Молекулярно-биологические методы диагностики




Уреаплазмозмоз свиней

Заболевание невыясненной этиологии, сопровождающееся неоплодотворяемостью свиноматок в крупных свиноводческих комплексах, было зарегистрировано более 20 лет тому назад. При изучении этиологии данной патологии голландские ученые выделяли уреаплазмоподобные микроорганизмы. Но вопрос их идентификации оставался окончательно нерешенным. Впервые уреаплазменная инфекция свиней при бесплодии была подтверждена в 1978 г., а при абортах у свиноматок - в 1982.

Уреаплазмозы – комплексные болезни домашних и диких животных, птиц и человека, вызываемые различными видами уреаплазм, сопровождающиеся патологией половой, мочевыделительной, респираторной, иммунокомпетентной систем, поражением глаз, воспалением желудочно-кишечного тракта, анемией и желтухой, а также артритами и артрозами.

Уреаплазмоз свиней - заболевание, характеризующееся неоплодотворяемостью свиноматок, прохолостами, абортами и увеличением количества мертво­рожденных поросят.

Уреаплазмы – внутриклеточные паразиты, относящийся к семейству микоплазм, роду уреаплазма. Это самые мелкие из свободно живущих микроорганизмов, лишенные клеточной стенки. С бактериями микроб схож некоторыми особенностями обмена веществ, а с вирусами – генетическим аппаратом и размером.

Особенности уреаплазм:

· внутриклеточный тип паразитирования;

· тропность к эпителию мочевых путей;

· способность разлагать мочевину;

· небольшие размеры;

· очень маленький объем генетической информации;

· отсутствие клеточной стенки;

· устойчивость ко многим антибиотикам широкого спектра действия;

· способность расти на бесклеточной среде;

· способность проникать в организм животных и человека разными путями.

У свиней возбудителем болезни является Ureaplasma species - грамотрицательная специфическая коккобацилла, представляющая собой переходную субстанцию от вируса к бактерии и не имеющая клеточной оболочки. Это одноклеточный полиморфный микроорганизм (прокариот) с трехслойной цитоплазматической мембраной вместо клеточной стенки, имеющий нетипичную ДНК. Уреаплазма специес – общее название условно-патогенных микробов, имеющих сходные морфологические и биохимические свойства: ureaplasma urealiticum и ureaplasma parvum.

По культуральным, морфологическим, биохимическим и антигенным свойствам уреаплазмы свиней не отличаются от уреаплазм других видов животных, но серологически различны.

Уреаплазма наделена повышенной тропностью и л юбимым местом обитания уреаплазм является мочеполовая сфера.

Ureaplasma species может довольно долго персистировать на слизистой оболочке половых органов и никак не проявляться, таким образом, микроорганизм считается условно-патогенным, так как часто обнаруживается у совершенно здоровых животных и людей. Заболевание развивается, если на организм начинают воздействовать определенные провоцирующие факторы.

Один из главных факторов защиты организма – нормальная микрофлора, являющаяся физиологическим барьером. В неблагоприятных условиях нарушается баланс микроорганизмов (дисбактериоз), что способствует развитию уреаплазменной патологии. У млекопитающих животных уретра (мочевыводящий канал) имеет наиболее благоприятные условия для развития этой инфекции. Уреаплазмы, обладающие ярко выраженными адгезивными способностями, не смываются током мочи и затем проникают в толщу ткани. Клетки тканей разрушаются как под действием непосредственно уреаплазмы, так и из-за «неадекватного» поведения иммунной системы, которая начинает уничтожать собственные ткани. При этом уреаплазмы начинают интенсивно размножаться и проявлять свои патогенные свойства, вызывая различную патологию.

Факторы, предрасполагающие к возникновению уреаплазмоза:

· Изменение микрофлоры кишечника,

· Снижение лейкоцитов в крови,

· Иммунодефициты,

· Хронические заболевания мочеполовых органов,

· Чрезмерный прием антибиотиков и гормонов,

· Травмы мочеполовых органов,

· Частые стрессы,

· Переохлаждения,

· Беременность, роды.

Уреаплазма спп опасна тем, что она проходит через микропоры и является резистентной к ряду противомикробных препаратов. Бактерия внедряется в геном половых клеток и нарушает их функции.

Спектр восприимчивых биологических объектов: коровы, козы, овцы, свиньи, кошки, собаки, крысы, хомяки, птицы (куры, индейки и др.), человек.

У свиней уреаплазмы выделяют из спермы, абортиро­ванных плодов, плодных оболочек и матки. В целом, по культуральным, биологическим, химическим и антигенным свойствам, они не отличаются от уреаплазм других видов животных и человека, однако отличаются от них серологически.

Эпизоотология.

Источником возбудителя инфекции являются больные, переболевшие животные или скрытые носители уреаплазм. Возбудитель распространяется контактным - половым путем, хотя возможен и вертикальный путь передачи (во время беременности и в период родов).

Инфекция в большинстве случаев протекает энзоотически. Взрослые животные чаще заражаются через мочеполовые органы. Возбудитель может быть занесен в стадо с контаминированной спермой. Уреаплазмы передаются через контаминированную сперму, подстилку и при гинекологическом исследовании животных.

Уреаплазменная инфекция проявляется внезапно, независимо от времени года, искусственного или естественного осеменения. Прохолосты у свиноматок отмечаются у 60 – 70% осемененных животных.

Вначале инфекции неоплодотворенными остаются только несколько свиноматок, затем в течение 1 – 2 недель их число резко увеличивается и продолжает сохраняться 1 – 2 месяца.

Выделение уреаплазм от этих животных обычно продолжается более шести месяцев.

Клиника.

Инкубационный период уреаплазмоза длится около одного месяца, зависит от исходного состояния здоровья животного или человека.

Основными признаками болезни являются массовая неоплодотворяемость свиноматок и аборты, которые регистрируются в первые 1,5 месяца супоросности.

При искусственном осеменении свиноматок спермой, инфицированной уреаплазмами, бесплодие достигает до 100%.

Число мертворожденных поросят в помете составляет 1-2%, а гибель их до отъема – 10-11%. У инфицированных свиноматок, осемененных спермой здоровых хряков, неоплодотворяемость колеблется от 20 до 25%, число мертворожденных поросят достигает до 0,4%, а гибель с момента рождения до отъема – 5%. Часто половой цикл увеличивается от 30 до 120 дней.

При экспериментальном инфицировании хряков в семенных пузырьках снижается общее количество спермиев, увеличивается число морфологически измененных клеток, резко снижается их подвижность и возрастает тенденция к их агглютинации.

Патологоанатомические изменения. При вскрытии вынужденно убитых неоплодотворенных или абортировавших свиноматок наблю­дается гипертрофия яйцеводов, сопровождаемая гиперемией слизистой оболочки и скоплением мутного серовато-желтого экссудата (25).

Диагностика. Диагноз на уреаплазмоз свиней ставят на основании эпизоотологических данных, клинической картины, патологоанатомических изменений и лабораторных исследований.

Массовая неоплодотворяемость свиноматок и аборты в раннем пе­риоде супоросости, а также удлиненные половые циклы дают основание предполагать о наличии уреаплазм в хозяйстве. Лабораторная диагнос­тика основана на выделении возбудителя инфекции из патологического материала, а также исключении вирусов, лептоспир, хламидий и других патогенных агентов. Для выявления специфических антител в сыворот­ке крови используют реакцию задержки метаболизма.

Материал для исследования выделения из уретры, секрет простаты, сперма; у свиноматок — материал из уретры, цервикального канала. Мазки из влагалища (при наличии абортов) берут стерильным зондом с использованием стерильных гинекологических инструментов. Собранный материал помещают в пробирку, содержащую не более 500 мкл стерильного физиологического раствора. Сперма – в замороженном виде, (около 1,0-2,0 мл.). Материал доставляют в лабораторию в день взятия или на следующий день, сохраняя при температуре от 2°С до 8°С. Допускается хранение материала при температуре не выше минус 16°С в течение 7 дней. Возможно лишь однократное замораживание-оттаивание материала.

Основным лабораторным методом исследования для выявления возбудителя уреаплазменной инфекции является культивирование микроорганизмов на жидких и твердых питательных средах из
отде­ляемого слизистых оболочек мочеполовых органов. И определение антибиотикочувствительности.

1. Микроскопический метод (люминесцентная микроскопия) заключается в исследовании мазков из исследуемого материала, окрашенных люминесцирующими сыворотками против микоплазм. При люминесцентной микроскопии возбудитель инфекции выявляется в виде зеленого гранулярного свечения на мембранах эпителиальных клеток и во внеклеточном пространстве.

2. Метод исследования — бактериологический.

Возбудитель болезни относится к прихотливым микроорганизмам и для их культивирования применяются специальные жидкие, полужидкие и плотные питательные среды. Для определения уреаплазм используется ее способность разлагать мочевину, находящуюся в составе специальной питательной среды. При наличии в материале уреаплазм цвет среды меняется с лимонно-желтого на изумрудный, а при наличии высоких концентраций уреаплазм на синий.

3. Метод исследования – серологический. Разработана реакция прямой иммунофлюоресценции, РПИФ, которая основанная на моноклональных антителах.

Имеются тест-системы для ИФА, применяющиеся с целью определения антител в сыворотке крови больных микоплазмозом.

Молекулярно-биологические методы диагностики

К данной группе относят полимеразную цепную реакцию (ПЦР ПЦР в реальном времени). Продолжительность составляет несколько часов с возможностью автоматизации процесса. К недостаткам относят высокую стоимость реагентов, необходимость приобретать специальное оборудование. Кроме того, данные методы диагностики не позволяют определять чувствительность патогенов к антибиотикам.

Дифференцируют уреаплазмоз от лептоспироза, парвовирусной инфекции, репродуктивно-респираторного синдрома, болезни Ауески и других болезней, проявляющихся сходными клиническими и патологоанатомическими изменениями.

 

ПРОФИЛАКТИКА В благополучных хозяйствах для животных необходимо создавать оптимальные условия содержания и кормления.

Помещения для содержания животных должны быть сухими, теплыми, светлыми и хорошо вентилируемыми. Взрослых животных и особенно поросят надо обеспечивать сухой и теплой подстилкой, давать белковую, витаминную подкормку; регулярно, начиная с первых дней жизни, назначать молодняку препараты, содержащие железо. Рекомендуются лагерное содержание, регулярные прогулки и моционы животных на свежем воздухе независимо от времени года.

Необходимо также соблюдать, нормы плотности посадки, обеспечивать функционирование каждой секции по принципу «все свободно — все занято», разведение свиней производить по циклам, проводить технологические санитарные разрывы при размещении животных. Важной мерой является борьба с паразитарными инвазиями, поражающими легкие животных.

В промышленном свиноводстве рекомендуется проводить профилактику технологических стрессов.

Главное в профилактике болезни — улучшение санитарных условий, соблюдение строгого распорядка и технологии производства. Перед приемом новой партии помещения необходимо полностью освобождать от свиней, после чего тщательно их очищать и дезинфицировать. Уреаплазмы весьма чувствительны к действию дезинфицирующих веществ, применяющихся обычно в ветеринарной практике: хлорной извести, раствору гидроксида натрия, формалину.

