Доклад на тему:
«Парагрипп»
Волгоград 2017
Парагрипп (paragrip — англ., paragrippe — франц.) — острое респираторное вирусное заболевание, характеризующееся умеренно выраженной общей интоксикацией, поражением верхних дыхательных путей, преимущественно гортани.
Таксономия. Впервые выделены в 1956 г. РНК-содержащие вирусы относятся к семейству Paramyxoviridae, роду Paramyxovirus, представлены 5 серотипами.
Морфология, антигенная структура. Вирусы парагриппа относятся к группе РНК-содержащих парамиксовирусов. Морфология вирусов отличается полиморфизмом, чаще встречаются вирионы округлой формы диаметром 100-300 нм. Вирусы имеют сложноорганизованную структуру, состоят из сердцевины, содержащей РНК и белки, и наружной липопротеидной оболочки с шипиками. Различают четыре типа парагриппозных вирусов: тип 1 (сендай-вирус) вызывает у детей круп, фарингиты, пневмонии, тип 2 — катары верхних дыхательных путей, типы 3 и 4 выделили у детей, больных крупом и воспалением легких. Вирусы культивируются на клетках почек обезьян, легких человека, клетках СОЦ и Нер-2, вызывая образование симпластов (слияние клеток в одну массу), которые затем отторгаются.
Культивирование. Парагриппозные вирусы агглютинируют эритроциты человека (0 группы), кур, морских свинок, обезьян. Специфические иммунные сыворотки тормозят реакцию гемагглютинации. Гемагглютинирующие и комплементсвязывающие антитела строго специфичны.
Резистентность. Вирусы нестойки во внешней среде, при комнатной температуре сохраняются не более 4 ч, а полная их инактивация происходит после 30-минутного прогревания при температуре 50°С. Вирусы парагриппа хорошо репродуцируются в культурах клеток, вызывая характерный цитопатический эффект (слияние клеток и образование многоядерных клеток, называемых симпластами или синцитием), а также феномен гемадсорбции.
Восприимчивость животных. В естественных условиях непатогенны для животных.
Эпидемиология. Резервуаром и источником инфекции является человек, больной клинически выраженной или стертой формой парагриппа. Инфекция передается воздушно-капельным путем. Вирусы типов 1, 2 и 3 распространены повсеместно и вызывают заболеваемость в любое время года. Парагриппозные вирусы обусловливают до 20% острых респираторных заболеваний у взрослых и до 30% — у детей.
Патогенез и клиническая картина. Воротами инфекции являются слизистые оболочки респираторного тракта, особенно носа и гортани, где возникают выраженные воспалительные изменения. Глотка и трахея вовлекаются в процесс реже и в меньшей степени. Парагриппозные вирусы репродуцируются в клетках эпителия дыхательных путей, разрушая при этом сами клетки. Размножившиеся вирусы и продукты распада эпителиальных клеток частично проникают в кровь, способствуя развитию лихорадки и других симптомов интоксикации, которая при парагриппе слабо выражена. У детей из-за отека слизистой оболочки гортани и ее воспалительной инфильтрации может возникнуть синдром «ложного крупа». В возникновении пневмоний, как и при гриппе, существенную роль играет наслоившаяся бактериальная флора.
Инкубационный период колеблется от 2 до 7 дней, чаще 3—4 дня. У большинства больных парагрипп протекает как кратковременное заболевание (не более 3—6 дней), без выраженной общей интоксикации. Заболевание возникает остро лишь у половины больных, у остальных оно начинается исподволь, из-за чего больные не всегда обращаются за медицинской помощью в первый день болезни. Интоксикация при парагриппе выражена нерезко, но отмечается у большинства больных. Беспокоит субфебрильная температура тела, общая слабость, головная боль. В клинической картине преобладают признаки поражения верхних отделов респираторного тракта. Частыми проявлениями парагриппа являются боли и першение в горле, заложенность носа, сухой кашель, симптомы ринофарингита. Ларингит и трахеит у взрослых встречаются сравнительно редко (14—20%), значительно чаще у детей. Кроме того, у них может возникнуть острый ларингит с синдромом стеноза гортани («ложный круп»).
Наиболее частым осложнением как у детей, так и у взрослых является пневмония. С ее появлением процесс приобретает остролихорадочный характер со значительным повышением температуры, ознобом, сильной головной болью, болями в груди, усиленным кашлем с выделением мокроты, иногда с примесью крови. Выслушиваются звучные мелкопузырчатые влажные хрипы, чаше над нижними долями легких. Изменения в легких обусловлены вторичной бактериальной флорой и удерживаются до 3-4 нед и более.
Иммунитет. Иммунитет непродолжительный, типоспецифический.
Лабораторная диагностика. Выделение вирусов из отделяемого носоглотки проводят в культурах клеток, идентифицируют с помощью РН, РИФ, РТГА, РСК. Для лабораторного подтверждения диагноза наиболее быстрым является обнаружение вирусных антигенов в эпителиальных клетках слизистой оболочки носа с помощью иммунофлюоресцентного метода. Более четкие результаты дает серологический метод. При помощи РТГА и РСК исследуют парные сыворотки, взятые с интервалом 10—14 дней. Нарастание титра антител к какому-либо типу парагриппозных вирусов в 4 и более раз подтверждает диагноз. Однако серологический метод пригоден лишь для ретроспективной диагностики.
Для вирусологической диагностики парагрипозной инфекции исследуют слизь из задней стенки глотки, нижних носовых ходов, автопсийний материал (ткани трахеи, бронхов, легких). Как правило, материал забирают в первые дни болезни, что связано с высокой концентрацией вирионов в нем. Забор проводят одновременно с помощью 2-3 стерильных ватных тампонов, которые позже погружают в одну пробирку с 5 мл раствора Хэнкса и 5% бычьего сывороточного альбумина или треть бычьей сыворотки крови. Перед последующим выделением вирусов тампоны отжимают и удаляют из пробирки, и после отстаивания отбирают среднюю порцию жидкости для дальнейшего исследования. Присутствующую микрофлору уничтожают добавлением по 500 ЕД / мл пенициллина и стрептомицина, виримуючы пробирки в течение 30 минут при комнатной температуре, и заражают монослоем культур клеток. Материал, который остался, сохраняют некоторое время при температуре -18 ° С для повторного, в случае необходимости, исследования. Доказать наличие вирусов в культурах клеток можно через 2-4 дня по цитопатическим действием. При этом наблюдается образование симпластов с многочисленными ядрами, закругленные контуры клеток, культура приобретает вид твердого сыра (участки отсутствия клеток). С этой целью также широко используется реакция гемадсорбции (РГадс), которую ставят с эритроцитами гвинейских свинок. Начиная с 6-8 дня культивирования вирусов для индикации их в культуре клеток можно использовать РГА с эритроцитами гвинейских свинок. Для типирования парагрипозной вирусов используют РН, РТГА, РСК, РГГ АДС и другие. В реакции торможения гемагглютинации используют 0,7% взвесь эритроцитов гвинейских свинок или человека. Следует обратить внимание, что чувствительность реакции повышается ется, если система "вирусмисткий материал - противовирусная диагностическая сыворотка" инкубировать при комнатной температуре в течение 2 ч или 18 ч при 4 ° С. После добавления соответствующих эритроцитов реакцию еще выдерживают при 22 ° С в течение 1 ч и оценивают результаты. Поскольку различные серотипы вирусов парагриппа имеют общие антигены иммунологические реакции ставят, предварительно сделав разводку диагностических сывороток. Серологический тип вируса определяют по самым титром диагностической сыворотки, которая дала положительный результат. Значительное распространение для идентификации вирусов парагриппа РН. в которой результаты оценивают по гемадсорбции. При ее постановке сначала выдерживают смесь инактивированных прогреванием при 56 ° С ЗО мин типоспецифических диагностических сывороток с выделенным вирусом в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем заражают культуры клеток, инкубируя их при 35 ° С 4-5 дней, и добавляют взвесь эритроцитов гвинейских свинок. После инкубации в течение 20 мин при температуре 37 ° С читают результаты. При нейтрализации сывороткой вирусов парагриппа не наблюдается адсорбции эритроцитов на поверхности клеток.
Серологическая диагностика
Серологическая диагностика проводится с парными сыворотками больного, получают соответственно в начале заболевания и двумя неделями позже. В течение этого времени первую сыворотку хранят в холодильнике в замороженном состоянии. Четырехкратный прирост титра антител определяют параллельно в двух рядах пробирок, используя стандартные методики постановки РТГА и РСК.
Экспресс-диагностика
Экспресс-диагностика является достаточно информативным методом, который позволяет определить вирусы в исследуемом материале. С этой целью часть материала, который был получен для вирусологической диагностики, центрифугируют 5-7 мин при 1000 об / мин. Полученный осадок ресуспендируют в 3-5 каплях надосадочной жидкости и готовят из него мазки. их обрабатывают иммунофлуоресцентный сыворотками и исследуют в люминесцентном микроскопе. Наблюдаются цилиндрические или полигональные клетки и закругленной формы лейкоциты. При наличии вирусов в клетках появляется характерное зеленое свечение цитоплазмы отдельных клеток, в то время как клетки, не содержат вирусов, имеют кирпично-красный цвет. Оценить достоверность результатов позволяет изучение контрольных препаратов. К супернатанта, оставшийся добавляют пенициллин и стрептомицин в концентрации 500 МЕ / мл. Через 30 мин инкубации при температуре 18-20 ° С материалом заражают культуры клеток, которые выращиваются заранее на стерильных предметных стеклах, помещенных в пробирки. Культивируют вирусы в таком состоянии 24-72 часов при температуре 35 ° С, а затем стекла с культурой клеток промывают стерильным буферным раствором и высушивают. Для фиксирования используют охлажденный до -20 ° С ацетон (10-20 мин при комнатной температуре), позже стекла высушивают и обрабатывают специфическими иммунофлуоресцентный сыворотками (прямая или косвенная реакция иммунофлюоресценции). Определить незначительное количество вирусов в любом исследуемом материале можно, используя методы генетической диагностики, и. частности, полимеразной цепной реакции.
Лечение. Больные с неосложненным течением парагриппа получают симптоматическое лечение в амбулаторно-поликлинических условиях (на дому). При развитии осложнений (3-4% всех больных) лечение проводится в инфекционном стационаре.
Профилактика парагриппа в большей мере основана на проведении всех противоэпидемических мероприятий, необходимых при воздушно-капельных инфекциях.