(Методические рекомендации для слушателей системы переподготовки и повышения квалификации специалистов)
п. Быково Московской области
2003 г.
Методические рекомендации подготовили: кандидат биологических наук, доцент Т.Е.Тарадайник, доктор биологических наук, профессор А.М.Гавриков, доктор биологических наук, профессор В.И.Лебедев, кандидат с.-х. наук, доцент М.И.Юрин
Рецензент: В.П.Белоножкин - кандидат биологических наук, доцент
Ответственный за выпуск - М.Б.Нестеров, зав. отделом ВТ и ТСО
Методические рекомендации рассмотрены и утверждены на Ученом Совете ФГОУ РАМЖ, протокол ______от____________2003 г.
Разрешение на эксплуатацию пункта искусственного осеменения дает представитель племинспекции на основе заключения специальной комиссии в составе представителя племпредприятия (станции), главного ветврача, главного зоотехника хозяйства и заведующего фермой.
Посторонним лицам входить на территорию пункта искусственного осеменения запрещается. При входе на всю ширину дверного проема и длину не менее 1,2 метра оборудуют дезковрик, увлажненный 2 %- ным раствором едкого натра. Материалом для дезковрика могут служить опилки или поролон под сеткой.
Один раз в неделю на пункте проводят санитарный день.
Стены пункта должны быть покрыты масляной краской, глазурованной плиткой или пластиком, чтобы их легче было мыть и дезинфицировать.
Ежедневно после окончания работы проводят влажную уборку помещения. Если пункт оборудован станком для осеменения, то последний подвергают механической очистке и моют 2-3%-ным горячим (70С) раствором натрия бикарбоната. Таким же раствором один раз в неделю моют рабочий стол, полы и стены пункта.
Побелку потолка и стен проводят по мере загрязнения раствором свежегашеной извести.
Систематически проводят дезинфекцию помещения дезосредствами, не имеющими запаха, например, горячими (70 С) растворами: 1-2%-ным едким натром, 1,5-2%-ной каустифицированной содопоташной смесью и т.п.
Для уничтожения мух используют липучки, ловушки, электроустройства, аэрозольные препараты, специально предназначенные для применения на пунктах искусственного осеменения.
Окна в помещении должны быть занавешаны не пропускающими прямые солнечные лучи светлыми шторами, форточки в летний период закрывают мелкоячеистой сеткой.
Согласно ОСТу 10 286-2001, оператор при выполнении работ по искусственному осеменению должен иметь два хлопчатобумажных костюма, два колпака (косынки), две пары нательного белья, два фартука из армированной пленки, сапоги резиновые или ботинки. При работе с жидким азотом оператору необходимо дополнительно иметь перчатки и защитные очки.
Спецодежду следует использовать только на пункте и при работе на ферме. Костюмы (халаты), колпаки (косынки) стирают не реже одного раза в неделю. Резиновые сапоги и фартуки моют теплой водой и обеззараживают 2%-ным раствором каустической соды.
Для предупреждения распространения заразных болезней оператор обязан выполнять следующие правила:
- до и после осеменения или обследования каждой коровы тщательно мыть руки с мылом, а затем обрабатывать их ватным тампоном, смоченным 70-ным этиловым спиртом;
- работать в специально предназначенных для осеменения перчатках (на каждое животное - перчатка);
- для осеменения использовать стерильные инструменты;
- использованные перчатки, пипетки, чехлы и т.п. складировать в специально отведенный контейнер для последующей утилизации;
- мыть и дезинфицировать сапоги и фартуки после работы и перед выездом на каждую ферму;
- при переезде с фермы на ферму оператор может перевозить с собой только сосуд Дьюара со спермой в жидком азоте. Инструменты и материалы для осеменения должны быть на каждом пункте.
- в случае поступления на пункт животного, подозрительного по заразному заболеванию, осеменение на пункте прекратить до уточнения и установления причин.
Стерилизовать инструменты и материалы следует одним из следующих способов: кипячение, сухой жар, фламбирование (обжигание некоптящим пламенем), автоклавирование, обработка химическими средствами, облучение ультрафиолетовыми лучами.
Кипячением стерилизуют стеклянные шприцы, металлические инструменты. Для этого тщательно промытые шприцы разбирают, цилиндр оборачивают бинтом и прикрепляют к нему поршень. Инструменты помещают в стерилизатор, заливают на 2\3 объема дистиллированной водой, закрывают крышкой, доводят до кипения и кипятят в течение 20 минут. Не снимая крышки, дают остыть. Только после этого инструменты извлекают стерильным пинцетом; в шприцы вставляют поршни, заворачивают их в стерильные салфетки и помещают в шкаф. Остатки воды с инструментов удаляют стерильными салфетками. Канал шприца освобождают от остатков воды стерильным 0,9%-ным раствором хлорида натрия, 1%-ным раствором бикарбоната натрия или 2,9%-ным раствором цитрата натрия. Влагалищные зеркала стерилизуют отдельно от посуды и инструментов.
Сухим жаром стерилизуют стеклянные инструменты, вату и марлю. Стерилизацию проводят в сушильном шкафу при 160 С в течение одного часа тридцати минут или при 180С в течение часа. Отсчет срока стерилизации начинают, когда температура в шкафу достигнет нужного уровня. Перед началом стерилизации следует обернуть инструменты пергаментной бумагой или фольгой. Так же поступают с ватой и марлевыми салфетками. Чистые сухие колбы, флаконы и т. п. накрывают фольгой или пергаментной бумагой, которую закрепляют нитками. Окончив стерилизацию, шкаф выключают, но открывают только после остывания до 50-60 С.
Фламбирование применяют для стерилизации металлических инструментов, но в том случае, когда нет возможности простерилизовать их другими способами или при необходимости быстрого обеззараживания, поскольку металлические инструменты, особенно режущие, от этого портятся. Для обжигания можно пользоваться газовой плитой, примусом, спиртовкой или тампоном, смоченным 96-ным спиртом.
Автоклавирование используют для стерилизации инструментов из полимерных материалов, растворов, хлопчатобумажной спецодежды, салфеток, полотенец и т.п. Проводят стерилизацию в автоклавах, согласно прилагаемым к ним инструкциям.
Полимерные шприцы для осеменения спермой в облицованных гранулах моют и стерилизуют для повторного (до 10 раз) использования путем их погружения в 0,5%-ный раствор хлорамина Б на 24 часа или облучением с помощью бактерицидных ламп в течение 40 минут на расстоянии 20 см от источника ультрафиолетовых лучей.
Использованные предметные и покровные стекла моют в теплой воде и протирают стерильной марлевой салфеткой.
Стерильные инструменты хранят в застекленных шкафах или в настольном ящике-витрине, оборудованном бактерицидной и электрической лампами. Нельзя хранить инструменты на столе под марлей: это не защищает от микробного загрязнения.
Растворы хлорида натрия, цитрата натрия и бикарбоната натрия готовят ежедневно. Для приготовления 0,9%-ного хлорида натрия берут мерный цилиндр или колбу на 100 мл, наливают туда 40 - 50 мл дистиллированной воды, вносят 0,9 г хлорида натрия и перемешивают до полного растворения. Затем, доливая дистиллированную воду, доводят количество раствора до 100 мл. Аналогично готовят растворы цитрата и бикарбоната натрия, используя при этом 2,9 г цитрата натрия и 1г бикарбоната натрия, соответственно. Полученные растворы подогревают до 90-95С, либо стерилизуют автоклавированием. Хранят в стерильных флаконах.
70 -ный раствор спирта готовят путем добавления к 73 мл 96-ного спирта-ректификата 27 мл дистиллированной воды. Правильность приготовления проверяют спиртомером.
Для обработки наружных половых органов перед осеменением следует использовать раствор фурацилина, который готовят следующим образом: в 1 литре кипящей воды растворяют 10 г хлористого натрия и 0,2 г фурацилина, охлаждают и фильтруют. Хранят раствор фурацилина не более двух дней в бутылке из темного стекла или в затемненном месте.
Инструменты, предназначенные для использования на пастбище, после стерилизации оборачивают стерильными марлевыми салфетками, затем полиэтиленовой пленкой и укладывают в сумку. Еженедельно сумку моют горячим содовым раствором, прополаскивают горячей водой. При возвращении из неблагополучного хозяйства это делают немедленно в специально отведенном месте.
Дезинфекцию сосудов Дьюара с профилактической целью проводят один раз в год, согласно "Инструкции по дезинфекции криобиологических сельскохозяйственных сосудов", утвержденной Главным управлением ветеринарии МСХ СССР в 1983 г.
Сосуды Дьюара дезинфицируют на станциях или на пунктах искусственного осеменения, где они используются. Дезинфекцию проводят под контролем ветеринарной службы хозяйства.
Предварительно перегружают биологический материал в сменный сосуд, остатки азота сливают. Сосуд промывают небольшим количеством свежего жидкого азота, который также сливают. Слив жидкого азота производят на специально оборудованные бетонные площадки или емкости, изготовленные из алюминиевых сплавов, нержавеющей стали, латуни или меди, которые устанавливают вне помещения в огороженном месте, недоступном для посторонних людей и животных. Емкости с остатками азота должны быть прикрыты крышками, обеспечивающими свободный сброс образующихся паров азота.
После освобождения от жидкого азота сосуд Дьюара ставят на отогревание в течение 2 суток в помещение, куда доступ людям запрещен. Затем сосуд моют горячей водой (допускается применение моющего средства ОП-7) с температурой не выше 70 С.
Дезинфекцию проводят 4%-ным раствором перекиси водорода, который готовят перед применением. Для приготовления раствора используют водопроводную воду.
Препарат перекиси водорода (H2O2) ГОСТ 177-71 (пергидроль) содержит 27,5 - 40% перекиси водорода. Расчет необходимого количества препарата для приготовления рабочего раствора проводят по формуле:
X = А х В: С, где
Х - необходимое количество препарата (л)
А - концентрация рабочего раствора (%)
В - необходимое количество рабочего раствора (л)
С - содержимое перекиси водорода в препарате (%)
Для приготовления рабочего раствора препарата в рабочую емкость из стекла, полиэтилена или алюминиевых сплавов к половинному от необходимого раствора количеству воды добавляют препарат, после чего доливают воду до необходимого объема и перемешивают раствор в течение 1 - 2 минут.
Дезинфицирующий раствор наливают в каждый сосуд Дьюара емкостью 5 - 30 литров; в сосуды емкостью 50 литров дезраствор наносят на внутреннюю поверхность мелкокапельным распылением с помощью форсунки. Расход дезраствора 1 л \ кв.м, экспозиция 1 час.
Ускоренные режимы влажной дезинфекции (экспозиция 15 минут) могут быть применены при использовании 4%-ного раствора перекиси водорода, подкисленного 0,2%-ной молочной кислотой.
Канистры погружают в отдельную емкость с дезраствором.
По истечении заданной экспозиции дезраствор сливают. Затем сосуд двукратно промывают кипяченой водой с температурой не выше 70 С и обсушивают.
При проведении дезинфекции следует соблюдать санитарные правила и правила по технике безопасности. Лиц, выполняющих эту работу, обеспечивают спецодеждой: комбинезонами, халатами, головными уборами, обувью, резиновыми перчатками, защитными очками или маской и
class=WordSection2>з
class=WordSection3>оргстекла.
Запрещается курить и принимать пищу во время работы.
После окончания работы лицо и руки следует вымыть теплой водой с мылом.