Студент:
Руководитель:
Дата
| Дата | Проводимая работа | Оценка и подпись непосредственного руководителя |
| 14.03.16 15.03.16 16.03.16 17.03.16 18.03.16 21.03.16 22.03.16 23.03.16 24.03.16 25.03.16 26.03.16 28.03.16 29.03.16 30.03.16 31.03.16 | Сегодня у нас было знакомство с лабороторией, с ее отделениями, с мед.персоналом. Прохождение инструктажапо технике безопасности.Знакомство с объемом работы в патолоанатомическом отделении. Планировка помещения патологоанатомического отделения и морга должна соответствовать следующим требованиям: помещения, связанные с транспортировкой трупов внутри здания, проведением вскрытия, обработкой и хранением нефиксированного секционного и биопсийного материала, должны быть отделены коридором от гистологической лаборатории, помещения для врачей и обслуживающего персонала,хранение архивов, душевой и санитарного узла, а также других помещений. Сегодня я практиковалась в комнате для вырезки. Нас познакомили с рабочим местом и его особенностями. Здесь врач-патологоанатом производит вырезку участков органов и тканей для гистологического исследования, определяет набор оптимальных методов фиксации материала с учетом дополнительных методов исследования, назначает к выполнению лаборантом перечень окрасок срезов и числа срезов необходимых для осуществления патологогистологической диагностики. секционного, биопсийного и аутопсинного материала. Лаборанты показали, что необходимо писать на направлениях пациентов(гистологичесике номера, дату, описание) Порядок поступления биопсийного материала в патогистологическую лабораторию: Операционный материал в лабораторию поставляет курьер,который переносится в специальных контейнерах. Материал, предназначенный для гистологического исследования, должен иметь четкую маркировку и сопровождаться направлением. Материал от одного больного должен быть помещен в отдельную посуду. Этикетку из плотной, неразмокающей в воде бумаги прикрепляют к объекту. 2. Фиксацию производят в предоперационной, куда заранее доставляют 10 % нейтральный формалин. 3.Бланк направления на патогистологическое исследование заполняет и подписывает лечащий врач. При этом в направлении отражают такие клинические данные, как продолжительность заболевания, характер проведенного лечения, результаты предыдущих исследований, если они проводились. При наличии опухоли необходимо указать ее точную локализацию, темпы роста, размеры, консистенцию, отношение к окружающим тканям, наличие метастазов и других опухолевых узлов, специальное лечение и клинический диагноз. Если в направлении отсутствуют необходимые данные, заведующий патологоанатомическим отделением ставит об этом в известность заведующего того отделения, откуда была прислана биопсия, а при повторных случаях сообщает администрации. 5. При приеме материала в направление и журнал поступлений вписывают порядковый номер патогистологического исследования каждого объекта и время поступления материала, а также указывают характер биопсии — диагностическая, срочная, операционный материал, количество кусочков, методики окраски. 7. Ответственность за качество доставленного в лабораторию материала несет врач, назначивший данное исследование. Подсохший, загнивший, замороженный, нефиксированный материал не принимают в патогистологическое отделение и о таких фактах сообщают администрации лечебного учреждения. Сегодня мы продолжали обучаться работе на вырезке. Нам показали как раскладывать гистологические номерки на вырезанный материал. Я научилась запаковывать готовые касеты, которые в дальнейшем помещаем в специальную емкость с фармалином, где происходит фиксация. Учитывая необходимость фиксации взятых кусочков, рекомендуется иссекать объекты величиной не более 1,5x1,0x0,5 см или 1,0x0,5x0,3 см. Быстрой фиксации способствует, главным образом, небольшая толщина кусочка. Мелкие кусочки (пункционные биопсии) фиксируются значительно быстрее и дают возможность изготовить препарат в более ранние сроки. Сегодня я научилась производить описание гистологического препарата, а именно плаценты, под диктовку врача-патолоанатома..