6.1.1. Трубчатая кость (поперечный срез диафиза). Окраска тионином с пикриновой кислотой (при данной окраске цвет межклеточного вещества варьирует: желтый, зеленовато-коричневый, пурпурный).
При малом увеличении сориентировать препарат выпуклым контуром вверх (наружная поверхность кости), а костными выступами вниз.
Снаружи кости находится надкостница (А). Наружный слой (а) надкостницы представлен плотной соединительной тканью с кровеносными сосудами, а внутренний слой (б) – содержит остеобласты и их предшественники (1). Под надкостницей расположено компактное вещество кости (Б). В компактном веществе диафиза найти и зарисовать три слоя костных пластинок. Параллельно ровной наружной поверхности кости расположен слой наружных общих пластинок (I). Большую часть диафиза занимает остеонный слой (II). На границе с костномозговым каналом расположен слой внутренних общих пластинок (III), имеющий неровную поверхность с выступами. Изнутри костно-мозговой канал выстлан тонкой прослойкой соединительной ткани, называемой эндост (В).
Основными структурно-функциональными единицами компактного вещества кости являются остеоны (2). В каждом остеоне различают канал остеона (3), содержащий кровеносный сосуд и концентрические пластинки остеона (4). Между остеонами расположены вставочные пластинки (5). Наружной границей остеона является спайная линия (6). Центральные каналы соседних остеонов могут соединяться друг с другом или с надкостницей при помощи прободающего канала (7), в котором также проходят кровеносные сосуды.
На большом увеличении микроскопа рассмотреть и зарисовать остеоциты (8), тела которых лежат в лакунах между костными пластинками, и костные канальцы с отростками остеоцитов (9), имеющие в остеоне радиальную ориентацию в сторону канала остеона.
Зарисовать препарат с малого увеличения микроскопа, а с большого увеличения врисовать остеоциты и костные канальцы. Сделать обозначения.
6.1.2. Развитие кости на месте мезенхимы – остеоидная стадия (закладка нижней челюсти у эмбриона). Окраска гематоксилином и эозином.
При малом увеличении найти закладку кости, которая имеет ажурный вид и окрашена оксифильно. При большом увеличении рассмотреть мезенхимные клетки (1), которые окружают закладку костной ткани, и их скопление – остеогенный островок (2). Неминерализованное межклеточное вещество развивающейся костной ткани– остеоид (3) окрашено оксифильно за счет преобладания в нем коллагеновых волокон. На поверхности остеоида располагаются плотно прилежащие друг к другу остеобласты (4). Их форма варьирует от цилиндрической – активные остеобласты (4а), до уплощенной – неактивные остеобласты (4б). Цитоплазма остеобластов окрашивается базофильно за счет наличия развитой гранулярной эндоплазматической сети. Внутри межклеточного вещества замурованы остеоциты (5), имеющие светлую цитоплазму и отростки, которыми они соединяются друг с другом, формируя в дальнейшем лакунарно-канальцевую систему. В тех участках, где расположены неактивные остеобласты, можно обнаружить клетки, разрушающие костную ткань, – остеокласты (6). Остеокласты имеют крупные размеры, множество ядер. В препарате можно встретить остеокласты с оксифильной цитоплазмой (6а) и остеокласты с базофильной цитоплазмой (6б). Вокруг развивающегося зачатка костной ткани в большом количестве обнаруживаются кровеносные сосуды (7). Обильное кровоснабжение является обязательным условием прямого остеогистогенеза, так как высокая концентрация кислорода способствует дифференцировке мезенхимных клеток в остеогенные клетки.
Зарисовать участок развивающейся кости с окружающей мезенхимой и кровеносными сосудами, сделать обозначения.
6.1.3. Развитие кости на месте хряща (продольный срез зачатка трубчатой кости). Окраска гематоксилином и эозином.
При малом увеличении рассмотреть части развивающейся трубчатой кости – хрящевой эпифиз (I) и диафиз (II). Эпифиз образован гиалиновой хрящевой тканью. По периметру диафиза видна ярко оксифильная костная манжетка (1), богатая коллагеновыми волокнами и костными клетками - остеоцитами и остеобластами. Костная манжетка – отражение 1-й стадии непрямого остеогистогенеза – процесса перихондрального окостенения. Снаружи манжетка покрыта первичной надкостницей. Надкостница (2) представлена волокнистой соединительной тканью; в области хрящевых эпифизов ее продолжением становится надхрящница (3). Обратите внимание на отсутствие надхрящницы в области будущих суставных поверхностей соседних эпифизов. Внутри диафиза начинает формироваться костномозговая полость (4). В ней и на границе диафиза с эпифизом формируются участки эндохондрального окостенения (соответствуют 2-й стадии непрямого остеогенеза), имеющие вид неправильной формы очагов с базофильными остатками хряща в центре и слоем молодой оксифильной костной ткани по периферии. Такие образования получили название - костно-хрящевые балки (5). На границе эпифиза с диафизом формируется метаэпифизарная хрящевая пластинка роста (6). В ней выделяют 3 зоны: пограничную, зону столбчатых клеток и зону пузырчатых клеток. П ограничная зона (7), находящаяся на границе с хрящевой тканью эпифиза; зона столбчатых клеток (8) состоящая из уплощенных делящихся хондроцитов, которые выстраиваются столбиками; зона пузырчатых клеток (9), в которой расположены уже дегенеративно измененные хондроциты с вакуолизированной, слабо окрашенной цитоплазмой.
Зарисовать при малом увеличении половину развивающейся трубчатой кости (один эпифиз и часть диафиза), отметить все зоны и два вида окостенения. На учебных таблицах найти и рассмотреть дальнейшие процессы остеогенеза, разобрать механизмы роста костей в длину и толщину.
6.2. Схемы и таблицы по теме занятия: