Организация службы крови и донорство
В России в 1919 г. ученик С. П. Федорова В. Н. Шамов произвел первое переливание крови с учетом групповой принадлежности, а в 1925 г. другой его ученик — Н. Н. Еланский — написал монографию по переливанию крови. В 1926 г. А. А. Богдановым в Москве был организован Центральный институт по переливанию крови.
Переливание крови особенно широкое применение нашло в годы Великой Отечественной войны. Благодаря ему тысячи жизней были спасены и многие бойцы возвратились в строй.
Основным источником переливания крови является донорство. Донорство всемирно поощряется и является гуманным общественным делом. Многие люди отдают кровь безвозмездно. Донорами могут быть лица обоего пола от 18 до 55 лет, физически и психически здоровые.
У донора проводятся следующие обязательные исследования:
исследование крови, у женщин-доноров количество гемоглобина должно быть не ниже 120 г/л, эритроцитов — 4 000 000, лейкоцитов— 5 000, СОЭ 14 мм/г, у мужчин — количество гемоглобина не ниже 123 г/л, эритроцитов — 4 200 000, лейкоцитов 5500—8000, СОЭ не выше 10 мм/г;
анализ мочи;
исследование крови на плазмодии малярии;
определение реакции на сифилис.
Доноров в обязательном порядке обследуют терапевты и венерологи. Другие специалисты привлекаются для консультации по необходимости.
Противопоказаниями к донорству являются:
инфекционные заболевания (сифилис, бруцеллез, туберкулез, малярия и пр.);
истощение, склонность к отекам, злокачественные опухоли, гипертония и т. д.;
перенесенные операции на желудке и желчном пузыре. Абсолютно противопоказано взятие крови у лиц, перенесших болезнь Боткина.
Временными противопоказаниями служат беременность, лактация, период менструации. После гриппа и ангины взятие крови разрешается только через месяц при полном выздоровлении.
Одноразовое взятие крови производят в количестве 250 мл, реже 450 мл. Повторное взятие крови разрешается через 8 нед. В среднем донор может в год сдать кровь не более 5 раз.
3. Клинико-лабораторное обследование доноров
3.1. При определении показаний к донорству, вида донорства и объема взятия крови или ее компонентов врач руководствуется "Перечнем противопоказаний к донорству крови и ее компонентов", "Интервалами между видами донорства" (приложения 2 и 3), результатами сбора анамнеза, физикального исследования и следующими нормативами:
стандартный объем заготовки крови - 450 мл 10%, без учета крови, взятой для анализов (до 40 мл). Лица с массой тела менее 50 кг допускаются к донорству в индивидуальном порядке по решению врача-трансфузиолога. Объем донации крови у них не должен превышать 12% объема циркулирующей крови (ОЦК), который составляет 6,5 - 7% массы тела.
максимальный объем одной донации плазмы не должен превышать 650 мл, максимальный объем донаций плазмы в год не должен превышать 15 л;
к иммунизации антигенами системы Резус допускаются мужчины в возрасте от 18 до 50 лет, женщины - в период менопаузы;
к иммунизации стафилококковым анатоксином допускаются мужчины в возрасте 20 - 50 лет, женщины к иммунизации стафилококковым анатоксином не допускаются.
донору измеряется температура тела, которая должна быть не менее 36°C и не более 37°C.
определяется частота и ритмичность пульса: в норме - пульс ритмичный, от 60 до 80 ударов в минуту.
допустимые показатели артериального давления: систолическое - в пределах 90-170, диастолическое - 60-90 мм.рт.столба.
интервал между донациями крови должен быть не менее 60 дней. Количество донаций крови в год у мужчин - не более 5, у женщин - не более 4.
При наличии абсолютных противопоказаний к донорству в медицинской документации отражается причина отвода от донорства (первичный донор) или снятия с учета (повторный донор резерва, активный донор).
При наличии временных противопоказаний, выявлении каких-либо видимых нарушений в состоянии здоровья, при подозрении на контакт с инфекционным заболеванием донор направляется на дополнительное обследование.
При отсутствии противопоказаний к донорству врач определяет вид донорства (кровь, плазма, иммунная плазма, клетки крови), объем донаций крови или ее компонентов.
Данные о состоянии здоровья донора, вид донорства и объем взятия крови или ее компонентов заносятся в соответствующую медицинскую документацию, оформляется "Направление на кроводачу, плазмаферез и др.", и донор направляется для донаций.
3.2. Исследование донорской крови
3.2.1. Общие исследования
До кроводачи проводится определение уровня гемоглобина в крови, группы крови системы АВО.
Дальнейший скрининг донорской крови проводится по следующим показателям:
определение группы крови системы АВО двойной (перекрестной) реакцией;
определение антигена D системы Резус (при его отсутствии - определение антигенов С и Е системы Резус; если выявлен любой из указанных антигенов, данный компонент оформляется как резус-положительный; если отсутствуют антигены D, C, E, компонент оформляется как резус-отрицательный);
определение антигена К у доноров эритроцитсодержащих компонентов крови;
антиэритроцитарные аллоантитела (не реже 1раза в год);
антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2 и антиген ВИЧ р24жжж (Примечание);
поверхностный антиген вируса гепатита В;
антитела к вирусу гепатита С;
антитела к бледной трепонеме.
По решению региональных органов управления здравоохранением, перечень исследований может быть расширен (определение активности аланинаминотрансферазы, маркеры бруцеллеза и др.).
Результаты скрининга маркеров гемотрансмиссивных инфекций действительны в течение 10 суток с момента взятия крови на исследования.
3.2.2. Группа крови системы АВО
Если группа крови системы АВО донора определена дважды на образцах крови от разных кроводач двумя различными реактивами с использованием перекрестного метода исследования со стандартными эритроцитами и результаты совпали, то при последующих кроводачах допускается исследование группы крови в лаборатории проводить одной серией стандартных сывороток или моноклональных антител. При необходимости дифференциальной диагностики антигенов А1 и А2 используется реактив анти-А1.
3.2.3. Резус-принадлежность
Первичное исследование резус-принадлежности крови доноров проводится в лаборатории двумя различными методами. Для проведения исследования используют экспресс-метод в пробирках без подогрева (универсальный реагент анти-D), либо метод агглютинации на плоскости с применением моноклональных антител (реактив цоликлон анти-D-супер), метод агглютинации в геле, либо другой утвержденный метод.
Реагенты анти-D-супер, содержащие антитела класса иммуноглобулинов M, не выявляют варианты антигена D (например, DVI). Поэтому все образцы крови доноров, показавшие отрицательный результат с реактивом анти-D-супер необходимо дополнительно исследовать с реактивом анти-D, содержащим неполные антитела (иммуноглобулины класса G) желатиновым методом, экспресс-методом в пробирках с 33% полиглюкином, агглютинацией в геле или антиглобулиновым тестом (реакцией Кумбса). В сомнительных случаях проводится непрямой антиглобулиновый тест (АГТ). Доноры, имеющие слабый антиген D или DVI фенотип, считаются резус-положительными.
При последующих кроводачах, если резус-принадлежность донора определена дважды на образцах крови, взятых от разных кроводач каждый раз двумя сериями реагентов или сывороток, то исследования резус-принадлежности крови проводятся с применением одной серии реагентов.
Все D-отрицательные образцы крови доноров должны исследоваться на наличие или отсутствие антигенов С и Е с сыворотками или моноклональными антителами соответствующей специфичности. Допускается применение полиспецифических сывороток или реагентов анти-DCE, либо одновременно анти-DC и анти-DE. Типирование донорской крови по антигенам С и Е проводится двукратно во время разных кроводач разными сериями сывороток или реагентов. При последующих кроводачах данные исследования можно не проводить.
3.2.4. Исследование антигена К
Определение антигена К (K1) системы антигенов эритроцитов Kell проводят с применением сывороток или моноклональных реагентов анти-К. Типирование донорской крови по антигену К проводится двукратно во время разных кроводач разными сериями сывороток или моноклональных реагентов.
При отсутствии расхождения в результатах типирования, при последующих кроводачах типирование антигена К не обязательно.
3.2.5. Исследование других антигенов
При формировании регистра типированных доноров, предназначенного для подбора компонентов крови сенсибилизированным больным, у доноров определяют дополнительно антигены системы Rh-Hr: c(hr'), e(hr"), CW и других антигенных систем: Lea, Fya, Jka, S.
3.2.6. Определение нерегулярных антиэритроцитарных антител
Нерегулярные антитела подразделяют на имеющие и неимеющие клиническое значение. Под клинически значимыми антителами подразумевают антитела, способные вызывать in vivo разрушение эритроцитов, имеющих на мембране соответствующий антиген, и с существованием которых связаны возникновение гемолитической болезни новорожденных, посттрансфузионные гемолитические осложнения или укорочение выживания перелитых эритроцитов.
Тесты, применяемые для скрининга антител, должны выявлять клинически-значимые антитела и включают: антиглобулиновый тест при 37 оС, либо его модификацию аналогичной чувствительности (раствор низкой ионной силы, гелевый тест), метод с применением 10% желатина и микроскопированием результата.
Эритроциты типированных доноров, предназначенные для исследования антител, могут быть свежезаготовленными или консервированными.
Фенотип стандартных эритроцитов: обычно панель, состоящая из трех образцов эритроцитов группы O. Например: один образец эритроцитов фенотип сcDEЕК-, второй образец: ССDeeК-, третий образец: cсddeeК. Эритроциты и панели должны так же содержать антигены: Fya, Fyb, Jka, Jkb, S, s, CW, Lea (желательно гомозиготы по этим генам). Для исследования антител у доноров допускается применение смеси трех образцов тест- эритроцитов указанных фенотипов.
Сыворотка всех доноров исследуется на наличие антител к антигенам эритроцитов независимо от резус-принадлежности. У доноров, не имеющих в сыворотке антител к антигенам эритроцитов, повторные исследования проводят один раз в год, при отсутствии в анамнезе переливаний крови или беременностей. В случае обнаружения нерегулярных антител исследование по скринингу антител проводят при каждой кроводаче.
В случае обнаружения нерегулярных антиэритроцитарных антител цельная кровь или плазма донора не должна использоваться для переливания (допускается приготовление отмытых или размороженных эритроцитов), такую плазму целесообразно использовать для изготовления типирующих сывороток.