ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНЫЙ ДИАГНОЗ. Составители

Лабораторная работа. Диагностика, профилактика и оздоровительные мероприятия при дизентерии свиней

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

 

Специальность 111201 - «Ветеринария»

 

 

УФА – 2018

УДК 619: 616.9 ББК 48 Э 71

Рассмотрена и одобрена на заседании методической комиссии факультета биотехнологии и ветеринарной медицины от 29 марта 2018 г. (протокол № 9)

 

Составители:

профессор кафедры инфекционных

болезней, зоогигиены и ветсанэкспертизы,

д-р. ветеринар. наук А.И. Иванов

 

Рецензент:

зав. кафедры морфологии,

патологии, фармации и незаразных болезней,

д-р. ветеринар. наук, профессор Е.Н. Сковородин

 

Ответственный за выпуск:

зав. кафедрой инфекционных

болезней, зоогигиены и ветсанэкспертизы

др. биол. наук, профессор А.В. Андреева

 

 

г. Уфа, БГАУ, кафедра инфекционных болезней,

зоогигиены и ветсанэкспертизы

Диагностика, профилактика и оздоровительные мероприятия при дизентерии свиней

Цель работы

Освоить методы диагностики дизентерии свиней, систему лечебно-профилактических и оздоровительных мероприятий.

Материалы и оборудование

Схемы классификации инфекционных желудочно-кишечных болезней свиней, дифференциальной диагностики бактериальных и вирусных инфекций, диа­позитивы, световой микроскоп с иммерсионной системой, обезжиренные предметные стекла, набор красителей для окрашивания мазков, муляжи, ветеринарное законодательство, наставления, инструкции, плакаты, антидизентерийные препараты.

Задание

1) Изучить методы диагностики и дифференциальной диагностики дизентерии свиней. 2) Разработать план мероприятий по профилактике и ликвидации дизентерии свиней. 3) Составить схему лечения больных дизентерией свиней с применением антидизентерийных препаратов.

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ

Дизентерия свиней (ДС) наносит значительный ущерб свиноводству, складывающийся из снижения привеса, преждевременной выбраковки, гибели и значительных экономических затрат на лечебно-профилактические мероприятия. Нередко неблагополучные по дизентерии хозяйства становятся убыточными. При своевременном проведении ветеринарно-санитарных и лечебно-профилактических мероприятий в неблагополучном по ДС хозяйстве болезнь удается ликвидировать.

Дизентерия свиней (ДС) - инфекционное контагиозное заболевание, соп -ровождающееся поражением толстого отдела кишечника, кроваво - слизи­стой диареей, резким исхуданием и гибелью животных. Возбудитель болезни. В процессе изучения возбудитель ДС - анаэробная спирохета несколько раз перетерпела родовые переименования - сначала получила назва­ние Treponema hyodysenteriae (1972) затем Serpulina hyodysenteriae (1991) в настоящее время Вгасhyspira hyodysenteriae (1998), объединенным в порядок Spirochetales семейства Spirochaetасеае. Она имеет 2-4 изгиба и обладает характерным змеевидным движением за счет осевой нити, размером 7 - 9 х 0,3 - 0,4 мкм. Грамотрицательны. Во внешней среде малоустойчив - в фекалиях по­гибает по мере высыхания, но может сохраняться в фекалиях и трупах до 8 дней. В жижесборниках при создании анаэробных условий сохраняется до 60 дней. Различные микроорганизмы, особенно анаэробные (С1.регfringens, F.nе-сгорhогum, Васteroides, могут вовлекаться в этиопатогенез болезни, изменять течение и тяжесть инфекционного процесса.

ДИАГНОСТИКА

Диагноз на ДС устанавливают комплексно по эпизоотологическим, клиническим, патологоанатомическим (макроскопические, гистологические и ультраструктурные изменения толстого отдела кишечника) данным и по результатам лабораторных исследований. Эпизоотологические данные. Дизентерия свиней энзоотически проявляющееся заболевание, восприимчивы свиньи всех пород и возрастов. Особенно тяжело переболевают поросята послеотъемного периода, подсвинки 3-5 - месячного возраста. Болезнь может возникнуть в любое время года, но чаще -осенне-зимний и весенний периоды, обостряясь при значительных перепадах температур. Вспышки болезни возникают, как правило, после завоза в хозяйства племенных или откормочных свиней. При завозе в благополучное хозяйство свиней, больных дизентерией или спирохетоносителей, заболевание распространяется на животных контактируемых групп. При отсутствии прямого контакта, особенно при завозе племенного молодняка и изолированном содержании, заболевание распространяется на другие возрастные группы через несколько недель, а иногда и месяцев, но при участии не только свиней, но и крыс. В свежих очагах болезнь протекает остро, с типичными признаками, проявляя высокую контагиозность и массовый характер. В течение первых 3-7 суток заболевает 60-90% поголовья, летальность достигает 27% и более. Наиболее восприимчивы к ДС поросята месячного возраста, отъемный молодняк и свиньи на откорме массой до 60-70 кг. Реже болеют взрослые животные и поросята - сосуны 3-4-недельного возраста. Поросята в возрасте до 3-х недель почти не болеют, но могут выде­лять возбудителей во внешнюю среду. В хозяйствах откормочного типа, попол­няемых сборным поголовьем из официально благополучных по инфекционным болезням репродуктивных хозяйств, спорадические случаи ДС возможны с мо­мента вступления их в строй. Тесное размещение, антисанитарные условия, резкая смена кормов, скармливание недоброкачественных кормов, недостаток витаминов, отсутствие моциона способствуют распространению ДС. Источни­ком возбудителя инфекции становятся больные, реконвалесцентные и выздоро­вевшие свиньи, которые длительное время являются микробоносителями: сви­ньи до 6 месяцев, а крысы - в течение всей жизни. Длительность микробоно­сительства при ДС окончательно не установлена. Больные животные постоянно выделяют с фекалиями большое количество высоковирулентного возбудителя и быстро перезаражают здоровых свиней. Факторами передачи являются зараженные корма, вода, оборудование, навоз и предметы ухода. Болезнь также может передаваться обслуживающим персоналом при несоблюдении ветеринарно - санитарных правил. Заражение происходит алиментарным путем. Широкое и длительное микробоносительство клинически переболевшими животными, а также бессимптомными носителями без предшествующего заболевания - весьма важная эпизоотическая закономерность, способствующая формированию стационарных эпизоотических очагов дизентерии. Наиболее характерны эпизоотологические данные, имеющие значение при постановке диагноза: заболеваемость по всем возрастным группам 50% и более, наличие сопутствующих факторов - завоз нового поголовья, смена ра­циона, перегруппировки, а также рецидивирующее течение заболевания. При эпизоотологическом обследовании устанавливают время появления болезни в хозяйстве, выявляют факторы, предрасполагающие к возникновению и распространению болезни и осложняющие ее течение. Часто причиной желудочно-кишечных болезней свиней являются недоброкачественные корма. Одновременно проверяют полноценность рациона, а также соблюдение санитарно-гигиенических норм содержания животных на каждом этапе технологического цикла. Клинические признаки. Инкубационный период при ДС длится от двух дней до трех месяцев. При естественном заражении болезнь обычно проявляется в течение 7-14 дней. Течение ДС острое, подострое и хроническое. Наиболее характерный симптом при ДС кровавый понос с выделением фекалий от желтого до темно-серого цвета. По мере усиления диареи кал становится более водянистым с примесью крови, слизи и слизисто-фибринозных пленок. Длительная диарея приводит к дегидратации. Температура в начале заболевания субфибрильная (40-40,5°С), затем через один-два дня снижается до нормальной. У некоторых животных повышается до 41°С и удерживается два-три дня, затем постепенно снижается. Острое течение дизентерии характеризуется геморрагическим колитом. Фекалии вначале бывают серого цвета, затем черно-серого цвета с примесью крови. Аппетит плохой, наблюдается нарушение координации движения, тем­пература тела достигает 40,5°С. Кровавый понос чаще наблюдается у поросят-отъемышей, подсвинков и взрослых свиней. Продолжительность болезни -5-7 дней. При подостром и хроническом течении дизентерии также развивается диарея при почти нормальном аппетите и повышенной жажде.

Патологоанатомические признаки. Основные изменения при дизенте­рии наблюдаются в желудке и толстом отделе кишечника. Слизистая обо­лочка гиперемирована или геморрагически воспалена. В тонком отделе кишечника патологические изменения отсутствуют. Толстый отдел ки­шечника наполнен жидким содержимым кофейного цвета с примесью крови. Слизистая оболочка и подслизистый слой желудка и толстого отде­ла кишечника (в основном ободочная кишка) отечные. Поперечные складки слизистой оболочки воспалены.

На более поздних стадиях болезни в желудке и толстом отделе кишеч­ника наблюдают различной степени геморрагическое воспаление и не­кроз.

Поверхность слизистой оболочки покрыта легко снимающимися пленками фибрина. При удалении этих наложений открывается ярко-красная слизистая оболочка с кровоизлияниями и кровоточащими язва­ми.

Лабораторные исследования. Включают бактериоскопию, бактерио­логию и биопробу. Бактериоскопия используется для обнаружения путем раз­личных методов микроскопии фекалий и пораженных участков толстого отдела кишечника Вг.hyodysenteriae. Бактериологические исследования проводят микроскопией нативных и фиксированных мазков, приготовленных из ректально взятых проб фекалий, а также из пораженных участков толстого отдела кишечника от павших и вынужденно убитых животных. Ректальные пробы фекалий можно отбирать стерильными деревянными палочками толщиной до 0,5 см, длиной 15 см, на один конец которых перед стерилизацией наматывают ватный тампон толщиной до 1 см. Стерильную па­лочку с тампоном вводят в прямую кишку на глубину 7-12 см, проворачивают и извлекают, после чего пробу помещают в пробирки со стерильным забуференным фосфатным буфером физраствором рН 7,0-7,2 (3-5 мл), тампон отмывают и извлекают, а спустя 10-15 минут берут каплю из поверхностного слоя пробирки для исследований. Пораженные участки толстого отдела кишечника промывают забуферен-ным фосфатным физраствором рН 6,8-7,2 после чего готовят мазки - отпечатки.

 

Рисунок 1 Мазок из соскоба слизистой оболочки слепой кишки больной ДС, убитой с диагностической целью. На рисунке виден возбудитель Br.hyodysente-riae, змеевидной формы. Окраска карболовым фуксином Циля. х 900

 

 

Рисунок 2 Мазок из фекалий больной свиньи через 36 часов экспериментального заражения культурой Br.hyodysenteriae. На рисунке видны извитые спирохеты. Окраска по Граму. х 1000

 

Соскобы пораженных участков слизистой и подслизистой делают с очищенного таким образом кишечника стерильным скальпелем, и после измельчения ресуспендируют и микроскопируют по методу «раздавленной капли» в «темном поле» или при фазовом контрасте при максимально закрытом конденсоре под иммерсией х 900 - 1000 раз. Фиксированные 96° этиловым спиртом мазки окрашивают карболовым фуксином (1 мин.), разведенным 1: 5, или по Романовскому-Гимзе и по Граму. В нативно приготовленных мазках возбудители дизентерии имеют аскаридоподобную с заостренными концами форму с 3 - 4 изгибами (см. рис.1, 2). Для получения достоверного результата необходимо просматривать не менее 20 полей зрения микроскопа. Бактериологические исследования применяют для выделения возбудителя в чи­стой культуре - этот метод является продолжением предыдущего, так как для бактериологических исследований берут только те пробы материала, в котором при микроскопии обнаружено наибольшее количество спирохет. Выделение возбудителя в чистой культуре проводят на анаэробно приготовленных пита­тельных средах, триптиказосоевом и триптиказослизистом 2% агаре, содержащих 0,05%-цистеина, 1% пептона, 0,25 глюкозы, 0,25 мальтозы и 10% крови крупного рогатого скота или барана, а также 800 мкг/мл спектама. Куль­тивируют посевы в анаэробном термостате при температуре 42°С в течение трех-шести суток. Термостат заполняют смесью газов (Н₂ - 80%, СО₂ - 20%). Рост микроорганизмов наблюдают по зонам (β - гемолиза или по наличию в этих зонах мелких колоний до 0,1 мм в диаметре.

Морфология брахиспир в культурах сходна с морфологией, наблюдаемой в нативном материале от боль­ных животных (см.рис.3). При необходимости постановки биопробы в условиях производства берут двух-трех поросят-отъемышей 2-3 - месячного возраста из хозяйств, благополучных по ДС. Им скармливают измельченный инфицированный толстый кишечник, полученный от вынужденно убитых свиней, в котором обнаружено наибольшее количество возбудителя ДС. Появление клинических признаков у поросят, зараженных патматериалом, через 2-14 дней свидетельствует об инфекционной этиологии.

 

Рисунок 3 Чистая культура Br.hyodysenteriae выделенная на селективной среде ТСКА. Окраска по Граму. х 1000

 

Характерным клиническим признаком является диарея с примесью крови, слизи и пленок фибрина в фекалиях. Температура тела повышается до 40,5-41⁰ С только в начальный период заболевания, а к исходу заболевания отмечается снижение температуры тела на 1-2°С ниже физиологической нормы. В зависимости от течения болезни, летальный исход наступает на второй-пятый день при остром, на 8-14-й - день при подостром и на 15-21-й день - при хроническом течении. Патологический материал (слепую и ободочную кишку) берут от поросят, погибших в первые сутки появления клинических признаков, и направляют в лабораторию в термосе со льдом. Патматериал должен быть происследован в течение 3-6 часов с момента отбора. При более позднем иссле­довании его следует сохранить в жидком азоте в сосуде Дьюара.

ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНЫЙ ДИАГНОЗ

Диагностика основана на анализе эпизоотологических данных, клиниче­ских признаков и характерных патологоанатомических изменений в толстом отделе кишечника. Комплексная диагностика уточняется результатами микроскопических исследований фекалий или соскобов со слизистой оболочки толстого отдела кишечника. ДС необходимо дифференцировать от классиче­ской чумы, сальмонеллезов, трансмиссивного гастроэнтерита, анаэробной ди­зентерии, эшерихиоза (колибактериоза), гастроэнтеритов неинфекционного происхождения. Классическая чума свиней характеризуется эпизоотическим, чаще острым течением. Болеют животные всех возрастов, и летальный исход при ней может достигать 100%. При патологоанатомическом вскрытии наиболее типичные признаки характеризуются сильно выраженным геморрагическим лимфаденитом и массовыми кровоизлияниями, инфарктами селезенки, поражением толстого отдела кишечника в виде "бутонов", негнойным лимфоцитарным энцефалитом. Вирусный (трансмиссивный) гастроэнтерит отличается от дизентерии свиней высокой контагиозностью, особенно среди поросят-сосунов. При вирус­ном гастроэнтерите наиболее характерные изменения устанавливают в тонком отделе кишечника в виде острых воспалений, катарально-геморрагических вос­палений слизистой оболочки, которые в толстом отделе выражены слабо. В фе­калиях отсутствуют примеси крови. Салъмонеллезом в основном болеют поросята предотъемного возраста. Болезнь проявляется высокой температурой, посинением кончиков ушных ра­ковин и темно-красным окрашиванием кожи в области груди и живота. При вскрытии находят массовые геморрагии и некротические очажки во внутренних органах и лимфоузлах, изъявления солитарных фолликул. Окончательный диагноз зависит от отсутствия возбудителя ДС в слизистой толстых кишок и выделения возбудителя сальмонеллеза. Следует также учитывать, что выделение возбудителей этой бактерии недостаточно для постановки диагноза на сальмонеллез, поскольку здоровые и больные ДС могут быть носителями сальмонелл. Эшерихиоз (колибактериоз) протекает с повышенной температурой тела с развитием геморрагического диатеза во внутренних органах. Болеют поросята преимущественно в первые дни жизни, значительно реже в более поздний подсосный период. При вскрытии в желудке и тонком отделе кишечника обнаруживают катарально-геморрагическое воспаление слизистой оболочки без отека стенок кишечника и каких-либо наложений на слизистой оболочке.

Анаэробной дизентерией болеют только новорожденные поросята в пер­вые дни болезни. Возбудитель болезни С1.регfringens типа С. Гастроэнтериты неинфекционного происхождения возникают после скармливания недоброкачественных кормов. Диарею в таких случаях устанавливают у определенных групп свиней, получавших испорченные корма. Примеси крови в фекалиях отсутствует. После изменения кормов прекращаются поносы. При вскрытии в слизистой оболочке желудка и тонкого отдела кишечника отмечают катарально-геморрагическое воспаление. Сложности в диагностике возрастают при смешанном течении нескольких инфекций.