Вирусы – микроорганизмы, составляющие царство Vira.
Отличительные признаки:
1) содержат лишь один тип нуклеиновой кислоты (РНК или ДНК);
2) не имеют собственных белоксинтезирующих и энергетических систем;
3) не имеют клеточной организации;
4) обладают дизъюнктивным (разобщенным) способом репродукции (синтез белков и нуклеиновых кислот происходит в разных местах и в разное время);
5) облигатный паразитизм вирусов реализуется на генетическом уровне;
6) вирусы проходят через бактериальные фильтры.
Вирусы могут существовать в двух формах: внеклеточной (вириона) и внутриклеточной (вируса).
По форме вирионы могут быть:
1) округлыми;
2) палочковидными;
3) в виде правильных многоугольников;
4) нитевидными и др.
Размеры их колеблются от 15–18 до 300–400 нм.
В центре вириона – вирусная нуклеиновая кислота, покрытая белковой оболочкой – капсидом, который
имеет строго упорядоченную структуру. Капсидная оболочка построена из капсомеров. Нуклеиновая
кислота и капсидная оболочка составляют нуклеокапсид.
Нуклеокапсид сложноорганизованных вирионов покрыт внешней оболочкой – суперкапсидом, которая
может включать в себя множество функционально различных липидных, белковых, углеводных структур.
Строение ДНК– и РНК-вирусов принципиально не отличается от НК других микроорганизмов. У некоторых
вирусов в ДНК встречается урацил.
ДНК может быть:
1) двухцепочечной;
2) одноцепочечной;
3) кольцевой;
4) двухцепочечной, но с одной более короткой цепью;
5) двухцепочечной, но с одной непрерывной, а с другой фрагментированной цепями.
РНК может быть:
1) однонитевой;
2) линейной двухнитевой;
3) линейной фрагментированной;
4) кольцевой;
5) содержащей две одинаковые однонитевые РНК.
Вирусные белки подразделяют на:
1) геномные – нуклеопротеиды. Обеспечивают репликацию вирусных нуклеиновых кислот и процессы
репродукции вируса. Это ферменты, за счет которых происходит увеличение количества копий материнской
молекулы, или белки, с помощью которых на матрице нуклеиновой кислоты синтезируются молекулы,
обеспечивающие реализацию генетической информации;
2) белки капсидной оболочки – простые белки, обладающие способностью к самосборке. Они
складываются в геометрически правильные структуры, в которых различают несколько типов симметрии:
спиральный, кубический (образуют правильные многоугольники, число граней строго постоянно) или
смешанный;
3) белки суперкапсидной оболочки – это сложные белки, разнообразные по функции. За счет них
происходит взаимодействие вирусов с чувствительной клеткой. Выполняют защитную и рецепторную
функции.
Среди белков суперкапсидной оболочки выделяют:
а) якорные белки (одним концом они располагаются на поверхности, а другим уходят в глубину;
обеспечивают контакт вириона с клеткой);
б) ферменты (могут разрушать мембраны);
в) гемагглютинины (вызывают гемагглютинацию);
г) элементы клетки хозяина.
2. Принципы классификации вирусов.
В основу классификации вирусов положены следующие категории:
• тип нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК), ее структура, количество нитей (одна или две), особенности
воспроизводства вирусного генома;
• размер и морфология вирионов, количество капсомеров и тип симметрии;
• наличие суперкапсида;
• чувствительность к эфиру и дезоксихолату;
• место размножения в клетке;
• антигенные свойства и пр.
Вирусы имеют уникальный геном, так как содержат либо ДНК, либо РНК. Поэтому различают:
а) ДНК-содержащие
б) РНК-содержащие вирусы.
Они обычно гаплоидны, т.е. имеют один набор генов. Геном вирусов представлен различными видами
нуклеиновых кислот: двунитчатыми, однонитчатыми, линейными, кольцевыми, фрагментированными.
Среди РНК- содержащих вирусов различают вирусы с положительным (плюс-нить РНК) геномом. Плюс-нить
РНК этих вирусов выполняет наследственную функцию и функцию информационной РНК (иРНК).
Имеются также РНК-содержащие вирусы с отрицательным (минус-нить РНК) геномом. Минус-нить РНК этих
вирусов выполняет только наследственную функцию.
