 



Поделиться:




Поиск по сайту

©2015-2024 poisk-ru.ru
Все права принадлежать их авторам. Данный сайт не претендует на авторства, а предоставляет бесплатное использование.
Дата создания страницы: 2016-04-26 Нарушение авторских прав и Нарушение персональных данных


Поиск по сайту: