ЦЕЛЬ: Подсчитать количество лейкоцитов пробирочным методом. ХОД РАБОТЫ:
В центрифужную пробирку отмеривают пипеткой 0,4 мл 3% раствора уксусной кислоты. Затем капиллярной пипеткой Сали набирают 0,02 мл крови из пальца удаляя излишек крови касанием кончика пипетки о тугой ватный тампон. Кровь осторожно выдувают в приготовленный раствор и тщательно перемешивают. В этом случае кровь будет разведена в 20 раз. Лейкоциты считают в 100 больших не разлинованных квадратах камеры Горяева, что соответствует 100x16 = 1600 малым. Вычисление количества форменных элементов крови производят по следующей формуле:
X = Ах4000х20 1600
Где:
X - кол-во лейкоцитов в 1 мм3,
А - кол-во лейкоцитов, сосчитанных в 100 больших квадратах. Пример: В 1600 малых квадратах сосчитано 100 лейкоцитов, кровь разведена в 20 раз. Следовательно, количество лейкоцитов в 1 мм3 будет:
100x4000x20 = 5000. 1600
Таким образом, для получения результата достаточно практически умножить количество сосчитанных лейкоцитов на 50. В пересчете на литр крови общее число лейкоцитов составляет 5x109 (5х109/л).
ФИЗИОЛОГИЯ КРОВИ
ЦЕЛЬ: Определить время и интенсивность кровотечения по Дюку. ХОД РАБОТЫ:
1.Определить время и интенсивность кровотечения по Дюку. Обработать палец спиртом или эфиром. Сделать прокол мякоти пальца на глубину 3-3,5мм. Включить секундомер и снимать капли фильтровальной бумагой каждые 30 сек. Секундомер выключается в тот момент, когда на бумаге не останется следа крови. В норме время кровотечения равна 3-4 мин.
Для определения интенсивности кровотечения число капель крови на фильтровальной бумаге делят на время кровотечения. В норме она равна 2-3.
Увеличение времени кровотечения и интенсивности свидетельствует о нарушении сосудисто-тромбоцитарного гемостаза.
2. Определение времени ретракции.
В пробирку с касторовым маслом опускается капля крови взятая из пальца. Помещать каплю необходимо на поверхность масла в центр пробирки. Кровь и масло имеют приблизительно одинаковый удельный вес и поэтому капля остается на поверхности. Через определенное время наступает ретракция. При этом из сгустка отнимается сыворотка, которая образует на капле светловатую зону в виде «почки». По мере ретракции «почка «увеличивается в размере. Первое наблюдение проводят через 10 минут, а затем через каждые 5 минут.
Время ретракции соответствует 25-40 минут.
ФИЗИОЛОГИЯ КРОВИ
ТЕМА: СОСУДИСТО-ТРОМБОЦИТАРНЫЙ ГЕМОСТАЗ. МАНЖЕТОЧНАЯ ПРОБА
ЦЕЛЬ: Определить с помощью манжеточной пробы резистентность капилляров.
АППАРАТУРА: Прибор для определения кровяного давления, линейка, карандаш, желательно лупа.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ:
Резистентность (ломкость) капилляров бывает нарушенной при многих инфекционных заболеваниях, что отчасти связано с неполноценностью стенок микрососудов. Однако значительно чаще резистентность нарушается при резком снижении числа тромбоцитов. Снижение адгезивной и агрегационной функции тромбоцитов при диссеминированном внутрисосудистом свертывании крови и других патологических состояниях. В физиологических условиях резистентность может быть сниженной в весенний период, когда наблюдается значительный авитаминоз, в частности недостаток витамина С.
В клинике резистентность капилляров чаще всего определяют с помощью манжеточной пробы, постановка которой производится следующим образом. На верхней части ладонной поверхности предплечья очерчивают круг диаметром 5 см. На плечо накладывают манжетку от аппарата для измерения кровяного давления до 100-110 мм рт. ст. В таком положении манжетка остается на протяжении 5 мин. Затем манжетку снимают и в течение 5 мин ждут полного восстановления кровообращения в конечности. После этого подсчитывают число петехий 9 мелких кровоизлияний в очерченном круге. В норме число петехий не должно превышать 10, больше 10, причем в диаметре они не превышают 1 мм. Если петехий больше 10, но меньше 20, то проба считается слабоположительной. Если их число равняется 20-30, то проба -положительная, если больше 30, то резко положительная.
*
Проведите манжеточную пробу, объясните полученные результаты, сделайте выводы.
ФИЗИОЛОГИЯ КРОВИ.
ТЕМА: СОСУДИСТО-ТРОМБОЦИТАРНЫЙ ГЕМОСТАЗ. РАСШИФРОВКА
АГРЕГАТОГРАММЫ.
ЦЕЛЬ: Расшифровать агрегатограмму и сделать вывод, принадлежит ли она здоровому человеку.
МЕТОДИКА:
Агрегатограмма записывается с помощью прибора, получившего название агрегометр. К сожалению, мы не можем воспользоваться на занятиях этим прибором, ибо у нас он предназначен лишь для научной работы. Принцип записи агрегатограммы основан на изменении оптической плотности плазмы, содержащей тромбоциты, в которую вносится один из агрегирующих агентов (АДФ, адреналин, коллаген, тромбоксан А2, антибиотик ристомицин и др.). При этом регистрируется кривая, схема которой изображена на рисунке. В норме агрегатограмма носит двугорбый характер, хотя в зависимости от дозы агрегирующего агента можно получить и одногорбую прямую, а также агрегацию с последующей дезагрегацией (возвращение кривой к исходной величине) (см. рисунок).
Обычно агрегатограмма включает в себя латентный период АВ (момент внесения агрегирующего агента до начала записи агрегатограммы), величину максимальной амплитуды (МА), угол агрегации, время наступления максимальной агрегации и время дезагрегации (СД), если он наступает.
В норме для первой волны индекс агрегации (процент агрегированных тромбоцитов) равен 25-35%, время агрегации колеблется в пределах 30-35 сек, угол агрегации 60-65 градусов.
Нормы для второй волны агрегации: индекс агрегации - 60-70%, время агрегации - 90-100 сек, угол агрегации - 50-60 градусов.
После помещения индуктора в норме агрегация должна наступать не позднее, чем через 20-30 сек. (АВ). Следует помнить, что цена данного деления на агрегатограмме равна 20 сек (1 см ленты). Как правило, врачу необходимо обнаружить значительные нарушения агрегации. Они могут выражаться в отсутствии агрегации, ее чрезмерно низкой амплитуде, длительном латентном периоде. При повышении агрегационной активности тромбоцитов наступает спонтанная (без внесения индуктор) агрегация.
Усиление агрегации свидетельствует о том, что присутствует
предрасположенность или развитие тромбозов, снижение агрегации
свидетельствует о наклонности к кровоточивости. Расшифруйте
агрегатограмму, сделайте вывод, принадлежит ли она здоровому человеку.
ФИЗИОЛОГИЯ КРОВИ
ТЕМА: СВЕРТЫВАНИЕ КРОВИ
ЦЕЛЬ.
1. Расшифровать тромбоэластограмму.
2. Определить время свертывания методом Бюркера.
3. Изучить влияние тромбопластина, цитрата натрия, гепарина, хлорида
кальция на свертываемость крови.
ХОД РАБОТЫ:
Тромбоэластограмма позволяет судить не только об общей коагуляционной активности крови, но и об отдельных фазах этого процесса. Кроме того, по максимальной амплитуде ТЭГ можно ориентировочно судить о количестве образующегося фибрина и активности тромбоцитарных факторов. Запись ТЭГ производится с помощью тромбоэластографа. На ТЭГ различают следующие параметры:
R - время реакции. Характеризует I и II фазы свертывания крови. Это время от момента взятия крови до расхождения ветвей ТЭГ. В норме этот показатель равен от 5 до 6 мин.
К- время коагуляции. Характеризует III фазу свертывания крови. Оно
определяется от начала расширения ветвей, т.е. от конца параметра
К до расширения ветвей на 20 мм. В норме этот показатель равен от
3 до 6 мин. Т - константа тотального свертывания крови. Измеряется от начала записи до максимального расширения ветвей ТЭГ. В норме 25-35 мин.
Угол или угловая константа. Образуется касательной от начала записи ТЭГ к одной из ее ветвей. В норме равен 12-25 гр.
МА - максимальная амплитуда. Максимальное расширение ветвей гиперкоагуляции или усиление протекающей ретракции кровяного сгустка. Низкая амплитуда может свидетельствовать о снижении числа тромбоцитов, концентрации фибриногена или повышении уровня естественных антикоагулянтов.
Рис. 1. Сетка счетной камеры Горяева.
Маленький квадрат Большой квадрат
 |  | ||||
 | |||||
Рис.2. Схема сетки