Вирусы — мельчайшие микробы, не имеющие клеточного строения, белоксинтезирующей системы,
содержащие только ДНК или РНК. Относятся к царству Vira. Являясь облигатными внутриклеточными
паразитами, вирусы размножаются в цитоплазме или ядре клетки. Они — автономные генетические
структуры. Отличаются особым — разобщенным (дисъюнктивным) способом размножения (репродукции):
в клетке отдельно синтезируются нуклеиновые кислоты вирусов и их белки, затем происходит их сборка в
вирусные частицы. Сформированная вирусная частица называется вирионом.
Морфологию вирусов изучают с помощью электронной микроскопии, так как их размеры малы (18-400 нм)
и сравнимы с толщиной оболочки бактерий.
Форма вирионов может быть различной:
а) палочковидной (вирус табачной мозаики),
б) пулевидной (вирус бешенства),
в) сферической (вирусы полиомиелита, ВИЧ),
г) нитевидной (филовирусы),
д) в виде сперматозоида (многие бактериофаги).
Различают просто устроенные и сложно устроенные вирусы.
Простые, или безоболочечные, вирусы состоят из нуклеиновой кислоты и белковой оболочки, называемой
капсидом. Капсид состоит из повторяющихся морфологических субъединиц — капсомеров. Нуклеиновая
кислота и капсид взаимодействуют друг с другом, образуя нуклеокапсид.
Сложные, или оболочечные, вирусы снаружи капсида окружены липопротеиновой оболочкой
(суперкапсидом, или пеплосом). Эта оболочка является производной структурой от мембран вирус-инфицированной клетки. На оболочке вируса расположены гликопротеиновые шипы, или шипики
(пепломеры). Под оболочкой некоторых вирусов находится матриксный М -белок.
Тип симметрии. Капсид или нуклеокапсид могут иметь спиральный, икосаэдрический (кубический) или
сложный тип симметрии. Икосаэдрический тип симметрии обусловлен образованием изометрически
полого тела из капсида, содержащего вирусную нуклеиновую кислоту (например, у вирусов гепатита А,
герпеса, полиомиелита). Спиральный тип симметрии обусловлен винтообразной структурой нуклеокапсида
(например, у вируса гриппа).
3. Методы культивирования вирусов.
Основные методы культивирования вирусов:
1) биологический – заражение лабораторных животных. При заражении вирусом животное заболевает.
Если болезнь не развивается, то патологические изменения можно обнаружить при вскрытии. У животных
наблюдаются иммунологические сдвиги. Однако далеко не все вирусы можно культивировать в организме
животных;
2) культивирование вирусов в развивающихся куриных эмбрионах. Куриные эмбрионы выращивают в
инкубаторе 7—10 дней, а затем используют для культивирования. В этой модели все типы зачатков тканей
подвержены заражению. Но не все вирусы могут размножаться и развиваться в куриных эмбрионах.
В результате заражения могут происходить и появляться:
1) гибель эмбриона;
2) дефекты развития: на поверхности оболочек появляются образования – бляшки, представляющие собой
скопления погибших клеток, содержащих вирионы;
3) накопление вирусов в аллантоисной жидкости (обнаруживают путем титрования);
4) размножение в культуре ткани (это основной метод культивирования вирусов).
Различают следующие типы культур тканей:
1) перевиваемые – культуры опухолевых клеток; обладают большой митотической активностью;
2) первично трипсинизированные – подвергшиеся первичной обработке трипсином; эта обработка
нарушает межклеточные связи, в результате чего выделяются отдельные клетки. Источником являются
любые органы и ткани, чаще всего – эмбриональные (обладают высокой митотической активностью).
Для поддержания клеток культуры ткани используют специальные среды. Это жидкие питательные среды
сложного состава, содержащие аминокислоты, углеводы, факторы роста, источники белка, антибиотики и
индикаторы для оценки развития клеток культуры ткани.
О репродукции вирусов в культуре ткани судят по их цитопатическому действию, которое носит разный
характер в зависимости от вида вируса.
Основные проявления цитопатического действия вирусов:
1) размножение вируса может сопровождаться гибелью клеток или морфологическими изменениями в них;
2) некоторые вирусы вызывают слияние клеток и образование многоядерного синцития;
3) клетки могут расти, но делиться, в результате чего образуются гигантские клетки;
4) в клетках появляются включения (ядерные, цитоплазматические, смешанные). Включения могут
окрашиваться в розовый цвет (эозинофильные включения) или в голубой (базофильные включения);
5) если в культуре ткани размножаются вирусы, имеющие гемагглютинины, то в процессе размножения
клетка приобретает способность адсорбировать эритроциты (гемадсорбция).
