Лабораторная диагностика

Патогенные анаэробы

Патогенные анаэробы относят преимущественно к клостридиям – это многочисленная группа почвенных анаэробных бацилл, включающая 61 вид, однако, только 12 из них патогенные.
Экологическая особенность анаэробов: способность к сапрофитическому существованию, высокая устойчивость к неблагоприятным воздействиям среды, обеспечиваемая спорообразованием.
Место обитания анаэробов: почва и желудочно-кишечный тракт животных.

Семейство Bacillacea
Род Clostridium

Виды: C. tetani – возбудитель столбняка - остропротекающая неконтагиозная раневая инфекция, при которой нервная система поражается экзотоксином микроба. Восприимчивы все виды животных и человек. Фактор патогенности: экзотоксин
C. botulinum – возбудитель ботулизма - остропротекающий кормовой токсикоз. Восприимчивы все виды животных, птицы и человек. Фактор патогенности: ботулинический экзотоксин
C. chauvoei – возбудитель эмфизематозного карбункула – острая неконтагиозная инфекционная болезнь, характеризующаяся развитием крепитирующих отеков в массивных группах мышц, хромотой и быстрой гибелью животных. Восприимчивые животные: крупный рогатый скот, реже мелкий рогатый. Факторы патогенности: экзотоксин, гиарулонидаза, гемолизин.
C. perfringens	– возбудители злокачественного отека (газовая гангрена, раневой газовый отек, газовая инфекция) – острая неконтагиозная раневая инфекция, вызываемая группой патогенных клостридий. Восприимчивы все виды животных и человек. Факторы патогенности: экзотоксины, протеолитические, сахаролитические, гемолитические ферменты.
C. septicum
C. novyi
C. histolyticum
C.sordellii
C. septicum- возбудитель брадзота овец – острая неконтигаозная болезнь овец, характеризующаяся геморрагическим воспалением сычуга и двенадцатиперстной кишки с образованием газа в пищеварительном тракте, заканчивается летально. Восприимчивые животные: овцы
C. perfringens - возбудитель инфекционной анаэробной энтеротоксемии – острая неконтагиозная болезнь различных видов животных, характеризующаяся геморрагическим энтеритом, кровоизлияниями на слизистых оболочках, поражением почек, выраженной токсемией. Восприимчивые животные: новорожденные ягнята (анаэробная дизентерия ягнят), овцы всех возрастов (инфекционная энтеротоксемия овец, “мягкая почка”), телята (энтероксемия крупного рогатого скота), поросята, пушные звери, птицы. Факторы патогенности: экзотоксины.
Fusobacterium necrophorum - возбудитель некробактериоза – хроническая инфекционная болезнь, характеризующаяся гнойно-некротическими поражениями кожи, слизистой оболочки и конечностей. Восприимчивы все виды животных, птицы и человек. Факторы патогенности: эндотоксины
Bacteroides nodosus - возбудитель копытной гнили – хроническая инфекционная болезнь, характеризующаяся мацерацией и воспаление кожи межкопытной щели, гнойно-гнилоснтым распадом копытного рога. Восприимчивые животные: козы, овцы. Факторы патогенности: протеаза, экзотоксин.

Лабораторная диагностика

1. Материал для исследования при подозрении на:

2. Микроскопия (окраска по Граму, по Муромцеву);

3. Культивирование на МППБ и сахарном кровяном МПА. Облигатные анаэробы, рост при 37^oС в течение 18-20 ч

Культурально-морфологические свойства анаэробов
Вид	Морфология	Культуральные свойства
Окраска по Граму	Спора	Капсула	Подвижность	Размеры бактериальной клетки
C. tetani	+	+	-	+	Тонкие, стройные па-лочки до 6 мкм, спора округлая на конце микробной клетки	Строгий анаэроб. На МППБ – мелкохлопчатое помутнение с незначительным газообразованиемНа сахарном кровяном МПА – нежный налет с периферическими отростками, вокруг колоний гемолиз
C. botulinum	+	+	-	+	Крупные палочки с закругленными концами, споры располо-жены терминально	Строгий анаэроб, срок культивирования 48-72 ч.На МППБ – помутнение среды с газообразованием, характерный запах прогорклого масла. На кровяном МПА – колонии крупные с корневидными отростками и зоной гемолиза
C. chauvoei	+	+	-	+	Полиморфные, толстые палочки до 8 мкм	На МППБ – помутнение, осадок, газообразование незначительное. На сахарном кровяном МПА – колонии в виде “перламутровой” пуговицы, узкая зона гемолиза
C. perfringens	+	+	+	-	Толстые, короткие палочки, располагаются одиночно	На МППБ – обильное помутнение с газообразованиемНа сахарном кровяном МПА –мелкие колонии,вокруг колоний гемолиз
C. septicum	+	+	-	+	Изолированные палочки с закругленными концами.В мазках-отпечатках образуют нити	На МППБ – интенсивное помутнениеНа сахарном кровяном МПА – сплошная нежная пленка, зона гемолиза
C. novyi	+	+	-	+	Крупные палочки, располагаются одиночно	На МППБ - обильное помутнение с газообразованием. На сахарном кровяном МПА – колонии в виде спутанного клубка, гемолиза нет
C.sordellii	+	+	-	+	Крупные полиморфные палочки, располагаются цепочками по 2-4 клетки	На МППБ - обильное помутнение в нижней части среды, газообразование умеренноеНа сахарном кровяном МПА – корневидные, неправильной формы колонии с сероватой шероховатой поверхностью, гемолиз сильный, но может отсутствовать
C. histolyticum	+	+	-	+	Тонкие, стройные, с закругленными концами, расположенные одиночно, попарно	На МППБ – рост в виде умеренного помутненияНа сахарном кровяном МПА – колонии в виде росинок, без гемолиза
Fusobacterium necrophorum	-	-	-	-	Полиморфный микроорганизм: кокки, палочки до 3 мкм и нити	На МППБ – интенсивное помутнение, слабое газообразованиеНа сахарном кровяном МПА – мелкие росинчатые колонии
Bacteroides nodosus	-	-	-	-	Полиморфный микроорганизм: крупные до 8 мкм прямые или слегка изогнутые палочки, мелкие палочки с утолщениями	На МППБ – осадок на дне в виде тяжейНа сахарном кровяном МПА – плоские блестящие шероховатые колонии

4. Биопроба:

столбняк	Белые мыши или морские свинки - вводят экстракт исследуемого материала подкожно в заднюю лапку двум-трем животным. При наличии токсина через 2-4 сут у животных наблюдают тетанические судороги и гибель.
ботулизм	Экстракты из исследуемого материала фильтруют и делят на две части, одну из них прогревают 20-30 мин на водяной бане при 100oС. Заражают фильтратом внутривенно или внутрибрюшинно двух белых мышей, морским свинкам вводят экстракт фильтрата подкожно. При наличии токсина ботулизма животные, зараженные некипяченым экстрактом фильтрата, погибают на 2-5 день с характерными клиническими признаками.
злокачественный отек	Морские свинки, кролики, белые мыши - внутримышечно
некробактериоз	Кролики – подкожно в заднюю треть наружной поверхности уха (некроз); белые мыши – подкожно, в области корня хвоста (припухлость и нагноение)

5. Серологическая диагностика:

6. Аллергическая диагностика: не применяется;

7. Биопрепараты для: