Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение
Высшего образования
«Казанский (Приволжский) федеральный университет»
ИНСТИТУТ ФУНДАМЕНТАЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫИ БИОЛОГИИ
КАФЕДРА БИОХИМИИ, БИОТЕХНОЛОГИИ И ФАРМАКОЛОГИИ
Направление подготовки: 06.03.01 – биология
ДНЕВНИК
ПО ПРОИЗВОДСТВЕННОЙ (ПРЕДДИПЛОМНОЙ) ПРАКТИКЕ
Студента 4 курса, гр. 01-701
Мухаметшиной Регины
(ФИО) (подпись)
Дата начала практики «18» мая 2021 г.
Дата окончания практики «15» июня2021 г.
Руководитель практики от КФУ:
к.б.н., доцент Кравцова О. А.________________
(должность, звание, ФИО) (подпись)
Казань – 2021
Дневник прохождения производственной практики
ФИО обучающегося, группа: Мухаметшина Регина, гр. 01-701
Место прохождения практики: кафедра биохимии, биотехнологии и фармакологии
Основные этапы выполнения практики:
| Дата | Содержание выполненной работы | Примечания, подпись руководителя практики |
| 18.05.2021г. - 25.05.2021г | Забор крови, для определения уровня гормона – кортизола и уровня экспрессии генов. Выделение РНК, с помощью реагента ExtractRNA, синтез кДНК. Определение уровня экспрессии генов рецептора и переносчика серотонина и дофаминовой системы в образцах кДНК с помощью количественной ОТ-ПЦР в реальном времени | |
| 26.05.2021г. - 01.06.2021г. | Статистическая обработка полученных результатов. | |
| 02.06.2021г. - 07.06.2021 г. | Построение графиков и описание результатов оценки относительного уровня экспрессии генов серотониновой системы в зависимости от типа полученного стресса и корреляции с кортизолом. | |
| 08.06.2021г. - 15.06.2021г. | Работа с источниками литературы. Оформление полученных результатов |
Министерство науки и высшего образования Российской Федерации
Федеральное государственное автономное образовательное учреждение
Высшего образования
«Казанский (Приволжский) федеральный университет»
ИНСТИТУТ ФУНДАМЕНТАЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫИ БИОЛОГИИ
КАФЕДРА БИОХИМИИ, БИОТЕХНОЛОГИИ И ФАРМАКОЛОГИИ
Направление подготовки: 06.03.01 – биология
ОТЧЕТ
ПО ПРОИЗВОДСТВЕННОЙ (ПРЕДДИПЛОМНОЙ) ПРАКТИКЕ
Обучающийся Мухаметшина Регина, гр.01-701
(ФИО) (группа) (подпись)
Руководитель практики от КФУ Кравцова О. А.
к.б.н., ассистент
Оценка за практику зачтено __________________________
(подпись руководителя практики)
Дата сдачи отчета 15.06.2021
Казань – 2021
Место проведения практики: кафедра биохимии, биотехнологии и фармакологии (лаборатория молекулярно- генетического анализа); ЦНИЛ КГМУ.
Сроки практики: с 18.05.2021 по 15.06.2021
Цель практики:
Закрепить и углубить знания, полученные в процессе обучения, привить необходимые умения и навыки практической деятельности по изучаемой специальности; оценить изменения относительного уровня экспрессии генов серотониновой системы в зависимости от типа воздействия хронического стресса отдельно и в корреляции с кортизолом.
Уметь правильно использовать современные методы для достижения поставленных целей
Содержание:
Определить относительный уровень экспрессии генов серотонинэргической ситемы, определить концентрацию кортизола в крови испытуемых крыс. Далее на вивальной модели крыс линии Wistar установить зависимость изменения активности экспрессии генов СТС, как в динамике (после 3, 6 и 9 месяцев эксперимента), так и между различными группами крыс а процессе проведения эксперимента.
Описание выполненной работы (кратко):
Эксперимент проводился в несколько этапов. В начале эксперимента крысы
были поделены на несколько групп. Далее было осуществлена замерка показателей крыс- их вес, а также помечение их водоустойчивой краской. После чего было осуществлена основная работа- крысы подвергались различным типам стрессоров - физической нагрузке и выполнение стресс теста в виде гиподинамии. В конце эксперимента был произведен забор крови для измерения изменения экспрессии генов серотонинэргической системы с помощью ПЦР в реальном времени (Real-Time PCR) на 3-й, 6-й и 9-й месяц эксперимента в образцах РНК, выделенных из венозной крови из хвостовой вены, а также определения уровня кортизола в крови с дальнейшей обработкой результатов. Для выявления продуктов амплификации в режиме реального времени использовали интеркалирующий агент SYBR Green. Этот способ детекции основан на том факте, что флуоресценция данного вещества значительно возрастает при внедрении в двухцепочечные молекулы ДНК. Таким образом, можно наблюдать за накоплением продуктов амплификации.
Заключение:
При воздействии на организм стрессоров происходит как непосредственное изменение концентрации серотонина в головном мозге, так изменение активности экспрессии других компонентов серотониновой системы (рецепторов к серотонину, серотонинового транспортера и др.). Поэтому изучение экспрессия генов серотониновой системы является одним из новых биомаркеров, позволяющих оценивать общее состояние организма, прогнозировать возникновение некоторых заболеваний и их исходов. Возможность детекции накопления продуктов амплификации непосредственно во время проведения амплификации является принципиальной особенностью ПЦР в реальном времени. Так как кинетика накопления ампликонов напрямую зависит от числа копий исследуемой матрицы, это позволяет проводить количественные измерения кДНК.
Использованная литература:
1. Valeeva E. Association of SLC6A4, HTR2A and DRD2/ANKK1 genes polymorphism with stress resistance and work capacity of athletes [Тext] / Valeeva E., Kashevarov G., Kasimova R., Kravtsova O. //VIRCHOWS ARCHIV. - 2018. - Vol.473, Is.. - P.S111-S111.
2. Валеева Е. В. Влияние хронического стресса на биохимические показатели у крыс разного возраста [Текст] / Е. В. Валеева, И. Х. Валеева, И. И. Семина, Д. О. Никитин, А. Г. Мухамеджанова, Р. Д. Мухаметшина, А. Д. Мухаметшина, О. А. Кравцова // Журнал Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю. A. Овчинникова. - 2020. - T. 16. - № 3. - С. 18-24.
3. Валеева Е. В. Динамика изменения биохимических показателей под действием различных типов хронического стресса у крыс [Текст] / Е. В. Валеева, И. И. Семина, А. Г. Мухамеджанова, О. А. Кравцова // Сборник тезисов Самойловские чтения. Современные проблемы нейрофизиологии. - 2021. Казань. - С. 109.