Лабораторная работа. Диагностика, профилактика и оздоровительные мероприятия при дизентерии свиней
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
Специальность 111201 - «Ветеринария»
УФА – 2018
УДК 619: 616.9 ББК 48 Э 71
Рассмотрена и одобрена на заседании методической комиссии факультета биотехнологии и ветеринарной медицины от 29 марта 2018 г. (протокол № 9)
Составители:
профессор кафедры инфекционных
болезней, зоогигиены и ветсанэкспертизы,
д-р. ветеринар. наук А.И. Иванов
Рецензент:
зав. кафедры морфологии,
патологии, фармации и незаразных болезней,
д-р. ветеринар. наук, профессор Е.Н. Сковородин
Ответственный за выпуск:
зав. кафедрой инфекционных
болезней, зоогигиены и ветсанэкспертизы
др. биол. наук, профессор А.В. Андреева
г. Уфа, БГАУ, кафедра инфекционных болезней,
зоогигиены и ветсанэкспертизы
Диагностика, профилактика и оздоровительные мероприятия при дизентерии свиней
Цель работы
Освоить методы диагностики дизентерии свиней, систему лечебно-профилактических и оздоровительных мероприятий.
Материалы и оборудование
Схемы классификации инфекционных желудочно-кишечных болезней свиней, дифференциальной диагностики бактериальных и вирусных инфекций, диапозитивы, световой микроскоп с иммерсионной системой, обезжиренные предметные стекла, набор красителей для окрашивания мазков, муляжи, ветеринарное законодательство, наставления, инструкции, плакаты, антидизентерийные препараты.
Задание
1) Изучить методы диагностики и дифференциальной диагностики дизентерии свиней. 2) Разработать план мероприятий по профилактике и ликвидации дизентерии свиней. 3) Составить схему лечения больных дизентерией свиней с применением антидизентерийных препаратов.
|
ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ
Дизентерия свиней (ДС) наносит значительный ущерб свиноводству, складывающийся из снижения привеса, преждевременной выбраковки, гибели и значительных экономических затрат на лечебно-профилактические мероприятия. Нередко неблагополучные по дизентерии хозяйства становятся убыточными. При своевременном проведении ветеринарно-санитарных и лечебно-профилактических мероприятий в неблагополучном по ДС хозяйстве болезнь удается ликвидировать.
Дизентерия свиней (ДС) - инфекционное контагиозное заболевание, соп -ровождающееся поражением толстого отдела кишечника, кроваво - слизистой диареей, резким исхуданием и гибелью животных. Возбудитель болезни. В процессе изучения возбудитель ДС - анаэробная спирохета несколько раз перетерпела родовые переименования - сначала получила название Treponema hyodysenteriae (1972) затем Serpulina hyodysenteriae (1991) в настоящее время Вгасhyspira hyodysenteriae (1998), объединенным в порядок Spirochetales семейства Spirochaetасеае. Она имеет 2-4 изгиба и обладает характерным змеевидным движением за счет осевой нити, размером 7 - 9 х 0,3 - 0,4 мкм. Грамотрицательны. Во внешней среде малоустойчив - в фекалиях погибает по мере высыхания, но может сохраняться в фекалиях и трупах до 8 дней. В жижесборниках при создании анаэробных условий сохраняется до 60 дней. Различные микроорганизмы, особенно анаэробные (С1.регfringens, F.nе-сгорhогum, Васteroides, могут вовлекаться в этиопатогенез болезни, изменять течение и тяжесть инфекционного процесса.
|
ДИАГНОСТИКА
Диагноз на ДС устанавливают комплексно по эпизоотологическим, клиническим, патологоанатомическим (макроскопические, гистологические и ультраструктурные изменения толстого отдела кишечника) данным и по результатам лабораторных исследований. Эпизоотологические данные. Дизентерия свиней энзоотически проявляющееся заболевание, восприимчивы свиньи всех пород и возрастов. Особенно тяжело переболевают поросята послеотъемного периода, подсвинки 3-5 - месячного возраста. Болезнь может возникнуть в любое время года, но чаще -осенне-зимний и весенний периоды, обостряясь при значительных перепадах температур. Вспышки болезни возникают, как правило, после завоза в хозяйства племенных или откормочных свиней. При завозе в благополучное хозяйство свиней, больных дизентерией или спирохетоносителей, заболевание распространяется на животных контактируемых групп. При отсутствии прямого контакта, особенно при завозе племенного молодняка и изолированном содержании, заболевание распространяется на другие возрастные группы через несколько недель, а иногда и месяцев, но при участии не только свиней, но и крыс. В свежих очагах болезнь протекает остро, с типичными признаками, проявляя высокую контагиозность и массовый характер. В течение первых 3-7 суток заболевает 60-90% поголовья, летальность достигает 27% и более. Наиболее восприимчивы к ДС поросята месячного возраста, отъемный молодняк и свиньи на откорме массой до 60-70 кг. Реже болеют взрослые животные и поросята - сосуны 3-4-недельного возраста. Поросята в возрасте до 3-х недель почти не болеют, но могут выделять возбудителей во внешнюю среду. В хозяйствах откормочного типа, пополняемых сборным поголовьем из официально благополучных по инфекционным болезням репродуктивных хозяйств, спорадические случаи ДС возможны с момента вступления их в строй. Тесное размещение, антисанитарные условия, резкая смена кормов, скармливание недоброкачественных кормов, недостаток витаминов, отсутствие моциона способствуют распространению ДС. Источником возбудителя инфекции становятся больные, реконвалесцентные и выздоровевшие свиньи, которые длительное время являются микробоносителями: свиньи до 6 месяцев, а крысы - в течение всей жизни. Длительность микробоносительства при ДС окончательно не установлена. Больные животные постоянно выделяют с фекалиями большое количество высоковирулентного возбудителя и быстро перезаражают здоровых свиней. Факторами передачи являются зараженные корма, вода, оборудование, навоз и предметы ухода. Болезнь также может передаваться обслуживающим персоналом при несоблюдении ветеринарно - санитарных правил. Заражение происходит алиментарным путем. Широкое и длительное микробоносительство клинически переболевшими животными, а также бессимптомными носителями без предшествующего заболевания - весьма важная эпизоотическая закономерность, способствующая формированию стационарных эпизоотических очагов дизентерии. Наиболее характерны эпизоотологические данные, имеющие значение при постановке диагноза: заболеваемость по всем возрастным группам 50% и более, наличие сопутствующих факторов - завоз нового поголовья, смена рациона, перегруппировки, а также рецидивирующее течение заболевания. При эпизоотологическом обследовании устанавливают время появления болезни в хозяйстве, выявляют факторы, предрасполагающие к возникновению и распространению болезни и осложняющие ее течение. Часто причиной желудочно-кишечных болезней свиней являются недоброкачественные корма. Одновременно проверяют полноценность рациона, а также соблюдение санитарно-гигиенических норм содержания животных на каждом этапе технологического цикла. Клинические признаки. Инкубационный период при ДС длится от двух дней до трех месяцев. При естественном заражении болезнь обычно проявляется в течение 7-14 дней. Течение ДС острое, подострое и хроническое. Наиболее характерный симптом при ДС кровавый понос с выделением фекалий от желтого до темно-серого цвета. По мере усиления диареи кал становится более водянистым с примесью крови, слизи и слизисто-фибринозных пленок. Длительная диарея приводит к дегидратации. Температура в начале заболевания субфибрильная (40-40,5°С), затем через один-два дня снижается до нормальной. У некоторых животных повышается до 41°С и удерживается два-три дня, затем постепенно снижается. Острое течение дизентерии характеризуется геморрагическим колитом. Фекалии вначале бывают серого цвета, затем черно-серого цвета с примесью крови. Аппетит плохой, наблюдается нарушение координации движения, температура тела достигает 40,5°С. Кровавый понос чаще наблюдается у поросят-отъемышей, подсвинков и взрослых свиней. Продолжительность болезни -5-7 дней. При подостром и хроническом течении дизентерии также развивается диарея при почти нормальном аппетите и повышенной жажде.
|
Патологоанатомические признаки. Основные изменения при дизентерии наблюдаются в желудке и толстом отделе кишечника. Слизистая оболочка гиперемирована или геморрагически воспалена. В тонком отделе кишечника патологические изменения отсутствуют. Толстый отдел кишечника наполнен жидким содержимым кофейного цвета с примесью крови. Слизистая оболочка и подслизистый слой желудка и толстого отдела кишечника (в основном ободочная кишка) отечные. Поперечные складки слизистой оболочки воспалены.
На более поздних стадиях болезни в желудке и толстом отделе кишечника наблюдают различной степени геморрагическое воспаление и некроз.
Поверхность слизистой оболочки покрыта легко снимающимися пленками фибрина. При удалении этих наложений открывается ярко-красная слизистая оболочка с кровоизлияниями и кровоточащими язвами.
Лабораторные исследования. Включают бактериоскопию, бактериологию и биопробу. Бактериоскопия используется для обнаружения путем различных методов микроскопии фекалий и пораженных участков толстого отдела кишечника Вг.hyodysenteriae. Бактериологические исследования проводят микроскопией нативных и фиксированных мазков, приготовленных из ректально взятых проб фекалий, а также из пораженных участков толстого отдела кишечника от павших и вынужденно убитых животных. Ректальные пробы фекалий можно отбирать стерильными деревянными палочками толщиной до 0,5 см, длиной 15 см, на один конец которых перед стерилизацией наматывают ватный тампон толщиной до 1 см. Стерильную палочку с тампоном вводят в прямую кишку на глубину 7-12 см, проворачивают и извлекают, после чего пробу помещают в пробирки со стерильным забуференным фосфатным буфером физраствором рН 7,0-7,2 (3-5 мл), тампон отмывают и извлекают, а спустя 10-15 минут берут каплю из поверхностного слоя пробирки для исследований. Пораженные участки толстого отдела кишечника промывают забуферен-ным фосфатным физраствором рН 6,8-7,2 после чего готовят мазки - отпечатки.
Рисунок 1 Мазок из соскоба слизистой оболочки слепой кишки больной ДС, убитой с диагностической целью. На рисунке виден возбудитель Br.hyodysente-riae, змеевидной формы. Окраска карболовым фуксином Циля. х 900
Рисунок 2 Мазок из фекалий больной свиньи через 36 часов экспериментального заражения культурой Br.hyodysenteriae. На рисунке видны извитые спирохеты. Окраска по Граму. х 1000
Соскобы пораженных участков слизистой и подслизистой делают с очищенного таким образом кишечника стерильным скальпелем, и после измельчения ресуспендируют и микроскопируют по методу «раздавленной капли» в «темном поле» или при фазовом контрасте при максимально закрытом конденсоре под иммерсией х 900 - 1000 раз. Фиксированные 96° этиловым спиртом мазки окрашивают карболовым фуксином (1 мин.), разведенным 1: 5, или по Романовскому-Гимзе и по Граму. В нативно приготовленных мазках возбудители дизентерии имеют аскаридоподобную с заостренными концами форму с 3 - 4 изгибами (см. рис.1, 2). Для получения достоверного результата необходимо просматривать не менее 20 полей зрения микроскопа. Бактериологические исследования применяют для выделения возбудителя в чистой культуре - этот метод является продолжением предыдущего, так как для бактериологических исследований берут только те пробы материала, в котором при микроскопии обнаружено наибольшее количество спирохет. Выделение возбудителя в чистой культуре проводят на анаэробно приготовленных питательных средах, триптиказосоевом и триптиказослизистом 2% агаре, содержащих 0,05%-цистеина, 1% пептона, 0,25 глюкозы, 0,25 мальтозы и 10% крови крупного рогатого скота или барана, а также 800 мкг/мл спектама. Культивируют посевы в анаэробном термостате при температуре 42°С в течение трех-шести суток. Термостат заполняют смесью газов (Н2 - 80%, СО2 - 20%). Рост микроорганизмов наблюдают по зонам (β - гемолиза или по наличию в этих зонах мелких колоний до 0,1 мм в диаметре.
Морфология брахиспир в культурах сходна с морфологией, наблюдаемой в нативном материале от больных животных (см.рис.3). При необходимости постановки биопробы в условиях производства берут двух-трех поросят-отъемышей 2-3 - месячного возраста из хозяйств, благополучных по ДС. Им скармливают измельченный инфицированный толстый кишечник, полученный от вынужденно убитых свиней, в котором обнаружено наибольшее количество возбудителя ДС. Появление клинических признаков у поросят, зараженных патматериалом, через 2-14 дней свидетельствует об инфекционной этиологии.
Рисунок 3 Чистая культура Br.hyodysenteriae выделенная на селективной среде ТСКА. Окраска по Граму. х 1000
Характерным клиническим признаком является диарея с примесью крови, слизи и пленок фибрина в фекалиях. Температура тела повышается до 40,5-410 С только в начальный период заболевания, а к исходу заболевания отмечается снижение температуры тела на 1-2°С ниже физиологической нормы. В зависимости от течения болезни, летальный исход наступает на второй-пятый день при остром, на 8-14-й - день при подостром и на 15-21-й день - при хроническом течении. Патологический материал (слепую и ободочную кишку) берут от поросят, погибших в первые сутки появления клинических признаков, и направляют в лабораторию в термосе со льдом. Патматериал должен быть происследован в течение 3-6 часов с момента отбора. При более позднем исследовании его следует сохранить в жидком азоте в сосуде Дьюара.
ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНЫЙ ДИАГНОЗ
Диагностика основана на анализе эпизоотологических данных, клинических признаков и характерных патологоанатомических изменений в толстом отделе кишечника. Комплексная диагностика уточняется результатами микроскопических исследований фекалий или соскобов со слизистой оболочки толстого отдела кишечника. ДС необходимо дифференцировать от классической чумы, сальмонеллезов, трансмиссивного гастроэнтерита, анаэробной дизентерии, эшерихиоза (колибактериоза), гастроэнтеритов неинфекционного происхождения. Классическая чума свиней характеризуется эпизоотическим, чаще острым течением. Болеют животные всех возрастов, и летальный исход при ней может достигать 100%. При патологоанатомическом вскрытии наиболее типичные признаки характеризуются сильно выраженным геморрагическим лимфаденитом и массовыми кровоизлияниями, инфарктами селезенки, поражением толстого отдела кишечника в виде "бутонов", негнойным лимфоцитарным энцефалитом. Вирусный (трансмиссивный) гастроэнтерит отличается от дизентерии свиней высокой контагиозностью, особенно среди поросят-сосунов. При вирусном гастроэнтерите наиболее характерные изменения устанавливают в тонком отделе кишечника в виде острых воспалений, катарально-геморрагических воспалений слизистой оболочки, которые в толстом отделе выражены слабо. В фекалиях отсутствуют примеси крови. Салъмонеллезом в основном болеют поросята предотъемного возраста. Болезнь проявляется высокой температурой, посинением кончиков ушных раковин и темно-красным окрашиванием кожи в области груди и живота. При вскрытии находят массовые геморрагии и некротические очажки во внутренних органах и лимфоузлах, изъявления солитарных фолликул. Окончательный диагноз зависит от отсутствия возбудителя ДС в слизистой толстых кишок и выделения возбудителя сальмонеллеза. Следует также учитывать, что выделение возбудителей этой бактерии недостаточно для постановки диагноза на сальмонеллез, поскольку здоровые и больные ДС могут быть носителями сальмонелл. Эшерихиоз (колибактериоз) протекает с повышенной температурой тела с развитием геморрагического диатеза во внутренних органах. Болеют поросята преимущественно в первые дни жизни, значительно реже в более поздний подсосный период. При вскрытии в желудке и тонком отделе кишечника обнаруживают катарально-геморрагическое воспаление слизистой оболочки без отека стенок кишечника и каких-либо наложений на слизистой оболочке.
Анаэробной дизентерией болеют только новорожденные поросята в первые дни болезни. Возбудитель болезни С1.регfringens типа С. Гастроэнтериты неинфекционного происхождения возникают после скармливания недоброкачественных кормов. Диарею в таких случаях устанавливают у определенных групп свиней, получавших испорченные корма. Примеси крови в фекалиях отсутствует. После изменения кормов прекращаются поносы. При вскрытии в слизистой оболочке желудка и тонкого отдела кишечника отмечают катарально-геморрагическое воспаление. Сложности в диагностике возрастают при смешанном течении нескольких инфекций.