Результатов химико-токсикологических анализов




 

 

№№ пп дата время шифр пробы наименов. ЛПУ, отд. Ф.И.О. мед. карта объект ис-след. найден. вели-чины результат под-пись
взятия доставки вып. иссл.
                         

 

Приложение 2

 

Направление
л и н и я   о т р ы в а

 

 

«» ________ 19 ___ г.

______ час ____ мин.

Гр. _____________________________

объекты исслед. _________________

отобраны в соответствии с Правилами.

 

Врач _____________________

Мед. сестра ________________

Опер. уполн. _______________

Пробы доставлены в ______________

«» _________ 19 __ г. ___ час ___ мин

Химик-токсик. ________

 

(Остается в ЛПУ)

 

Направление   на химико-токсикологическое исследование «» ________19 ___ г. ____ час. _____ мин __________________ направляет на химико-токсикологическое исследование ______________________________________ (объекты исследования) Гр. ______________ № мед. карты ________ на наличие ____________________________ Клинический диагноз: __________________ ______________________________________ Кожа в месте взятия крови обработана ______________________________________ Врач ____________________ Мед. сестра ______________ Опер. уполн. _____________     (Остается в лаборатории)

 

Литература

1. Калетина Н.И. Токсикологическая химия. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008.

2. Плетенева Т.В. Токсикологическая химия. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006.

3. Байзолданов Т. Токсикологическая химия ядовитых веществ, изолиремых методом экстракции. – Алматы,2002.

4. Крамаренко В.Ф. Токсикологическая химия. – Киев: Высшая школа, 1989.

5. Швайкова М.Д. Токсикологическая химия. – М.: Медицина,1975.

6. Белова А.В. Руководство к практическим занятиям по токсикологической химии.- М.:

Медицина, 1976.

7. Еремин С.К., Изотов Б.Н., Веселовская Н.В. Анализ наркотических средств, - М.: Мысль,

1993.

6. Контрольные вопросы (обратная связь)

1. Какие три критерия содержит термин «наркотическое средство» и почему?

2. Что означают термины «наркомания» и «токсикомания»?

3. Какие существуют типы лекарственной зависимости и что они означают?

4. Организация наркологической службы. Наркологический диспансер, его структура и задачи.

5. Документация, заполняемая на амбулаторного больного при первичном обращении.

6. Какие основные документы необходимо иметь при осуществлении химико-токсикологического анализа?

7. Какие данные должны быть указаны в рабочем журнале химика-токсиколога?

8. Правила заполнения журнала регистрации химико-токсикологических исследований.

9. Правила выдачи и подписи «Акта» ХТИ?

1. Тема 2Объекты исследования на наркотические вещества. Подготовка проб. Особенности ХТА средств, вызывающих одурманивание. Выбор методов анализа. Комплексный подход при выборе методов.

2. Цель: Ознакомить студентов с правилами отбора, транспортировки, подготовки и анализа биологических проб для исследования на наркотические вещества, а также комплексным подходом при выборе методов анализа, чтобы студент знал и мог применить их в своей практической деятельности.

Тезисы лекции

В химико-токсикологическом анализе наркотических и токсикологических веществ вызывающих токсикоманию основными биологическими объектами являются биожидкости: моча, кровь, (плазма, сыворотка), слюна, а также смывы. В крови определяют алкоголь, барбитураты, производные 1,4 – бензодиазепина, метаквалон, мепробамат, а в моче - фенотвазин, трициклические антидепрессанты, алкалоиды опия, амфетамины и другие соединения, в смывы – компоненты гашиша.

В любом виде анализа возможными источниками ошибок являются:

1) пробоотбор; 2) методы хранения; 3) приготовление образца; 4) техника эксперимента; 5) предубеждения химика токсиколога.

Правила и меры предосторожности пробоотбора. Результаты анализа зависят от многих факторов, в том числе, правильного отбора, пробы. Для каждого обследуемого необходимо указывать: возраст, пол, использование каких-либо лекарств, алкоголя, кофе, чая, курения. Эти факторы могут влиять не только на характер фоновых соединений, но и на скорость метаболизма анализируемых веществ, и в конечном счете и на концентрацию в биологических жидкостях организма.

Моча отбирается в чистый сухой флакон в количестве не менее 200 мл. Только при исследовании на наличие алкоголя достаточно 8-10 мл мочи. Флакон тотчас закрывают пробкой, которую фиксируют лейкопластырем или алюминиевым колпачком.

Важным фактором мочи, как объекта анализа является величина рН. При величинах рН ниже 6-7, с мочой более эффективно выводятся вещества основного характера, а при рН выше данного предела - вещества кислотного характера. Во время хранения рН мочи увеличивается из-за действия бактериальной флоры, выделяющей аммиак, что является нежелательным.

Рекомендуется хранить образцы мочи при пониженных температурах (при анализе очень быстро разлагающихся веществ - в замороженном виде) с добавлением антисептиков, таких как борная кислота, растворы фторида натрия и др. Однако, при этом следует учитывать их вклад в образующийся аналитический фон.

Из потенциальных эндогенных соединений необходимо учитывать присутствие низкомолекулярных продуктов метаболизма белков, аминокислот и сахаров (амина, мочевина, соли карбоновой кислоты и др.), небольших количеств пептидов и сахаров, стероидов, пигмента уробилина и др.

Кровь (плазма, сыворотка). У вновь поступивших больных кровь в случае необходимости отбирается на химико-токсикологическое исследование одновременно с мочой. Общепринятым является отбор 15-20 мл крови.

Кровь отбирается из поверхностной вены через иглу самотеком в сухой пенициллиновый флакон, содержащий гепарин (3-5 капель на каждые 10 мл крови). Флакон закрывается стандартной резиновой пробкой, которую фиксируют лейкопластырей или алюминиевым колпачком. Содержимое флакона тотчас перемешивают. На флаконы наклеивают этикетки с указанием фамилии, имени, отчества больного, даты, времени, способа и места отбора крови.

Категорически запрещается использовать другие консерванты и стабилизаторы крови, также производить отбор крови шприцем.

Категорически запрещается обрабатывать кожные покровы в местах укола эфиром, спиртом или спиртовыми растворами. Место укола следует обрабатывать водными растворами этакридина (риванола) или фурацилина.

Если для предотвращения свертывания крови используются антикоагулянты, необходимо иметь в виду, что гепарин вытесняет мирные кислоты из мест связывания с альбумином, а ЭДТА и NaF вызывают осмотическую дегидратацию эритроцитов и разбавляют плазму, что в конечном счете будет влиять на количественное определение.

Для замедления энзиматической активности, кровь рекомендуется хранить в холодильнике в замороженной виде.

Эндогенные соединения крови: жирные кислоты, стероидные гормоны, холестерин и др.

На флакон с отобранной пробой должна быть наклеена этикетка с указанием фамилия, имени, отчества пациента, даты и времени отбора пробы.

Примечание. Только для диагностики алкогольного опьянения, возможно, отбирать I мл крови их мякоти пальца в стерильную пипетку, предварительно промытую раствором гепарина в разведении 1:10. Однако, при этом надо помнить, что в этом случае проба не является однородной, так как получается смесь венозной, артериальной а лимфатической крови. Химик-токсиколог должен помнить, что содержание токсического вещества в артериальной или венозной крови может быть различным. На наркотические вещества предпочтительнее анализировать венозную кровь.

При анализе на алкоголь, 1 мл крови, отобранной из пальца, переносят по 0,5 мл во флаконы, содержащие по 0,5 мл раствора 50% трихлоруксусной кислоты. В этих случаях исследование должно проводиться не позднее 1 часа от момента отбора пробы. В других случаях пробы должны быть заморожены.

Слюна. Отобранную пробу слюны центрифугируют и замораживают для замедления ферментативной активности.

Поскольку наркотическое вещество, находящееся в водном растворе плазмы пассивно диффунцируют в слюну, существует определенная корреляция между концентрациями наркотиков в слюне и плазме. В слюне содержатся белковые соединения (альбумины, липопротеиды и др.), которые могут принимать участие в связывании наркотических средств.

Общие правила, меры предосторожности хранения и транспортировки биологических проб. Как указывалось выше, все биологические образцы для замедления энзиматической активности необходимо хранить в холодильнике, а кровь и слюну в морозильной камере.