После регистрации из присланного на исследование объекта вырезали необходимое количество кусочков. Материал, полученный методом соскоба, в том числе при гинекологическом исследовании и других биопсиях исследуют целиком. Заключение подписывают патологоанатом и лаборант. Все заключения, основанные на данных срочных биопсий, чаще всего носят предварительный характер, поэтому должны быть подтверждены после заливки оставшегося операционного материала с изготовлением достаточного количества срезов, по результатам исследования которых дают окончательное заключение. Сегодня я познакомилась с комнатой для заливки.Узнала как выглядит аппарат для заливки, его суть и действие. Аппарат Leica Model G1160.Пропитанные парафином кусочки ткани аккуратно, с помощью пинцета, выкладывают в специальные металлические формочки на дно, и заливают расплавленным парафином. Парафин начинает застывать и сверху на блок выкладывается номерок этого кусочка, который был прикреплен ранее. Затем вытаскиваем парафиновые блоки из металлических формочек и расставляем согласно нумерации Сегодня я практиковалась на заливке материала в парафин. Я научлась извлекать парафиновый блок из формочек, затем раскладывать его в определенном числовом порядке на планшет, согласно веденному списку в лаборатории. Сегодня я ознакомилась с лабораторией, где производится окраска поставленного материала и нарезка парафиновых блоков на аппарате Accu-Cut SRM. Готовила предметные стекла: Предметные стекла, применяемые для получения гистологических препаратов, необходимо предварительно подготовить. Исключение составляют готовые к использованию и специально упакованные импортные предметные стекла. Предметные стекла моют в теплой мыльной воде или кипятят в 2 — 3 % растворе гидрокарбоната натрия, затем ополаскивают горячей водой и промывают в течение нескольких часов в проточной воде. Вымытые стекла протирают чистой хлопчатобумажной тканью и на несколько дней помещают в 96 % спирт. Обезжиренные стекла извлекают пинцетом из этой смеси, протирают чистой тканью и складывают в коробочку. Подписывала и нумеровала Ипортные предметные стекла. Записывала в журнал полученые результаты гистологических исследований. Иммуногистохимическая лаборатория. Здесь нас познакомили с аппартом ИГХ Bench Mark Ultra Ventana/ Иммуногистохимия — это метод, основанный на реакции антиген-антитело. Применяется главным образом: - в дифференциальной диагностике опухолей, определения источника метастаза, при неясном первичном очаге, оценке гормонального статуса опухоли, определения факторов прогноза опузолевого процесса - индетификация различных микроорганизмов - определение гормонов и их рецепторов Иммуногистохимическая лаборатория полностью оборудована и обеспечена реактивами. - Постановка ИГХ реакции с одношаговой системой визуализации (En Vision + Sistem – HRP Labelled Polimer Anti – rabbit) Определение HER-2/HEU – статуса 1.Депарафинирование: ксилол 1 - 5 мин ксилол 2 - 5 мин спирт 1 — 5 мин спирт 2 — 5 мин 2.Вода дистиллированная — 5 мин 3.Демаскировка — 40 мин (в цитратном буфере РН — 6) 4.Остужать 20 мин в цитратном буфере 5.Дистиллированная вода — 5 мин 6.Фофатный буфер - 5 мин 7.Первичные антитела — 30 мин 8.Фосфатный буфер — дважды по 5 мин 9.Вторичные антитела — 30 мин 10.Фосфатный буфер — дважды по 5 мин 11.Окрашивание ДАВ — 5 мин 12.Дистиллированная вода — 5 мин 13.Гематоксилин — 1 минута 14.Водопроводная вода — промыть и восстановить ядра клеток — до 15 мин 15.Спирты 1,2,3,4, - по 5 мин 16.Ксилолы 1,2,3 — по 5 мин 17. Заключение в полистерол Подготовка материала для исследования Для получения достоверных результатов необходима стандартизация этапов пробоподготовки: тип образца, время от взятия образца до фиксации, тип фиксации, время фиксации, хранение готовых блоков и срезов. -Материал исследуется до проведения предоперационного лечения (лучевая терапия, лекарственное лечение) - Для исследования используется операционный или биопсинный материал. - Толщина образца не более 1 см - Фиксация должна быть проведена не более, чем через 1 час после получения образца. - Материал должен фиксироваться исключительно в 10% растворенейтрального забуференного формалина. - Оптимальное время фиксации для операционного материала — 24ч, биопсийного — 6-8ч - Парафиновые блоки хранятся неопределенно долгое время при комнатной температуре без потери качества материала Гистологическая проводка в лаборатории, возможный вариант: -формалин 1-2ч -формалин 2-2ч30 мин -спирт 70% - 2ч 30 мин -спирт 1 80% - 2ч 30 мин -спирт 2 80% - 2ч -спирт 1 96,5% - 2ч -спирт 2 96,5% - 2 ч -ксилол 1 - 1ч 30 мин -ксилол 2 — 1 ч 30 мин -парафин 1 — 1ч 30 мин -парафин 2 — 2ч -парафин 3-2ч После проводки материал заливают в парафин, и затем готовятся срезы 4-5 мкм. Срезы монтируются на специальные высокоадгезивные стекла. Срезы высушиваютсяв течение 18 ч при температуре 37 С В лаборатории применяют сложные фиксаторы Жидкость Буэна Жидкость Буена хорошо фиксирует все ткани, кроме тканей почки, не приводит к значительному сжатию и деформации рыхлых тканей и поэтому часто используется в экспериментальных и эмбриологических исследованиях. Фиксатор готовится ex tempore из насыщенного (1,2%) водного раствора пикриновой кислоты, концентрированного формальдегида (40%) и ледяной уксусной кислоты в соотношении 15:5:1. Продолжительность фиксации около 24 ч при комнатной температуре. Жидкость Карнуа Эта фиксирующая жидкость хорошо сохраняет структуру ядра клетки и часто применяется при необходимости быстрой фиксации и ускоренной проводки. Фиксатор готовится не более, чем за 1 час до начала фиксации. Состоит фиксатор из абсолютного спирта, хлороформа и ледяной уксусной кислоты в соотношениях: 6:3:1. При фиксации в жидкости Карнуа кусочки следует вырезать толщиной не более 4 мм. Продолжительность фиксации составляет 3 - 4 часа. Сегодня я вела документацию. Заносила данные пациента с направления на гистологический анализ в журнал. Подписывала и нумеровала импортные предметные стекла. Сегодня я наблюдала нарезку парафиновых блоков. Микротомы позволяют получить гистологические срезы различной толщины. По принципу действия различают санные, ротационные, замораживающие (криотомы), вибротомы В рутинной гистологической практике используются санные и ротационные микротомы.Приготовление парафиновых срезов: Парафиновый блок зажимают в объектодержатель Установив нужный угол наклона ножа (оптимальный 13- 15 градусов) в зависимости от характера ткани, медленно подводят микротомный нож к блоку и приступают в резанию материала Срезы с поверхности ножа осторожно снимаются мягкой кисточкой и расправляют на водяной бане. Затем переносят на предметное стекло Сегодня я выполняла работы с архивным материалом. Срок хранения парафиновых блоков в лаборатории — 10 лет. Работала с документацией. Хранение, порядок выдачи и уничтожения архивного гистологического материала Гистологический архив формируют из микропрепаратов, блоков внутренних органов и тканей (при парафиновой заливке). Гистологические препараты хранят в течение трех лет. В случаях порчи гистологического архива или его непригодности к дальнейшему хранению составляют соответствующий акт. Объекты на блоках, залитые в целлоидин, а также оставшиеся после замораживания кусочки сохраняют до окончания экспертного исследования. Объекты, залитые в парафин, после снятия с блоков сохраняют в течение трех лет. Влажный архив кусочков внутренних органов и тканей хранят в 10% растворе формалина в течение одного года. Сохранность влажного архива обеспечивает заведующий отделом судебно-медицинской экспертизы трупов, городским, районным и межрайонным отделением судебно-медицинской экспертизы. Врачи - судебно-медицинские эксперты городских, районных и межрайонных отделений судебно-медицинской экспертизы, на базе которых функционируют судебно-гистологические отделения, обеспечивают сохранность кусочков, блоков и изготовленных из них гистологических препаратов в пределах сроков, предусмотренных п. п. 5.4.2 - 5.4.4 настоящей инструкции. Выдачу архивного материала до истечения сроков их хранения производят по письменному требованию правоохранительного органа, назначившего экспертное исследование, либо руководителя бюро судебно-медицинской экспертизы, его заместителя или руководителя соответствующего структурного подразделения, о чем делают запись в журнале. Материал выдают в упакованном и опечатанном виде с сопроводительным письмом. |
Оценка дневника по производственной практике:________________________
Оценка по производственной практике:________________________
Непосредственный руководитель:________________________________
Дата_________________________ подпись_______________________
Методический руководитель:________________________________
Дата_________________________ подпись_______________________