Для ориентировочного определения гемоглобина крови иногда используют гемометр Сали (рис. 1)*. Метод основан на сравнении интенсивности окраски исследуемого раствора с интенсивностью окраски стандартного раствора. Гемоглобин крови под действием соляной кислоты превращается в солянокислый гематин, окрашивающий раствор в коричневый цвет.
Полученный раствор колориметрируют:
· в градуированную пипетку наливают децинормальный раствор соляной кислоты до нижней круговой метки;
· затем в пробирку с помощью капиллярной пипетки вносят 20 мкл исследуемой крови, полученной из пальца;
· смесь крови с соляной кислотой тщательно перемешивают посредством легких ударов по нижнему концу пробирки. Наблюдают за изменением цвета крови в течение 5 минут;
· по истечении этого времени жидкость осторожно разбавляют дистиллированной водой до тех пор, пока интенсивность ее окраски не совпадет с интенсивностью окраски стандартного раствора;
· цифра шкалы на уровне нижнего мениска раствора показывает концентрацию гемоглобина в грамм-процентах (г%), грамм в литре (г/л) или в единицах Сали.
Данный метод является устаревшим, субъективным, требует регулярной проверки окраски стандартной шкалы и в настоящее время применяется редко.
Цветовой показатель крови является рассчетной величиной. Он показывает достаточно ли гемоглобина находится в одном эритроците.
Содержание гемоглобина в норме в одном эритроците колеблется от 27 до 33,3 пикограмм (пг), при этом величина 33,0 пг условно принята за единицу и названа цветовым показателем, значения которого в норме составляют соответственно 0,85 – 1,05.
Широкое использование цветового показателя в клинической лабораторной диагностике обусловлено простотой рассчета. Для определения его не нужны современное оборудование и материалы.
Для определения цветового показателя используют только два показателя — количество эритроцитов крови и уровень гемоглобина.
Формула рассчета цветового показателя (ЦП):
ЦП = (гемоглобин (г/л) * 3) / первые 3 цифры количества эритроцитов в крови
Например, гемоглобин 134 г/л, эритроциты 4,26 млн/мкл, тогда цветовой показатель равен (134 * 3) / 426 = 0,94.
Цветовой показатель в норме 0,85-1,05. При повышении цветового показателя говорят о гиперхромии эритроцитов, и при снижении — о гипохромии. Именно на основании этих данных можно определить вид анемии. Читайте о диагностике анемии в статье «Диагностика анемии. Какие анализы стоит сдавать?». В12-дефицитная анемия, фолиеводефицитная анемия принадлежит к гиперхромным, а железодефицитная и хроническая потгеморрагическая (со сниженным уровнем железа в крови) — к гипохромным.
У автоматических анализаторов нет функции рассчета цветового показателя крови, но они определяют среднее содержание гемоглобина в одном эритроците (МСН), одного из эритроцитарных индексов. Определение МСН производят делением концентрации гемоглобина на число эритроцитов в одинаковом объеме крови (1 мкл). Практически среднее содержание гемоглобина в одном эритроците представляет частное отделения гемоглобина (Нb) (г/л) на число эритроцитов в миллионах.
Величину 33 пиктограмм (пиктограмм — 1х10—12), составляющую норму содержания гемоглобина в одном эритроците, условно принимают за 1 и обозначают как цветовой показатель.
Клиническое значение. Гипохромные анемии — это чаще железодефицитные анемии, обусловленные длительными хроническими кровопотерями. В данном случае гипохромия эритроцитов обусловлена дефицитом железа. Гипохромия эритроцитов имеет место при анемии беременных, инфекциях, опухолях. При талассемии и отравлениях свинцом гипохромные анемии обусловлены не дефицитом железа, а нарушением синтеза гемоглобина.
Наиболее частая причина гиперхромной анемии — дефицит витамина В12, фолиевой кислоты.
Нормохромные анемии наблюдаются чаще при гемолитических анемиях, острой кровопотере, апластической анемии.
Однако цветовой показатель зависит не только от насыщения эритроцитов гемоглобином, но и от величины эритроцитов. Поэтому морфологические понятия о гипо-, нормо- и гиперхромной окраске эритроцитов не всегда совпадают с данными цветового показателя. Макроцитарная анемия с нормо- и гипохромными эритроцитами может иметь цветовой показатель выше единицы, и наоборот, нормохромная микроцитарная анемия всегда дает ЦП ниже 1,0. Поэтому при различных анемиях важно знать, с одной стороны, как изменилось общее содержание гемоглобина в эритроцитах, а с другой — их объем и насыщенность гемоглобином.