Чтобы уменьшить поглощение анализируемого вещества стенками стеклянной посуды, отбор и хранение проб лучше всего осуществлять. в полиэтиленовых, полипропиленовых или тефлоновых флаконах с завинчивающимися пробками из этого же полимера. В случае отсутствия таковых, хранить пробы можно в пенициллиновых склянках с резиновыми пробками, обжатыми алюминиевыми колпачками. При этом надо иметь в виду возможную потерю веществ за счет поглощения стенками стеклянной посуды и загрязнение пробы от резиновых пробок.

На всех отобранных пробах указываются фамилия, имя, отчество и возраст обследуемого, время отбора пробы, предварительный диагноз, способ отбора и номер пробы, наименование вещества, на которое необходимо произвести исследование.

Особенности анализа биообъектов на наличие наркотиков у живых лиц. Определение наркотических, психотропных и сильнодействующих веществ в биологических пробах проводят с целью установления факта их употребления. Быстро меняющаяся ситуация в области нелегального оборота наркотиков привела к резкому увеличению числа исследований наркотических и одурманивающих веществ, выполняемых в последние годы химико-токсикологическими лабораториями.

Для определения наркотических и психотропных веществ чаще всего используется моча, как наиболее информативный биообъект исследования. Образец мочи обычно может быть по­лучен в достаточном количестве, а концентрация психоактивных веществ или их метаболитов в нем, как правило, относительно высокая. К недостаткам этого биообъекта следует отнести возможность фальсификации образца. Наиболее типичные способы фальсификации: разбавление, подмена или загрязнение образца. Для установления факта употребления наркотика, спустя недели или месяцы, следует провести исследование волос и ногтей. В табл. 1 приведены данные литературы о времени возможного выявления часто используемых наркотических и психотропных веществ и некоторых их метаболитов в моче.

В соответствии с требованиями надежности, достоверности и доказательности результатов анализов, а также рекомендациями ВОЗ и об­щепринятыми мировыми стандартами, лабораторное исследование на наличие наркотических веществ должно состоять из двух этапов: предварительного (скринингового) и подтверждаю­щего.

Согласно международным правилам методы опре­деления наркотиков разделяют на 3 категории (табл. 2).

Предлагаются следующие варианты их использования:

• А + (А или В, или С);

• В + В + (В или С).

Комбинированные методы (ГХ-МС) рассматриваются как два раздельных метода.

В настоящее время наибольшее распространение в ХТА наркотических и психотропных веществ при скрининговых исследованиях получили иммунохроматографический анализ (ИХА) на тест-полосках, ПФИА и ИФА. Современные ИХМ отличаются высокой чувствительностью, простотой и экспрессностыо исполнения, одновременно позволяют анализировать большое число проб, не требуя дополнительной или специальной их очистки или концентрирования и поэтому удобны для скрининг-диагностики. При получении положительного результата, т.е. когда концентрация вещества превышает пороговую, необходимо провести дальнейшее исследование образца мочи подтверждающими альтернативными методами. При отрицательном результате проведения дальнейшего исследования не требуется.

Ограничения на применение мочи и крови в качестве объектов исследования на присутствие физиологически активных веществ в организме человека:

быстрое разложение, как самих образцов, так и исследуемых веществ, что обусловливает
необходимость проведения исследований в возможно короткие сроки после их отбора;

сложности в интерпретации результатов при обнаружении веществ в количествах, близких
к пределу их обнаружения;

узкий временной интервал, в течение которого возможно обнаружение вещества;

высокая вероятность ложпоположительного результата в случае случайного или предумышленного загрязнения образца.

Альтернативными объектами для определения наркотиков являются волосы, ногти и пото-жировые выделения кожи.

Необходимо проводить раздельное определение веществ, адсорбированных поверхностью этих объектов, и веществ, находящихся in vivo. В случае обнаружения наркогиков на поверхности ис­следуемых объектов следует провести процедуру отмывкис обязательным контролем чистоты. Например, после употребления наркотиков их концентрация на поверхности кожи, волос и ногтей обычно составляет10-6 10-7 г, а после отмывки поверхностных загрязнений 10-8 10-11 г.

Предложены (Симонов Е.А. и др., 2000) следующая схема пробоподготовки образцов кожи, волос и ногтей и методы определения в них наркотиков (рис. 1).

Особенности анализа объектов небиологического происхождения на наличие наркотиков. Разнообразие видов и форм контролируемых веществ, а также действия их производителей (противозаконного рода деятельность), направленные на маскировку и сокрытие своей продукции, обусловливают специфические аспекты криминалистического анализа.

Для отнесения того или иного объекта к какому-либо виду наркотиков с целью установления мер контроля над его оборотом требуется проведение исследований этого объекта несколь­кими независимыми методами. По сложившейся международной и отечественной практике во многих случаях достаточно 2—3 методов. Иногда при анализе сложных смесей число методов значительно увеличивается.

Перед экспертом после отнесения им того или иного образца вещества, изъятого из незаконного оборота, к наркотическим средствам или психотропным веществам, обычно встают следующие вопросы: составлял ли ранее этот образец единую массу с другими образцами, изъятыми у данного субъекта? существует ли связь между этими образцами и каким-либо установленным дилером? если такая связь существует, то какую полезную информацию можно получить о цепи распространения наркотика на местном, региональном или международном уровне? кустарного или заводского производства данные образцы? возможно ли установить источник, в том числе регион, производства наркотика? какие методы применялись для его производства? какие реактивы и прекурсоры при этом использовались?

Для решения этих вопросов эксперт на основе исследования предоставленных образцов наркотика должен:

- установить специфические связи между образцами наркотика и сравнить их с результатами исследований поступавших ранее образцов;

- классифицировать результаты на связанные между собой группы, принимая во внимание всю совокупность образцов, имеющихся в его распоряжении.

Классификация аналитических методовбазируется на принципах обязательного получения полной информации о структуре анализируемого вещества с помощью комплекса методов и рекомендована ведущими экспертными подразделения США, Великобритании, Японии, Гер­мании и ряда других стран, а также группой экспертов ООН.

Иллюстративный материал

Таблица 1.

Время возможного выявлениячасто используемых наркотических

и психотропных веществ и некоторых их метаболитов в моче

Таблица 2.

Международная классификация методов определения наркотиков


 


Рис. 1. Схема определения наркотиков в образцах кожи, волос и попей.

Литература

1. Калетина Н.И. Токсикологическая химия. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008.

2. Плетенева Т.В. Токсикологическая химия. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006.

3. Байзолданов Т. Токсикологическая химия ядовитых веществ, изолиремых методом экстракции. – Алматы,2002.

4. Крамаренко В.Ф. Токсикологическая химия. – Киев: Высшая школа, 1989.

5. Швайкова М.Д. Токсикологическая химия. – М.: Медицина,1975.

6. Белова А.В. Руководство к практическим занятиям по токсикологической химии.- М.:

Медицина, 1976.

7. Еремин С.К., Изотов Б.Н., Веселовская Н.В. Анализ наркотических средств, - М.: Мысль,

1993.

6. Контрольные вопросы (обратная связь)

1. Назовите основные биологические объекты исследования на наличие наркотических веществ.

2. Перечислите возможные источники ошибок при проведении ХТА.

3. Для чего необходимо соблюдать правили и меры предосторожности отбора проб для ХТИ?

4. Каковы правила отбора мочи, крови, слюны?

5. Преимущества исследования волос и ногтей на предмет употребления наркотических веществ.

6. Какова международная классификация методов определения наркотиков?

7. На какие группы наркотиков и с помощью, каких методов проводится обязательное исследование всех проб поступающих в лабораторию?

8. Недостатки мочи и крови, как объектов исследования на наличие наркотиков.

9. Каковы особенности анализа объектов небиологического происхождения на наличие наркотиков?

1. Тема 3Направленный анализ отдельных групп наркотических веществ (опиаты, каннабиноиды, фенилалкиламины, ЛСД). Фармакокинетика, метаболизм. Доказательство в различных объектах исследования.

2. Цель: Ознакомить студента с направленным анализом опиатов, каннабиноидов, фенилалкиламинов, ЛСД, чтобы студент знал и мог применить его в своей практической деятельности.

Тезисы лекции

Опий — натуральный продукт, получающийся при надрезании головок мака. Млечный сок, вытекающий из надрезов, собирают и высушивают. При этом образуется опийная смола, или опий-сырец. Трава мака также используется для получения концентрированного экстракта и ал­калоидов.

