(практические, семинарские, лабораторные)
Тема 26. Составление экспертного заключения (заключение химико-токсикологической экспертизы) Контроль исходных данных по теме «Общие и частные методы изолирования» «металлических ядов» из биологических объектов биологического происхождения».
Цель: освоение студентами методики ненаправленного химико-токсикологического анализа на «металлические яды».
Задачи обучения: научиться методу ненаправленного химико-токсикологического анализа на «металлические яды» и написанию экспертного заключения.
Форма проведения: групповое обсуждение теоретического материала и выполнение заданий парами студентов.
Задания по теме:
Задание 1 групповое обсуждение теоретических вопросов по теме занятия.
1. Основные направления химико-токсикологического анализа.
2. Стратегия проведения анализа в зависимости от особенностей направленного или ненаправленного исследования.
3. В чем заключается общий скрининговый подход к изолированию веществ органической природы?
4. Схема проведения ненаправленного химико-токсикологического анализа на «металлические яды».
5. Документация. Составление заключения.
Задание 2. Написание экспертного заключения (заключение химико-токсикологической экспертизы), при написании заключения использовать задачу темы № 2 (Токсикологическая химия. Ситуационные задачи и упражнения. Под ред.Н.И. Калетиной.-М.-2007.-С.283. Задача № 1).
Литература
1. Токсикологическая химия: метаболизм и анализ токсикантов: учебное пособие + СD/ под ред. Н.И. Калетиной. – М., 2008. – 1016 с. Переплет.
2. Токсикологическая химия: учебник / под ред. Т.В. Плетеневой. – 2-ое изд. – М., 2008. – 512 с. Переплет.
3. Крамаренко В. Ф. Токсикологическая химия / В. Ф. Крамаренко. - Киев, «Высшая школа», 1989.- 272с.
4. Швайкова М.Д. Токсикологическая химия/ М.Д. Швайкова. - М., «Медицина», 1975.-376 с.
Контрольные вопросы:
1. Основные направления химико-токсикологического анализа.
2. Стратегия проведения анализа в зависимости от особенностей направленного или ненаправленного исследования.
3. В чем заключается общий скрининговый подход к изолированию веществ органической природы?
4. Схема проведения ненаправленного химико-токсикологического анализа на «металлические яды».
5. Документация. Составление заключения.
ПРИЛОЖЕНИЕ
ХТА имеет судебно-правовую направленность, которая заключается в том, что юридические вопросы решаются биоаналитическими методами, а полученный результат на конечной стадии преобразуется в юридический ответ. Существуют три варианта проведения ХТА в зависимости от конкретных обстоятельств дела, клинических, криминалистических и других ситуаций.
1. Анализ объектов, содержащих известные токсичные вещества (в некоторых случаях даже известна доза попавшего в организм токсиканта), называют «направленным», например проведение ХТА в клинических лабораториях для контроля за выведением ксенобиотика, ходом лечения и т.д., т.е. случай, когда известны обстоятельства дела.
2. Наличие косвенных сведений, указывающих на возможную причину отравления, гипотезы о химической природе токсичного вещества, построенная на основе клинической картины отравления пострадавшего и/или результатов патологоанатомического вскрытия трупа, обусловливают некоторые изменения в методических подходах, применяемых в «направленном» ХТА.
3. Отсутствие каких-либо сведений о природе токсичного вещества требует принципиально другой стратегии проведения ХТА. В этом случае используемые аналитические приемы объединяют под названием «ненаправленный» ХТА. Это наиболее сложный случай исследования, в котором всегда применяют группы методов анализа, а полученные результаты взаимно дополняют и уточняют друг друга.
Общим скрининговым подходом к изолированию веществ органической природы в случае ненаправленного анализа является групповое выделение токсикантов, основанное на каких-либо общих свойствах. Методический прием, называемый скринингом, — это поэтапное обнаружение групповой принадлежности токсиканта, а затем идентификация и количественное определение индивидуального токсичного вещества. В ХТА принято делить большинство изолируемых агентов на вещества кислого, нейтрального, слабоосновного и основного характера. Многоступенчатая схема изолирования требует большого (по массе) количества биообъекта, вспомогательных химических веществ (растворители, реагенты) и разнообразной техники.
Для определения металлических элементов в биологических образцах все большее распространение получают методы ИСП-АЭС и ИСП-МС, которые позволяют одновременно определить в одной пробе 60 и более макро-, микро- и ультрамикроэлементов. Высокая стоимость приборов пока тормозит широкое внедрение ИСП-АЭС и ИСП-МС в практическую деятельность лабораторий в нашей стране. Однако во всем мире методы ИСП-АЭС и ИСП-МС используются для высокопроизводительного многоэлементного анализа различных образцов. Надежность современного оборудования, простота и точность калибровки по общедоступным стандартным образцам, относительная свобода от взаимных физических и химических влияний при анализе — несомненные достоинства метода ИСП-МС. Для оценки элементного статуса человека используют определение элементного состава биосубстратов, а также активность ферментов или содержание метаболитов, косвенно отражающих уровень химических элементов в органах и тканях.
Основные методы определения элементов в биологических объектах:
Атомно-адсорбционная спектрофотометрия;
Атомно-адсорбционная спектрофотометрия с электротермической атомизацией;
Оптическая эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой;
Масс спектрометрия индуктивно связанной плазмой;
Пламенная фотометрия;
Рентгенофлюресцентная спектрометрия;
Нейроактивационный анализ;
Гамма-резонансная спектрометрия;
Спектрофотометрический метод;
Электрохимические методы (ионометрия, полярография и др.);
Хроматографические методы (ВЭЖХ, система ВЭЖХ-МС и др.)
Иммунохимические и другие методы.