ЛЕЧЕНИЕ

Основным мероприя­тием по профилактике уреаплазмоза свиней является своевременное вы­явление хряков с низкими показателями при оценке спермы. Сперму, по­лученную от таких животных нельзя использовать для осеменения. Име­ются сообщения об обнадеживающих результатах полученных при об­работке спермы перед осеменением антибиотиками, предварительно про­тестированными на эффективность действия против возбудителей и без­вредность для спермиев (25). Для санации инфицированной уреаплазмами спермы применяют комплексный препарат антибакс.

В свиноводстве следует учитывать, что, несмотря на высокую чувствительность возбудителей микоплазмозов к антибиотикам широкого спектра действия окситетрациклин, тилан тартат и фосфат тилозина, тиамутин, линкомицин, спирамицин, хлорамфеникол, тетрациклин, препаратам фторхинолонового ряда (ципрофлоксацин, норфлоксацин, энрофлоксацин), сульфаниламидным препаратам (этазол, норсульфазол, сульфаметазин и др.), а также к дезинфектантам йодиду алюминия и хлорамину Б, в практических условиях они предупреждают лишь развитие клинических признаков болезни, но не предотвращают инфекцию и не освобождают организм животного от возбудителя.

Для повышения эффективности лечения проводят симптоматическую терапию, а также используют средства против бактериальных, вирусных и грибковых секундарных инфекций.

Следует помнить, что широкое применение антибиотиков часто вызывает гибель не только патогенной микрофлоры, но и нарушения роста и развития симбионтной физиологической микрофлоры, что приводит к нарушению микробиоценоза и развитию дисбактериоза, на фоне которого происходит активное заселение респираторного, урогенитального и кишечного тракта гнилостной и грибковой флорой и усугубление инфекционного процесса.

Также в лечении можно назначать пробиотики, содержащие культуры бифидо- и лактобактерий в целях подавления посторонней микрофлоры и единовременной коррекцией естественного микробиоценоза.

Входят в схему лечения и меры по повышению иммунитета животных витамины, иммуностимуляторы.

Рекомендуется для лечения животных совместно с антибиотикотерапией (препараты фторхинолонового и тетрациклинового ряда) применять имуномодуляторы (гамавит, иммунофан), глобфел и др.). При назначении данной схемы срок выздоровления животных сокращался в 1,5...2 раза и при этом было отмечено положительное влияние на гемопоэтическую реакцию кроветворных органов.

МЕРЫБОРЬБЫ

При появлении подозрения на заболевание свиней, проводят клинический осмотр всех животных хозяйства, отбирают материал для лабораторного исследования.

Характер мероприятий определяют с учетом степени пораженности поголовья и специфики хозяйства. Клинически здоровых свиноматок старше 2 лет, наиболее ценных в племенном отношении, не имеющих признаков и не дающих положительных реакций при серологическом исследовании (РА, РСК), оставляют для воспроизводства здорового племенного ядра. Отобранных ценных животных покрывают клинически здоровыми хряками и переводят в отдельные изолированные боксы, обеспечивают им хорошие ветеринарно-санитарные условия кормления и содержания. С профилактической целью проводят лечебно-профилактические обработки (назначая премиксы). За животными и их потомством ведут тщательное клиническое наблюдение. Ввозить здоровых животных допускается только после ликвидации неблагополучного стада и тщательной санации помещений и территории каждой фермы. Для дезинфекции используют растворы гидроксида натрия, формальдегида и хлорной извести. Хозяйство объявляют оздоровленным через 2 мес. после завоза здоровых свиней при отсутствии у них признаков заболевания.

К числу других мероприятий в промышленном свиноводстве относятся изолированное выращивание поросят от здоровых свиноматок, ранний отъем и изолированное выращивание поросят-сосунов, обработанных антибиотиками одновременно с матерью.



Поделиться:




Поиск по сайту

©2015-2024 poisk-ru.ru
Все права принадлежать их авторам. Данный сайт не претендует на авторства, а предоставляет бесплатное использование.
Дата создания страницы: 2022-12-31 Нарушение авторских прав и Нарушение персональных данных


Поиск по сайту: