ЛАБОРАТОРНО – ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 1
Протокол № 1
Тема: Освоение бактериологического метода исследования микроорганизмов.
Цель: Получить представление о принципах бактериологического метода исследования микроорганизмов.
Задачи:
- Изучить правила техники безопасности
- Приобрести знания о помещениях бактериологической лаборатории и их предназначении.
- Приобрести знания о базовых методиках бактериологического метода исследования
- Приобрести навыки приготовления микробиологического мазка из жидкой культуры.
- Приобрести навыки окрашивания по Граму.
Задание 1. Пройти первичный инструктаж по технике безопасности на лабораторно-практических занятиях по Основам микробиологии и иммунологии. Выполнить лабораторные работы.
Лабораторная работа № 1
«Правила техники безопасности при работе в бактериологической лаборатории»
Ход работы:
- Ознакомиться с инструкциями № ИОТ–54–2019; ИОТ–76-2019.
- Заполнить таблицу 1.1. Правила инфекционной безопасности при работе в микробиологической лаборатории.
- Выучить правила техники инфекционной безопасности.
- После ознакомления с правилами работы расписаться в журнале техники безопасности.
Таблица 1.1
Правила инфекционной безопасности при работе в микробиологической лаборатории.
| Требования к внешнему виду | |
| 1. | |
| 2. | |
| Требования к поведению в микробиологической лаборатории | |
| 1. | |
| 2. | |
| 3. | |
| 4. | |
| 5. | |
| 6. | |
| 7. | |
| 8. | |
| Требования к обращению с реактивами и объектом исследования | |
| 1. | |
| 2. | |
| 3. | |
| 4. | |
| Требования к окончанию лабораторно-практического занятия | |
| 1. | |
| 2. | |
| 3. |
Задание 2. Ознакомиться с устройством микробиологической лаборатории
Лабораторная работа № 2
«Устройство микробиологической лаборатории»
Ход работы:
1. Вспомнить из теоретического курса определение, цели, задачи и объект исследования микробиологии как науки.
2. На основании теоретических знаний заполнить таблицу 1.2 Характеристика лабораторий.
3. Ознакомиться с устройством бактериологической лаборатории (Приказ МЗ от 19 января 1995 г № 8 «О развитии и совершенствовании деятельности лабораторий клинической микробиологии (бактериологии) лечебно-профилактических учреждений»)
4. Заполнить таблицу 1.3 Помещения чистой и грязной зон бактериологической лаборатории.
Таблица 1.2
Характеристика лабораторий
| Лаборатория | Объект исследования | Методы исследования |
| Микробиологическая | ||
| Бактериологическая | ||
| Вирусологическая | ||
| Иммунологическая | ||
| Санитарной микробиологии | ||
| Клинической микробиологии |
В бактериологической лаборатории выделяют «чистую» и «заразную» зоны:
Таблица 1.3
Помещения чистой и грязной зон бактериологической лаборатории
| Чистая зона | Грязная (заразная) зона |
.
Лабораторная работа № 3
«Оснащение рабочего места для приготовления микробиологического мазка»
Ход работы
1. Оборудовать рабочее место необходимым оснащением для приготовления и окрашивания микробиологического мазка
1 Спиртовка
2 Бактериологические петли, иглы, шпатели, пинцеты
3 Предметные стекла
4 Вата или марлевые салфетки
5 Мыло
6 Карандаши по стеклу
7 Спички
8 Пипетки
9 Наборы красителей: генцианвиолет, водный раствор фуксина, раствор Люголя, Спирт 95º.
10 Колба для воды
11 Емкость с дезинфицирующим раствором
12 Банка для мусора
13 Иммерсионное масло
14 Микроскоп
15 Микробиологический мостик
16 Кристаллизатор
Задание 3. Изготовить, окрасить по Граму, и промикроскопировать с иммерсией мазок из жидкой бактериальной культуры
Лабораторная работа № 4
«Приготовление мазка из жидкой культуры пекарских дрожжей»
Ход работы:
- чистые сухие предметные стекла обезжирить, натерев их кусочком мыла, а затем протерев марлевой салфеткой.
- на обезжиренное стекло нанести пипеткой каплю воды (для плотной культуры).
- профламбировать микробиологическую петлю в пламени спиртовки (кольцо, проволочную ножку до держателя).
- охладить петлю о стенку пробирки или крышку чашки Петри.
- захватить петлей часть культуры
- опустить петлю с культурой на стекло и тщательно растереть (эмульгировать) до гомогенного тонкого ровного слоя.
- профламбировать петлю, сжечь остатки культуры.
- мазок высушить на воздухе.
- высушенный мазок зафиксировать над пламенем спиртовки (3 – 5 сек) трижды медленно проводя через пламя. На этом этапе мазок закрепляется на стекле, микробы инактивируются, убитые микроорганизмы лучше воспринимают краску.
Лабораторная работа № 5
«Методика окрашивания по Граму»
Ход работы:
- на фиксированный мазок нанести 1 – 2 капли генцианвиолета на 3 – 5 мин.
- промыть водой, держа препарат ребром.
- нанести раствор Люголя на 1 – 2 мин.
- дифференцировать в этиловом спирте до почернения препарата и отхождения облачков краски 30 – 60 сек.
- промыть водой.
- докрасить водный раствором фуксина 30 – 60 сек.
- тщательно промыть водой,
- высушить на воздухе
Таблица 1.4
Этапы окрашивания по Граму
| Этап | С какой целью проводится |
| Нанесение генцианвиолета | |
| Промывание водой | |
| Нанесение раствора Люголя | |
| Промывание в спирте | |
| Промывание водой | |
| Докрашивание фуксином | |
| Результат |
Задание 4. Решить ситуационные задачи.
Задача 1. Студентка медицинского колледжа присутствует на занятиях по Основам микробиологии и иммунологии без шапочки, с распущенными волосами. К каким последствиям может привести данное нарушение техники безопасности?
Задача 2. Студентка медицинского колледжа во время лабораторно-практических занятий по Основам микробиологии и иммунологии, в процессе приготовления микробиологического мазка ответила на звонок по сотовому телефону. Какие правила техники безопасности были нарушены? К каким последствиям может привести данное нарушение техники безопасности?