4. Вирусологический метод, основные этапы.
Этиологическая диагностика вирусных заболеваний проводится вирусологическим, вирусоскопическим,
серологическим и молекулярно-генетическим методами. Три последних метода могут быть использованы
как экспресс-диагностические.
Вирусологический метод диагностики.
Конечной целью метода является идентификация вирусов до вида или серологического варианта.
Вирусологический метод включает несколько этапов: 1) отбор материала для исследования; 2) обработку
вируссодержащего материала; 3) заражение материалом чувствительных живых систем; 4) индикацию
вирусов в живых системах; 5) титрование выделенных вирусов; 6) идентификацию вирусов в иммунных
реакциях.
1. Отбор материала для исследования. Проводится в ранние сроки заболевания при соблюдении правил,
предотвращающих контаминацию материала посторонней микрофлорой и инфицирование медицинского
персонала. Для предупреждения инактивации вирусов при транспортировке материала, он помещается в
вирусную транспортировочную среду (ВТС), состоящую из сбалансированного солевого раствора,
антибиотиков и сывороточного альбумина. Транспортируется материал в специальном контейнере с
термоизоляцией и закрытыми пластиковыми пакетами, содержащими лед. При необходимости материал
хранят при -20˚С. Каждый образец материала для исследования должен иметь маркировку и этикетку с
указанием фамилии больного, типа материала, даты его забора, развернутый клинический диагноз и другие
сведения.
В зависимости от характера заболевания, материалом для исследования могут быть: 1) смывы с носовой
части глотки и мазок из глотки; 2) спинномозговая жидкость; 3) кал и ректальные мазки; 4) кровь; 5) моча; 6)
жидкость из серозных полостей; 7) мазок с конъюнктивы; 8) содержимое везикул; 8) секционный материал.
Для получения смыва из ротоглотки используют 15-20 мл ВТС. Больной тщательно в течение 1 минуты
полощет горло ВТС и собирает смыв в стерильный флакон.
Мазок с задней стенки глотки берут стерильным ватным тампоном, надавливая на корень языка шпателем.
Тампон помещают в 2-3 мл ВТС, ополаскивают и отжимают.
Спинномозговую жидкость получают при спинномозговой пункции. 1-2 мл спинномозговой жидкости
помещают в стерильную посуду и доставляют в лабораторию.
Пробы кала отбирают в течение 2-3 дней в стерильные флаконы. Из полученного материала готовят 10 %
суспензию с использованием раствора Хенкса. Суспензию центрифугируют при 3000 об/мин, собирают
надосадочную жидкость, вносят в нее антибиотики и помещают в стерильную посуду.
Кровь, полученную при венепункции в объеме 5-10 мл, дефибринируют путем добавления гепарина.
Цельную кровь не замораживают, антибиотики не добавляют. Для получения сыворотки пробы крови
выдерживают в термостате при 37˚С в течение 60 минут.
Жидкость из серозных полостей получают при их пункции в количестве 1-2 мл. Жидкость используется сразу
или сохраняется в замороженном состоянии.
Мазок с конъюнктивы берут стерильным тампоном и помещают в ВТС, после чего проводят
центрифугирование взятого материала и его замораживание.
Содержимое везикул отсасывают шприцем с тонкой иглой и помещают в ВТС. Материал посылается в
лабораторию в виде высушенных мазков на предметных стеклах или в запаянных стерильных капиллярах
или ампулах.
Секционный материал отбирают в возможно ранние сроки, соблюдая правила асептики. Для отбора каждой
пробы используют отдельные наборы стерильных инструментов. Количество отбираемых тканей составляет
1-3 г, которые помещают в стерильные флаконы. Вначале берут пробы внеполостных органов (мозг,
лимфатические узлы и др.). Ткани грудной полости берут до вскрытия брюшной полости. Полученные
образцы тканей растирают в ступке с добавлением стерильного песка и стерильного раствора натрия
хлорид, после чего материал центрифугируют. Надосадочную жидкость собирают во флаконы, добавляют
антибиотики. Материал для вирусологического исследования используется сразу или хранится при -20˚С.
2. Обработка вируссодержащего материала. Проводится с целью освобождения материала от
сопутствующей бактериальной микрофлоры. Для этого используются физические и химические методы.
Физические методы: 1) фильтрование через различные бактериальные фильтры; 2) центрифугирование.
Химические методы: 1) обработка материала эфиром в случаях выделения вирусов, не имеющих
суперкапсида; 2) добавление к материалу смеси гептана и фреона; 3) внесение антибиотиков (пенициллин –
200-300 ЕД/мл; стрептомицин – 200-500 мкг/мл; нистатин – 100-1000 ЕД/мл).
3. Заражение материалом чувствительных живых систем. Поскольку вирусы являются облигатными
внутриклеточными паразитами, для их размножения используют следующие живые системы: 1)
лабораторные животные; 2) куриные эмбрионы; 3) культуры органов; 4) культуры тканей.
Лабораторные животные. Используются белые мыши, морские свинки, хомяки, кролики и др. Белые мыши
наиболее чувствительны к большому числу видов вирусов. Способ заражения животных определяется
тропизмом вируса к тканям. Заражение в мозг применяется при выделении нейротропных вирусов (вирусы
бешенства, полиовирусы и др.). Интраназальное заражение проводят при выделении возбудителей
респираторных инфекций. Широко используются внутримышечный, внутривенный, внутрибрюшинный,
подкожный и другие методы заражения. Заболевших животных усыпляют эфиром, вскрывают и производят
забор материала из органов и тканей.
Куриные эмбрионы. Широко доступны и просты в работе. Применяют куриные эмбрионы в возрасте от 5 до
14 дней. Перед заражением куриные эмбрионы овоскопируют: определяют их жизнеспособность, отмечают
на скорлупе границу воздушного мешка и месторасположение эмбриона («темный глаз» эмбриона). Работа
с куриными эмбрионами проводится в стерильном боксе стерильными инструментами (пинцеты, шприцы,
ножницы, копье и др.). После выполнения фрагмента работы инструменты погружают в 70 % этиловый
спирт и перед следующей манипуляцией прожигают. Перед заражением скорлупу куриного эмбриона
протирают горящим спиртовым тампоном и спиртовым раствором йода. Объем исследуемого материала,
вводимого в эмбрион, составляет 0,1-0,2 мл. Для выделения вирусов из одного материала используют не
менее 4 куриных эмбрионов.
5. Этапы взаимодействия вирусов с чувствительными клетками и факторы, способные их нарушать.
Взаимодействие вириона с живой клеткой осуществляется в несколько этапов. В начальный
(подготовительный) период вирион прикрепляется к клетке, проникает внутрь ее, после чего белковая
оболочка вириона разрушается, освобождая нуклеиновую к-ту (3). Наступает скрытый (латентный) период
вирусной инфекции, во время к-рого присутствие в зараженной клетке вирусных частиц нельзя обнаружить
никакими методами — родительский вирион как бы исчезает. В этот период проникшая в клетку вирусная
нуклеиновая к-та организует синтез вирусных компонентов потомства, используя для этой цели
ферментативную систему хозяина. Цикл размножения заканчивается формированием дочерних вирионов и
выходом их из клетки (конечный период).
Более просто устроенные бактерии не способны сами захватывать частицы из окружающей среды. Поэтому
у бактериофагов имеются спец. приспособления для преодоления плотной бактериальной стенки. В
концевой части хвоста содержится особый фермент, к-рый растворяет бактериальную оболочку. Затем
микроскопические «мышцы» хвоста сокращаются и нуклеиновая к-та фага «впрыскивается» внутрь клетки,
происходит как бы инъекция с помощью шприца. В результате белковый чехол фага остается на
поверхности клетки, а внутрь клетки попадает лишь нуклеиновая к-та.
Нуклеиновые к-ты В. осуществляют программу по созданию в клетке нового вирусного потомства. Это было
доказано оригинальными опытами. Удалось разделить В. на составляющие их компоненты — белки и
нуклеиновые к-ты. Оказалось, что заражение клеток и размножение В. происходило только после
добавления к клеткам вирусной нуклеиновой к-ты. Иными словами, нуклеиновые к-ты В. сами по себе могут
вызывать размножение В., т. е. обладают инфекционными свойствами. В другом опыте два В. были
разделены на составляющие компоненты, а затем «переодеты»: нуклеиновую к-ту одного В. «одели» в
оболочку другого. Полученными гибридами были заражены чувствительные клетки. Было обнаружено, что
оба «переодетых» В. способны размножаться, а образующееся потомство всегда подобно тому В.,
нуклеиновую к-ту к-рого содержал гибрид.
Проникшая в клетку вирусная нуклеиновая к-та управляет всеми процессами размножения В. Сначала она
заставляет клетку синтезировать так называемые ранние белки, подавляющие собственный обмен веществ
клетки и обеспечивающие синтез нуклеиновых к-т дочерних частиц. Образование их происходит в
результате самокопирования родительской нуклеиновой к-ты. Генетическая информация, заложенная в
нуклеиновой к-те В., определяет состав белков, из к-рых строятся дочерние частицы так наз. поздних
белков. В ДНК-со держащих В. реализация этой информации осуществляется обычным для клетки путем: на
ДНК синтезируется информационная РНК (транскрипция), управляющая последующим биосинтезом белков
(трансляция). В нуклеиновой к-те многих РНК-содержащих В. объединены и генетическая, и
информационная функции: РНК участвует и в репликации, и в трансляции (в воспроизводстве нуклеиновых
кислот и белка В.).
У многих В. построение белковых оболочек и внутреннего содержимого идет раздельно. Клетка
«нарабатывает» отдельные детали, к-рые потом соединяются, образуя вирусные частицы. Когда в
зараженной клетке накопится достаточное количество «заготовок > для будущих вирусных частиц, наступает
как бы сборка деталей (композиция). Процесс этот происходит обычно вблизи клеточной оболочки, к-рая
принимает в нем участие (4). В составе вирусной частицы часто обнаруживаются вещества,
характерные для клетки, в к-рой размножается В. Напр., у В. гриппа заключительный этап формирования
вирусной частицы — своеобразное обволакивание ее слоем клеточной мембраны. Т. о., клетка не только
«кормит» и «поит» В., но на прощание еще и «одевает» их.
Последний этап взаимодействия В. и клетки, как правило, непродолжителен. Образовавшиеся
полноценные вирусные частицы быстро выходят во внешнюю среду. Весьма своеобразно происходит выход
потомства у бактериофагов. Он сопровождается обычно растворением (лизисом) бактериальных клеток под
действием особого фермента, к-рый накапливается в клетке параллельно размножению фага и приводит ее
к разрушению и гибели. Под микроскопом хорошо видно, как это происходит. Иногда бактерии как бы
взрываются, в других случаях в бактерии (в середине или на одном из концов) образуется отверстие, через
к-рое вытекает ее содержимое. Из одной погибшей бактерии может освободиться до нескольких сотен
новых частиц фага. Процесс размножения фагов продолжается до тех пор, пока не будут уничтожены все
чувствительные к этому фагу бактерии. Для В. оспы, полиомиелита, энцефалитов также характерен быстрый
выход в окружающую среду сотен, а порой тысяч дочерних вирионов. Другие В. человека и животных (В.
герпеса, свинки, реовирусы) выходят из клеток по мере созревания. Эти В. до момента гибели клеток
успевают проделать несколько циклов размножения, постепенно истощая синтетические ресурсы клеток и
вызывая их разрушение. В отдельных случаях В. могут накапливаться внутри клеток, образуя кри-сталлоподобные скопления (В. бешенства, аденовирусы и др.), к-рые называют тельцами включений (5).
При гриппе, бешенстве, пситтакозе, оспе такие тельца обнаруживают в цитоплазме клеток, при весенне-летнем энцефалите, желтой лихорадке, герпесе и полиомиелите — в ядре; при нек-рых инфекциях тельца
включений находили как в ядре, так и в цитоплазме. Исследования последних лет показали, что в
подавляющем большинстве случаев эти включения представляют собой колонии В., причем их образование
закономерно на определенной стадии размножения возбудителей инфекции. Высокая специфичность
внутриклеточных включений при вирусных заболеваниях позволяет использовать этот признак для
диагностики. Напр., обнаруженные в нервных клетках головного мозга ци-топлазматические включения (так
наз. тельца Негри) являются основным доказательством заболевания бешенством, а специфич. образования
круглой или овальной формы (так наз. тельца Гвар-ниери), обнаруженные в эпителиальных клетках,
указывают на заболевание оспой. Включения описаны также при энцефалите, детском спинномозговом
параличе, ящуре и других заболеваниях. Очень своеобразные включения, имеющие кристаллическую
форму, образуют вирусы растений.
Т. о., размножение В. происходит особым, ни с чем не сравнимым способом. Сначала вирусные частицы
проникают внутрь клеток и освобождаются вирусные нуклеиновые к-ты. Затем заготавливаются детали
будущих вирусных частиц. Размножение заканчивается сборкой новых вирусных частиц и выходом их в
окружающую среду. Выпадение любого из указанных этапов приводит к нарушению нормального цикла и
влечет за собой либо полное подавление размножения В., либо появление неполноценного потомства.
Основные этапы взаимодействия вируса с клеткой хозяина.
1.Адсорбция- пусковой механизм, связанный со взаимодействием специфических рецепторов
вируса и хозяина (у вируса гриппа- гемагглютинин, у вируса иммунодефицита человека-гликопротеин gp 120).
2.Проникновение- путем слияния суперкапсида с мембраной клетки или путем эндоцитоза
(пиноцитоза).
3.Освобождение нуклеиновых кислот- ―раздевание‖ нуклеокапсида и активация нуклеиновой
кислоты.
4.Синтез нуклеиновых кислот и вирусных белков, т.е. подчинение систем клетки хозяина и их
работа на воспроизводство вируса.
5.Сборка вирионов- ассоциация реплицированных копий вирусной нуклеиновой кислоты с
капсидным белком.
6.Выход вирусных частиц из клетки, приобретения суперкапсида оболочечными вирусами.
6. Формы вирусной инфекции.
На уровне макроорганизма основные формы вирусных поражений принципиально не отличаются от
таковых, наблюдаемых при инфицировании вирусами отдельных клеток.
Продуктивная вирусная инфекция с образованием дочерних популяций и характерными клиническими
проявлениями возможна лишь при наличии в заражённом организме чувствительных клеток, в которых
осуществляется репродуктивный цикл возбудителя. Например, возбудитель полиомиелита может
реплицировать только в клетках ЖКТ и ЦНС приматов и человека.
Абортивная инфекция развивается при проникновении возбудителя в нечувствительные клетки (например,
при попадании вируса лейкоза коров в организм человека) либо в клетки, не способные обеспечить полный
репродуктивный цикл (например, находящиеся в стадии клеточного цикла G0). Способность клеток к
поддержанию вирусспецифических репродуктивных процессов также подавляет ИФН, противовирусный
эффект которого направлен против самых различных вирусов.
Персистирующая вирусная инфекция возникает при таком взаимодействии между вирусом и заражённой
клеткой, когда в последней продолжается выполнение собственных клеточных функций. Если заражённые
клетки делятся, образуется инфицированный клон. Таким образом, увеличение числа заражённых клеток
способствует увеличению общей популяции возбудителя в организме. Тем не менее персистирующие
вирусные инфекции обычно нарушают функции клеток, что в конце концов приводит к клиническим
проявлениям. У человека развитие персисти-рующих инфекций в определённой степени зависит от
возраста. Например, внутриутробное заражение вирусом коревой краснухи или цитомегаловирусом (ЦМВ)
приводит к ограниченному по времени персистированию возбудителя. Появление симптоматики связано с
возможностью плода развивать иммунные реакции на инфекционный агент.
Латентная (скрытая) вирусная инфекция. В то время как персистирующие инфекции сопровождаются
постоянным высвобождением дочерних вирусных популяций, при латентных поражениях они образуются
спорадически. Репродуктивный цикл подобных возбудителей резко замедляется на поздних стадиях и
активируется под влиянием различных факторов. Латентные инфекции характерны для большинства
герпесвирусов, вызывающих рецидивирующие и обычно не прогрессирующие заболевания.
Инаппарантные инфекции *от лат. in-, отрицание, + арраrео, являться+ сопровождаются бессимптомной
циркуляцией незначительных количеств возбудителя в отдельных органах. При этом выявить возбудителя
можно лишь специальными методами. От бессимптомного носительства подобные поражения отличает
большая вероятность возникновения клинических проявлений. Этот термин применяют при целом ряде
инфекций, при которых нет явных признаков заболевания. В практике вирусных инфекций у человека часто
применяют альтернативный термин «субклиническая инфекция». Собственно, и латентные инфекции
можно расценивать как хронически протекающие инаппаратные инфекции, при которых устанавливается
баланс между организмом и возбудителем.
Дремлющая (криптогенная) вирусная инфекция — форма проявления вирусной инфекции при которой
возбудитель в неактивном состоянии находится в отдельных очагах (например, в нервных ганглиях).
Клинически инфекция проявляется лишь при резком ослаблении защитных сил организма. Например, вирус
герпеса 3 типа, вызывающий при первичном заражении ветряную оспу, пожизненно сохраняется в
организме. Рецидив заболевания в форме опоясывающего лишая возможен лишь при нарушениях
иммунного статуса (наиболее часто в пожилом возрасте).
Медленные вирусная инфекции характеризуются длительным инкубационным периодом (месяцы и годы),
в течение которого возбудитель размножается, вызывая всё более явные повреждения тканей.
Первоначально возбудитель размножается в ограниченной группе клеток, но постепенно инфицирует всё
большее их число. Заболевания заканчиваются развитием тяжёлых поражений и смертью больного. К
медленным вирусным инфекциям относят подострый склерозирующий панэнцефалит, ВИЧ-инфекцию и др.
7. Особенности противовирусного иммунитета.
Противовирусный иммунитет начинается со стадии презентации вирусного антигена Т-хелперами.
Сильными антигенпрезентирующими свойствами при вирусных инфекциях обладают дендритные клетки, а
при простом герпесе и ретровирусных инфекциях – клетки Лангерганса.
Иммунитет направлен на нейтрализацию и удаление из организма вируса, его антигенов и зараженных
вирусом клеток. Антитела, образующиеся при вирусных инфекциях, действуют непосредственно на вирус
или на клетки, инфицированные им. В этой связи выделяют две основные формы участия антител в
развитии противовирусного иммунитета:
1) нейтрализацию вируса антителами; это препятствует рецепции вируса клеткой и проникновению его
внутрь. Опсонизация вируса с помощью антител способствует его фагоцитозу;
2) иммунный лизис инфицированных вирусом клеток с участием антител. При действии антител на
антигены, экспрессированные на поверхности инфицированной клетки, к этому комплексу присоединяется
комплемент с последующей его активацией, что и обуславливает индукцию комплементзависимой
цитотоксичности и гибель инфицированной вирусом клетки.
Недостаточная концентрация антител может усиливать репродукцию вируса. Иногда антитела могут
защищать вирус от действия протеолитических ферментов клетки, что при сохранении жизнеспособности
вируса приводит к усилению его репликации.
Вируснейтрализующие антитела действуют непосредственно на вирус лишь в том случае, когда он,
разрушив одну клетку, распространяется на другую.
Когда вирусы переходят из клетки в клетку по цитоплазматическим мостикам, не контактируя с
циркулирующими антителами, то основную роль в становлении иммунитета играют клеточные механизмы,
связанные прежде всего с действием специфических цитотоксических Т-лимфоцитов, Т-эффекторов и
макрофагов. Цитотоксические Т-лимфоциты непосредственно контактируют с клеткой-мишенью, повышая
ее проницаемость и вызывая осмотическое набухание, разрыв мембраны и выход содержимого в
окружающую среду.
Механизм цитотоксического эффекта связан с активацией мембранных ферментных систем в зоне
прилипания клеток, образованием цитоплазматических мостиков между клетками и действием
лимфотоксина. Специфические Т-киллеры появляются уже через 1–3 дня после заражения организма
вирусом, их активность достигает максимума через неделю, а затем медленно понижается.
Одним из факторов противовирусного иммунитета является интерферон. Он образуется в местах
размножения вируса и вызывает специфическое торможение транскрипции вирусного генома и подавление
трансляции вирусной мРНК, что препятствует накоплению вируса в клетке-мишени.
Стойкость противовирусного иммунитета вариабельна. При ряде инфекций (ветряной оспе, паротите, кори,
краснухе) иммунитет достаточно стойкий, а повторные заболевания встречаются крайне редко. Менее
стойкий иммунитет развивается при инфекциях дыхательных путей (гриппе) и кишечного тракта.
8. Интерфероны. Их роль в противовирусном иммунитете.
Интерферон (от лат. inter – взаимно и ferio – поражать) – фактор белковой природы, который обеспечивает
противовирусный иммунитет. Интерферон выделяется клетками позвоночных животных (лимфоцитами и
макрофагами) в ответ на действие индукторов (при их контакте с вирусами). Интерферон угнетает
репродукцию вирусов путем уменьшения количества чувствительных к ним клеток. Механизм
противовирусного действия интерферона связан, очевидно, с образованием некоторых метаболитов,
которые угнетают синтез видоспецифических вирусных белков.
Образование интерферона, кроме действия вирусов, может индуцироваться некоторыми
микроорганизмами и продуктами их жизнедеятельности, синтетическими полирибонуклеотидами и
другими соединениями.
Особенностью интерферона является то, что он проявляет активность лишь в организмах, из которых он был
выделен, т.е. является видовым фактором. Молекулярная масса интерферона зависит от вида животных,
который его продуцирует, и составляет 13–170 тыс. Известно несколько видов интерферонов, среди
которых наиболее важное значение имеют альфа-, бета- и гамма-интерфероны. В организме человека
образуются в основном альфа1-, альфа2- и альфа3-интерфероны. Молекулярная масса их составляет 18–25
тыс., реже от 5,5 до 7,5 тыс. На N-конце молекул интерферонов, как правило, содержится остаток цистеина,
который принимает участие в образовании дисульфидной связи, важной для их биологического действия.
В настоящее время интерфероны эффективно используются для лечения вирусных, респираторных и
инфекционных заболеваний. Внедрен микробиологический синтез интерферона с применением методов
генной инженерии. Ген интерферона внедряют в геном бактерии E.coli, которая и обеспечивает его синтез.
У рыб, птиц, рептилий, как и у млекопитающих, обнаружены противовирусные вещества широкого спектра
действия – интерфероны. Впервые они были обнаружены при изучении вирусной интерференции, когда
животное, зараженное одним вирусом, устойчиво к заражению другим неродственным вирусом.
Типы интерферонов
Идентифицированы различные типы интерферонов; гены каждого из них клонированы. Существуют по
меньшей мере 14 альфа-интерферонов, которые продуцируются лимфоцитами. Бета-интерфероны
продуцируются фибробластами. Образование гамма-интерферонов не индуцируется вирусами.
Механизм противовирусного действия интерферонов
При вирусной инфекции клетки синтезируют интерферон и секретируют его в межклеточное пространство,
где он связывается со специфическими рецепторами соседних незараженных клеток.
Связанный интерферон оказывает противовирусное действие следующим образом. В клетке, подвергшейся
воздействию интерферона, депрессируются по меньшей мере два гена и начинается синтез двух
ферментов.
Первый – протеинкиназа – фосфорилирует рибосомальный белок и фактор инициации, необходимый для
синтеза белка, тем самым значительно снижая трансляцию мРНК.
Второй фермент катализирует образование короткого полимера адениловой кислоты, активирующего
латентную эндонуклеазу, что приводит к деградации мРНК как вируса, так и хозяина.
9. Принципы профилактики вирусных инфекций. Группы применяемых препаратов при вирусных
инфекциях.
Для активной искусственной профилактики вирусных инфекций, в том числе и для плановой профилактики,
широко используются живые вирусные вакцины. Они стимулируют резистентность в месте входных ворот
инфекции, образование антител и клеток-эффекторов, а также синтез интерферона.
Основные живые вирусные вакцины:
гриппозная, коревая,
полиомиелитная (Сейбина-Смородинцева-Чумакова),
паротитная, против коревой краснухи,
антирабическая, против желтой лихорадки,
генно-инженерная вакцина против гепатита В - Энджерикс В.
Для профилактики вирусных инфекций используются и убитые вакцины:
против клещевого энцефалита,
омской геморрагической лихорадки,
полиомиелита (Солка),
гепатита А (Харвикс 1440),
антирабическая (ХДСВ, Пастер Мерье),
а также и химические - гриппозные.
Для пассивной профилактики и иммунотерапии предложены следующие антительные препараты:
противогриппозный гамма-глобулин,
антирабический гамма-глобулин,
противокоревой гамма-глобулин для детей до 2 лет (в очагах) и для ослабленных детей старшего возраста,
противогриппозная сыворотка с сульфаниламидами.
Универсальным средством пассивной профилактики вирусных инфекций являются интерферон и индукторы
эндогенного интерферона.
Большинство известных химиотерапе<