ДНЕВНИК
Время прохождения практики: «06.07.2015г. по «10.07.015г.
Базы производственной практики: ГБУЗ НО Городская больница №33
Базовый руководитель:Абалихина Елена Павловна
Вузовский руководитель: Бадеева Татьяна Владимировна
| ДАТА | ВЫПОЛНЕННАЯ РАБОТА | ПОДПИСЬ КУРАТОРА |
| 6.07 | Поступила в коагулометрическую лабораторию.В данной лаборатории со всех отделений поступает кровь для исследования на группу крови, определение резус фактора, фенотипирование, определение фибриногена, протромбинового времени и индекса(ПО-ПВ), МНО, АЧТВ, РФМК. ПТИ – это протромбиновый индекс, он показывает на сколько кровь хорошо сворачивается. У здорового человека он должен быть в пределах 70-100, а для адекватной защиты от инсульта на фоне приема варфарина он должен быть 24,0-42,6. Если ПТИ будет меньше, то будет угроза кровотечения, а если больше — то возрастает риск инсульта. МНО – международное нормализационное отношение.Целевой уровень МНО должен быть 2-3, если будет меньше – то профилактика будет не эффективна, если больше, то риск развития серьезных кровотечений превысит пользу от предупрежденных инсультов. Активированное частичное тромбопластиновое время или АЧТВ — это время, за которое образуется сгусток крови после присоединения к плазме хлорида кальцияи других реагентов. АЧТВ — наиболее чувствительный показатель свертываемости крови, определяемый при исследовании системы гемостаза (гемостазиограммы). Норма АЧТВ в среднем — 30—40 сек. РФМК-тест предназначен для количественного определения в плазме крови растворимых фибринмономерных комплексов (РФМК), являющихся маркерами тромбинемии при внутрисосудистом свертывании крови. Определения проводятся мануально. Принцип метода состоит в определении времени появления в плазме, содержащей РФМК, зерен (паракоагулята) фибрина после добавления к ней раствора о-фенантролина. Заполняла журнал учета и заносила полученные результаты. В журнале записывается ФИО больного, его порядковый номер, палата или участок, а затем необходимые ему исследования. После полученные результаты переносятся в направление. | |
| 7.07 | Проводила исследование на определение группы крови и резус фактора. Оснащение: сыворотка антирезус универсальная - AB(IV), контрольная сыворотка, физиологический раствор, тарелки, стеклянные палочки. Кровь для реакции берут из пальца непосредственно перед определением. Можно использовать также свежие (не более 2-дневного хранения при +4 °C) эритроциты, взятые со дна пробирки после центрифугирования или отстаивания от плазмы с консервантом. Техника определения: на тарелку слева наносят одну каплю сыворотки антирезус и справа - одну каплю контрольной сыворотки. Рядом с этими каплями помещают по одной капле крови в количестве 1/2 от объема взятой сыворотки. Стеклянной палочкой перемешивают кровь с сыворотками и размазывают на тарелке до получения тонкого слоя. После этого тарелку периодически покачивают. Через 3 - 4 мин. в обе капли необходимо добавить по одной капле физиологического раствора для снятия возможной неспецифической агглютинации и продолжать наблюдение при покачивании тарелки до истечения 5 мин., после чего учитывают результат. Оценка результатов: при положительном результате агглютинация наблюдается только в одной капле - слева, с сывороткой антирезус. При отрицательном результате агглютинация отсутствует в обеих каплях и они остаются равномерно окрашенными (см. рис. - не приводится). Агрегацию эритроцитов в зоне подсыхания по периферии капли не учитывают Группы крови системы АВО Обозначение группы крови Агглютиногены, содержащиеся в эритроцитах Агглютинины, содержащиеся в сыворотке крови 0(I) 0 a и b A(II) A b B(III) B a AB(IV) A и B 0 | |
| 8.07 | Определяла группу крови человека «простой реакцией». Для определения группы крови простым методом необходимы 8 глазных пипеток (отдельная для каждой группы серии сыворотки), мелкая тарелка, флаконы с изотоническим раствором хлорида натрия и гемагглю-тинирующие сыворотки 4 групп двух серий. Определение крови с помощью стандартных сывороток называется «простой реакцией». Определение производится на тарелке, на которой восковым карандашом наносят-обозначения групп сывороток. Сначала на тарелку наносят по 1—2 капли стандартных сывороток соответственно сделанным надписям в 2 ряда для двух различных серий. В каждую каплю сыворотки добавляют испытуемую кровь, взятую из пальца или из вены, и перемешивают покачиванием. Количество крови должно быть в 10—15 раз меньше, чем сыворотки. За реакцией наблюдают не более 5 минут, после чего делают заключение о группе крови по наличию агглютинации. Различают 4 классические реакции, характерные для 4 групп крови. Возникновение агглютинации эритроцитов (+) при смешивании крови со стандартными сыворотками Группа крови Группа стандартной сыворотки 0(1) А (II) В(Ш) AB(IV) 0(1) - - - + А (II) + - + + В(Ш) + + - + АВ (IV) + + + - Агглютинация, образование «песка» в капле со смесью свидетельствуют о наличии группового антигена. Как проводится двойная перекрестная реакция в сыворотке крови больного? Простой метод определения группового антигена (группы крови) уточняется в изосерологической лаборатории с помощью двойной перекрестной реакции — определением групповых антител а и b в исследуемой сыворотке. Они выявляются с помощью стандартных эритроцитов А и В, заготовленных от доноров, имеющих соответственно А (II) и В (III) группы крови. В 2 отдельные капли сыворотки, нанесенные на тарелки, добавляют стандартные эритроциты групп А и В. Через 5 минут определяют результат по наличию агглютинации, которая выявляет агглютинин а в крови В (III) группы, агглютинин b в крови А (II) группы, агглютинины а и b в крови О (I) группы и отсутствие агглютинации в крови АВ (IV) группы. Затем результат записывала на бланке,и вносила в журнал,с указанием ФИО больного и отделения. | |
| 9.07 | Наблюдала за исследованием крови на коагулометре - Coagulation Analyzer TS 4000. Анализатор TS4000 применяется для оценки показателей свёртываемости крови и использует электромеханический принцип детекции сгустка. На конечный результат анализа не будут влиять такие факторы как гемолиз, лимфа, мутность и вязкость плазмы и тд. Прибор содержит 4 измерительных канала, 16 подогреваемых позиций для образцов, 2 позиции для реагентов без подогрева и 5 подогреваемых позиций для реагентов. TS4000 контролируется микропроцессором, информация отображается на ЖК дисплее, и результат распечатывается на встроенном принтере. Использование автомотической пипетки позволит автоматически начать отсчёт времени реакции. Исследуемые параметры PT (протромбиновое время) APTT (АЧТВ) FIB (фибриноген) TT (тромбиновое время) PROC (протеин С) PROS (протеин S) FACTORS II, V, VII, VIII, IX, X,XI, XII (факторы) AT-III (антитромбин III) LMWH (низкомолекулярный гепарин) HEP (гепарин) PROC (протеин С) PROS (протеин S) Назначение частей прибора: ЖК дисплей: отображается информация. Вы можете настраивать яркость.· Клавиатура: используется для ввода информации.· Принтер: для распечатки результатов.· Ячейки для реагентов: 2 позиции для реагентов нетермостатируемые.· Ячейки для реагентов: 5 термостатируемых позиций для реагентов.· Ячейки для предварительного термостатирования образцов: 16 позиций.· Измерительный блок: 4-х канальный измерительный блок.· Выполнение измерений "Активированное частичное тромбопластиновое время" - Пипетируйте 100 мкл исследуемой плазмы в измерительную кювету. - Добавьте в кювету стальной шарик - Пипетируйте 100 мкл АЧТВ-реагента в кювету - В Основном Меню (MAIN MENU) нажмите клавишу 1 (ANALYSIS). - Используя клавиши [↓],[↑],[→],[←] выберите тест APTT и подтвердите выбор нажатием на клавишу ENTER - Нажмите клавишу TIMER 1 - По истечении заданного времени прозвучит звуковой сигнал. Повторно нажмите клавишу TIMER 1 - Используя стартовую пипетку добавьте 100 мкл кальция хлорида. - По окончании измерения удалите кювету и вставьте другую для проведения следующего анализа Выполнение измерений "Концентрация фибриногена" - Дозатором внесите 100 мкл разведённой плазмы в кювету. - Добавьте в кювету стальной шарик - В Основном Меню (MAIN MENU) нажмите клавишу 1 (ANALYSIS). - Используя клавиши [↓],[↑],[→],[←] выберите тест FIB и подтвердите выбор нажатием на клавишу ENTER - Нажмите клавишу TIMER 1 - По истечении заданного времени прозвучит звуковой сигнал. Повторно нажмите клавишу TIMER 1 - Используя стартовую пипетку добавьте 50 мкл Тромбина для определения фибриногена. - По окончании измерения удалите кювету и вставьте другую для проведения следующего анализ "Тромбиновое время" - Дозатором внесите 100 мкл плазмы в кювету. - Добавьте в кювету стальной шарик - В Основном Меню (MAIN MENU) нажмите клавишу 1 (ANALYSIS). - Используя клавиши [↓],[↑],[→],[←] выберите тест ТТ и подтвердите выбор нажатием на клавишу ENTER - Нажмите клавишу TIMER 1 - По истечении заданного времени прозвучит звуковой сигнал. Повторно нажмите клавишу TIMER 1 - Используя стартовую пипетку добавьте 100 мкл рабочего раствора тромбина. - По окончании измерения удалите кювету и вставьте другую для проведения следующего анализа. | |
| 10.07 | Наблюдала за исследованием крови на анализаторе sysmex СA 600 series. На данном анализаторе можно определить следующие показатели: Определение протромбинового времени (PT). Определение активированного частичного тромбопластинового времени (APTT). Определение уровня фибриногена по Клауссу (Fbg). Определение тромбинового времени (TT). Первичные физиологические антикоагулянты: Определение активности антитромбина III оптическим методом (AT3) Определение активности протеина С оптическим методом (BCPC). Антикоагулянты системной красной волчанки: Определение волчаночного антикоагулянта (LA1) Факторы свертывания крови: Определение активности VIII фактора свертывания крови (Factor VIII) Определение активности IX фактора свертывания крови (Factor IX) Мы же чаще всего определяли АРТТ: Определение активированного частичного тромбопластинового времени (APTT) Для оценки АЧТВ с помощью коагулометра Sysmex CA-500 НПО РЕНАМ рекомендует использовать АЧТВ-тест (кат. № ПГ-7/1). В качестве контроля в нормальной области рекомендуется использовать контрольную плазму «Плазма Н» (кат. № КМ-1), аттестованную по шести основным параметрам (ПВ, АЧТВ, ТВ, УФ, АТ III) в нормальной области, либо Плазму контрольную (кат. № КМ-2), аттестованную по 20 параметрам в нормальной области системы гемостаза. В качестве контроля в патологической области рекомендуется использовать контрольную плазму «Плазма патологическая» (кат. № КМ-3), аттестованную по шести основным параметрам (ПВ, АЧТВ, ТВ, УФ, АТ III) в патологической области, либо Плазму контрольную (кат. № КМ-4), аттестованную по 20 параметрам в патологической области системы гемостаза. Пример инструкции к набору АЧТВ-тест Набор реагентов для определения активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ). АЧТВ является одним из наиболее распространенных и чувствительных тестов для выявления широкого диапазона коагуляционных нарушений. АЧТВ изменяется в зависимости от различных количеств фибриногена, активности протромбина, факторов V, VIII, IX, X, XI, XII, других факторов контакта, присутствия специфических ингибиторов факторов свертывания VIII и IX. АЧТВ является широко применяемым методом контроля эффективности парентерального введения гепарина. Принцип метода К исследуемой плазме добавляют реагент, представляющий собой водный раствор эллаговой кислоты (активатор внутреннего пути свертывания) в комплексе с соевыми фосфолипидами. В процессе измерения АЧТВ регистрируют время от момента добавления ионов кальция до момента образования сгустка. Состав набора АЧТВ-тест: 1. АЧТВ-реагент (4 мл) – 7 флаконов 2. Кальция хлорида 0,025 М раствор (10 мл) – 3 флакона. Состав набора АЧТВ-реагент: АЧТВ-реагент (4 мл) – 3 флакона. Приготовление реагентов и стабильность АЧТВ-реагент. АЧТВ-реагент представляет собой лиофильно высушенный реагент на основе соевых фосфолипидов и активатора – эллаговой кислоты. Внести во флакон с АЧТВ-реагентом 4 мл дистиллированной воды, растворить при покачивании. Реагент готов к проведению анализа через 30 минут после растворения. Стабильность АЧТВ-реагента. Реагент +2-8ºС +18-25ºС -18-20ºС АЧТВ-реагент 14 дней 1 день 2 мес. Кальция хлорида 0,025 М раствор. Является готовым реагентом для проведения анализа. Перед анализом прогреть при 37°С. Повторное прогревание вскрытого флакона не рекомендуется. Стабильность. +2-8°С +18-25ºС +37ºС До окончания срока хранения в закрытом виде 8 часов. Получение исследуемой плазмы для анализа. Венозную кровь отобрать в пластиковую пробирку на 3,8% (0,11 моль/л) цитрате натрия в соотношении 9:1 или в вакуумные системы для взятия крови на 3,2% (0,11 моль/л) цитрате натрия, центрифугировать 15 мин при 3000 об/мин (1200 g). Центрифугирование следует проводить как можно скорее после взятия крови. Немедленно после центрифугирования перенести плазму в пластиковую пробирку. Для анализов достаточно 1,0 мл бедной тромбоцитами плазмы. Время хранения при комнатной температуре - не более 4 часов, при 2-8°С не более 8 часов. Допускается однократное замораживание плазмы при температуре -20ºС. Интерпретация полученных результатов. АЧТВ-реагент не чувствителен к волчаночному антикоагулянту. АЧТВ-реагент чувствителен к присутствию гепарина. Возможно использовать в качестве реагента, позволяющего проводить мониторинг гепаринотерапии. АЧТВ-реагент можно использовать при определении активностей факторов внутреннего пути свертывания. В норме АЧТВ составляет 24-34 секунды. |
ХАРАКТЕРИСТИКА
Студентки 3 курса медико-профилактического факультета 305 группы