Опиаты — это вещества, близкие по химической структуре к морфину. Опиоиды — это вещества, оказывающие морфиноподобное действие на человека (действуют на те же рецепторы), но обладающие иной химической структурой.

В соответствии с данной классификацией к опиатам относят наиболее распространенные в незаконном обороте наркотические средства морфин, кодеин, а также их полусинтетические аналоги — героин (диацетилморфин — ДАМ) и его основной метаболит 6-моноацетилморфин (6-МАМ).

При внутривенном введении морфина максимальный фармакологический эффект развивается через несколько минут, при подкожном и внутримышечном введении — через 15 мин. В дальнейшем содержание морфина в крови резко падает. Около 80% введенной дозы выделяется с мочой в течение 8 ч. Однако следы морфина можно обнаружить в моче спустя 72—100 ч. Время полувыведения морфина 2—3 ч.

При приеме внутрь за 24 ч с мочой выводится 64—90% препарата, но только менее 3% в неизмененном виде. Морфин образуется в ощутимых количествах при метаболизме опи­атов: кодеина, героина и др.

Героин подвергается быстрой биотрансформации в организме. Время обнаружения героина в крови живых лиц не превышает 3—7 мин после введения. При деацетилировании происходит образование 6-моноаце-тилморфина, морфина и его коньюгированных форм — морфин-6-глю-куронида (М-6-Г) и морфин-3-глюкуронида (М-З-Г).

Марихуана — высушенная и измельченная верхняя часть растения с листьями и цветками, где содержание активных веществ наиболее высоко (13-15%).

Гашиш — смола, выделяемая каннабисом в определенный период вегетации, зеленого, темно-коричневого или черного цвета. Содержание основного психоактивного вещества — тетрагидроканнабиола — около 2%, но может достигать 9—10%.

Гашишное масло — концентрированный темный жидкий и вязкий экстракт растительного материала или смолы каннабиса с содержанием психоактивных веществ от 10 до 60%.

Биологическая активность этих средств длительно сохраняется в этаноле или в кунжутном масле, но при хранении на свету или при доступе кислорода со временем уменьшается из-за деградации основного активного компонента.

При курении каннабиноиды всасываются в течение нескольких минут. Содержание КБ и Д9-ТГК в крови становится максимальным через 5—30 мин. Их концентрация в крови быстро снижается вследствие активного метаболизма и распределения по тканям (депонирование в пе­чени и других тканях).

При приеме внутрь всасывание каннабиноидов замедлено: содержание в крови достигает максимальных значений через 1,5—3 ч. Это связано с попаданием вещества в систему воротной вены, в печень, а затем уже в мозг.

Абсорбция Д9-ТГК при курении и приеме внутрь индивидуальна и составляет соответственно 2—50 и 5—20%. Каннабиноиды метаболизируются в основном в печени.

За 5 дней выводится 80—90% принятой дозы Д9-ТПС. Около 20% выделяется с мочой, а 80% — с калом в виде метаболитов, связанных с глюкуроновой или серной кислотой.

Амфетамин (фенил-изопропиламин) является химическим родоначальником нового класса наркотических веществ, образующихся при введении циклического

3,4-метилендиоксизаместителя (группа «экстази»).

Иллюстративный материал

 

 

 

 
 

 

 
 

 

 

Литература

1. Калетина Н.И. Токсикологическая химия. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008.

2. Плетенева Т.В. Токсикологическая химия. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006.

3. Байзолданов Т. Токсикологическая химия ядовитых веществ, изолиремых методом экстракции. – Алматы,2002.

4. Еремин С.К., Изотов Б.Н., Веселовская Н.В. Анализ наркотических средств, - М.: Мысль,

1993.

6. Контрольные вопросы (обратная связь)

1. Опий, его химический состав.

2. Токсикокинетика и биотрансформация морфина, героина.

3. Направленный анализ на опиаты.

4. Марихуана, гашиш, гашишное масло.

5. Токсикокинетика и биотрансформация каннабиноидов.

6. Направленный анализ на каннабиноиды.

7. Фармакология и токсикология амфетаминов.

8. Токсикокинетика и биотрансформация фенилалкиламинов.

9. Направленный анализ на фенилалкиламины.

 

Кредит № 5

Тема 1-2: Группа веществ, изолируемых экстракцией органическими растворителями. Пестициды. Общая характеристика группы. Классификация. Токсичность. Поведение в организме. Методы ХТА. Клиника отравлений. Клиническая диагностика. Методы детоксикации организма.

Цель: Ознакомить студентов с группой веществ, выделяемых из биологического материала экстракцией органическими растворителями, методами их химико-токсикологического анализа и детоксикации организма.

Тезисы лекции:

Пестициды — химические средства, применяемые в сельском хозяйстве для зашиты растений от различных видов вредных организмов и сорняков, а также в гигиене людей и животных. Термин «пестицид» охватывает широкое разнообразие веществ, имеющих свойство уничтожать нежелательные формы жизни. При проведении экспертиз - 3% от общей доли приходится на пестициды. Пестициды классифицируют по назначению, способности проникать в организм вредителя, характеру и механизму действия, токсичности и другим признакам. Обладая выраженной биологической активностью, пестициды могут оказывать токсическое действие на организм животных и человека, что приводит к нарушению работоспособности человека, заболеванию и даже к смерти. Степень токсичности пестицидов зависит от пути их поступления в организм (ингаляционный, пероральный, трансдермальный и др.), от индивидуальных особенностей организма (возраст, пол, наследственность, заболевания и т.д.) и ряда других факторов. Опасность отравления пестицидами зависит от природы соединения, его агрегатного со­стояния (жидкая форма пестицида более опасна, чем твердая), продолжительности контакта, степени летучести токсиканта, его устойчивости в окружающей среде (персистентность), спо­собности к кумуляции (накопление в организме).

Для выбора методов определения пестицидов важно знать их свойства. В этом случае более удобна классификация по химическому строению. В зависимости от химического строения пестициды подразделяются на две группы: неорганической природы (соединения мышьяка, таллия, меди, серы и др.) и органической природы синтетического или биологического проис­хождения. Отдельно можно выделить металлоорганические соединения, например аткилртутные фунгициды. Большинство пестицидов — это органические соединения, которые подразделяются на классы и подклассы (хлорорганические соединения — ХОС, фосфорорганические соединения — ФОС. синтетические пиретроиды — СП, карбаматы и т.д.).

Методы анализа:

Аналитические методы - от простых предварительных цветовых тестов и ТСХ до сложных инструментальных методов.

Предварительные скрининговые испытания - для отдельных методов предлагаются предварительные рекомендации.

Общие скрининговые методы - включают два типа начальных скрининговых исследований: с использованием ТСХ или ГХ.

Идентификация пестицидов - газовая хроматография с масс-селективным детектором, высокоэффективная жидкостная хроматография

Количественное определение пестицидов.

Доступны и широко используются тысячи пестицидов. Большие запасы устаревших пестицидов, которые перестали выпускаться в промышленном масштабе, хранятся на складах и их продолжают применять. Для окружающей среды, человека и животных пестициды, несомненно, представляют опасность. При остром отравлении в первую очередь проявляются специфические симптомы отрав­ления, зависящие от вида и функциональной роли определенных рецепторов токсичности, с которыми взаимодействует пестицид или его метаболит. При хронической интоксикации, проявлению специфических симптомов токсического поражения предшествует длительный период общесоматических расстройств (головная боль, головокружение, ломота в суставах, тошнота, рвота).

Иллюстративный материал:

№ 1 Классификация пестицидов по назначению, способу проникновения и

характеру дейс­твия

 

№ 2 Классификация по степени опасности отравления

Литература:

1. Токсикологическая химия: метаболизм и анализ токсикантов: учебное пособие + СD/ под ред. Н.И. Калетиной. – М., 2008. – 1016 с. Переплет.

2. Токсикологическая химия: учебник / под ред. Т.В. Плетеневой. – 2-ое изд. – М., 2008. – 512 с. Переплет.

3. Крамаренко В. Ф. Токсикологическая химия / В. Ф. Крамаренко. - Киев, «Высшая школа», 1989.- 272 с.

4. Швайкова М.Д. Токсикологическая химия/ М.Д. Швайкова. - М., «Медицина», 1975.-376 с.

 

Контрольные вопросы (обратная связь)

1. Пестициды. Общая характеристика группы.

2. Классификация. Токсичность.

3. Методы химико-токсикологического анализа пестицидов.

4. Клиника отравлений. Клиническая диагностика.

5. Методы детоксикации организма.

Тема 3-4 - Методы определения в биологических объектах пестицидов, представляющих наибольший интерес в химико-токсикологическом отношении.

Цель: Ознакомить студентов сразличными методамианализа пестицидов в биологических объектах, представляющих наибольший интерес в химико-токсикологическом отношении.

Тезисы лекции

Широкий ассортимент пестицидов, различающихся по своим свойствам, делает задачу их оп­ределения чрезвычайно сложной. С этой целью применяют иммунохимические и хроматографические методы. Объектами исследования являются различные коммерческие препараты, продукты домашнего приготовления, косметика, вода, напитки, пища, объекты окружающей среды, образцы биологических жидкостей и тканей.

Пробоподготовка. Разнообразие химических классов пестицидов и их свойств, характера объектов исследования (почва, вода, воздух, пищевые продукты, биологические образцы и т.д.), особенности методов определения влияют на выбор способа пробоподготовки.

Предварительное исследование пестицидов проводят хроматографическими методами (ТСХ и ГХ) или ИХМ. ТСХ применяют для скрининга и идентификации пестицидов в коммерческих препаратах, добавленных к напиткам или пищевым продуктам, биологических жидкостях (содержимое желудка, моча) и тканях.

Исследования образцов крови, объектов окружающей среды на наличие остаточных количеств пестицидов требуют применения более чувствительной техники ГХ. Наличие в молекулах пестицидов атомов фосфора, галогенов, сурьмы или мышьяка позволяет использовать возмож­ности селективных газохроматографических детекторов (АФД, ЭЗД, пламенно-фотометрический — ПФД), а также газохроматографических систем, способных одновременно получать сигналы от нескольких из указанных детекторов или оборудованных современными устройствами для переключения потоков между хроматографическими колонками разной полярности (многомерная хроматография).

Арбитражным методом при определении пестицидов считают ГХ-МС.

Однако с развитием аналитической техники все большее значение приобретает ВЭЖХ с масс-селективным детектированием (ВЭЖХ-МС), особенно при определении термолабильных водорастворимых вешеств. В последние годы разрабатывается скрининговый анализ пестицидов с использованием ИХМ. Лидирующее положение среди ИХМ определения пестицидов занимает гетерогенный твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА), технология ЕП5А. Метод поляризацион­ного флюоресцентного иммуноанализа ( ПФИА ) также успешно применяется для определения пестицидов.

Иллюстративный материал

Таблица 1Условия хроматографирования (стандартные методики США и стран Евросоюза)

 

п/ц Подвижная система для пластин с силикагелем Проявляющие реактивы
  Хлороформ — ацетон (9:1) Аg. RHB,DBQ и Pd
  Хлороформ Последовательная обработка реактивом Драгендорфа. раство­ром хлорида железа (III)и раствором йода в йодиде калия
  Гексан — ацетон (4:1) БРА, ИВР и ЭВО
  Толуол — ацетон (95:5) Аg и Рb
  Дихлорметан DPA
  Этилацетат — изооктан (15:85)  

Литература

1. Токсикологическая химия: метаболизм и анализ токсикантов: учебное пособие + СD/ под ред. Н.И. Калетиной. – М., 2008. – 1016 с. Переплет.

2. Токсикологическая химия: учебник / под ред. Т.В. Плетеневой. – 2-ое изд. – М., 2008. – 512 с. Переплет.

3. Крамаренко В. Ф. Токсикологическая химия / В. Ф. Крамаренко. - Киев, «Высшая школа», 1989.- 272 с.

4. Швайкова М.Д. Токсикологическая химия/ М.Д. Швайкова. - М., «Медицина», 1975.-376 с.

Контрольные вопросы (обратная связь)

1. Особенности изолирования и очистки отдельных групп пестицидов (ФОС, хлорорганические производные, производные карбаминовой кислоты и др.).

2. Методы обнаружения и количественного определения отдельных групп пестицидов (ФОС, хлорорганические производные, производные карбаминовой кислоты и др.).

3. Предварительные методы. Энзим этический метод, его значение.

4. Реакции окрашивания и их сочетание с тонкослойной хроматографией.

5. Перспективы использования газожидкостной хроматографии с селективными детекторами для определения пестицидов в биологических объектах.

 

Тема 5-6 - Группа веществ, изолируемых экстракцией водой в сочетании с диализом. Общая характеристика группы. Токсичность. Обоснование выбора объекта исследования. Способы определения рН среды объекта исследования. Мембранная фильтрация и диализ. Методы химико-токсикологического анализа.

Цель - Ознакомить студентов с группой веществ, изолируемых экстракцией водой в сочетании с диализом, особенностями их изолирования, анализа и токсикологического значения отдельных веществ.

 

Тезисы лекции

К группе веществ, изолируемых экстракцией водой в сочетании с диализом, относятся ми­неральные кислоты — серная, соляная, азотная, щелочи, водный раствор аммиака и ряд солей, из которых токсикологическое значение имеют главным образом нитрит натрия (реже нитрит калия), нитраты натрия и аммония (реже нитрат калия), хлорат калия.

Исследование биологических материалов на наличие этих веществ проводится тогда, когда предварительные испытания дают для этого основания или материалы дела указывают на возможность отравления указанными веществами.

Анионы неорганических и некоторых карбоновых кислот в биологических жидкостях и тканях в настоящее время определяют методами ГХ-ЭЗД, ГХ-ПИД, ГХ-ТИД, ВЭЖХ, ион­ной хроматографии, КЭ, ИСП-МС, флюорометрии, электрохимическими, биохимическими и другими методами. Наиболее распространенным способом анализа смеси анионов, включающей бромид-, йодид-, цианид-, роданид-, нитрит- и сульфид-ионы, в биологических жидкостях является перевод их в летучие пентафторбензильные производные, которые можно детектировать с помощью ГХ- ПИД и ГХ-ЭЗД.

Химические и биохимические методы также применимы в ряде случаев.

Объектами исследования на наличие этой группы веществ являются содержимое желудка, рвотные массы, остатки пищи, части одежды и др. При исследовании на соли к перечислен­ным объектам следует отнести также печень.

Иллюстративный материал

1. При наличии свободной серной кислоты при простой перегонке вследствие постоянного присутствия хлоридов из объекта исследования перегоняется и хлористый водород:

NaCl + H2SO4→НС1 + NaHSO4.

Поэтому исследование на наличие кислот необходимо начинать с серной кислоты.

2. Основания - щелочи - NaOH, КОН и Са(ОН)2; слабое основание -NH4OH.

3. Для экспрессного определения в моче нитритов их превращают в нитромезитилен, который определяют на капиллярной колонке (15 мх0,55 мм) при 100—125 °С с использованием термоинного детектора (ТИД).

 

Литература

1. Токсикологическая химия: метаболизм и анализ токсикантов: учебное пособие + СD/ под ред. Н.И. Калетиной. – М., 2008. – 1016 с. Переплет.

2. Токсикологическая химия: учебник / под ред. Т.В. Плетеневой. – 2-ое изд. – М., 2008. – 512 с. Переплет.

3. Крамаренко В. Ф. Токсикологическая химия / В. Ф. Крамаренко. - Киев, «Высшая школа», 1989.- 272 с.

4. Швайкова М.Д. Токсикологическая химия/ М.Д. Швайкова. - М., «Медицина», 1975.-376 с.

Контрольные вопросы (обратная связь)

1. Общая характеристика веществ, изолируемых экстракцией водой в сочетании с диализом. Токсичность.

2. Обоснование выбора объекта исследования. Способы определения рН среды объекта исследования. Мембранная фильтрация и диализ.

3. Особенности изолирования, анализа и токсикологическое значение отдельных веществ, входящих в данную группу.

4. Химико-токсикологический анализ на группу

5. Документация анализа. Составление заключения.

 

Кредит №6



Поделиться:




Поиск по сайту

©2015-2024 poisk-ru.ru
Все права принадлежать их авторам. Данный сайт не претендует на авторства, а предоставляет бесплатное использование.
Дата создания страницы: 2017-06-11 Нарушение авторских прав и Нарушение персональных данных


Поиск по сайту: