Определение группы крови по Цоликлону




СТАНЦИИ

Объективного структурированного клинического экзамена

По хирургии

 

 

Утверждено на заседании кафедры

Протокол №___ от «___»_____________2014 г.

Зав.кафедрой ____________акад. М.А. Алиев

 

 

Алматы,2014

Группа крови (фенотип) наследуется по законам генетики и определяется набором генов (генотипом), получаемых с материнской и отцовской хромосомой. Человек может иметь только те антигены крови, которые имеются у его родителей. Наследование групп крови по системе АВО определяется тремя генами — А, В и О. В каждой хромосоме может быть только один ген, поэтому ребенок получает от родителей только два гена (один от матери, другой от отца), которые и вызывают появление в эритроцитах двух антигенов системы АВО. Антигены крови появляются на 2—3-м месяце внутриутробной жизни и к рождению ребенка хорошо определяются. Естественные антитела выявляются с 3-го месяца после рождения и к 5—10 годам достигают максимального титра.

Цоликлоны предназначены для определения групп крови человека путем выявления в эритроцитах антигенов (агглютиногенов) системы АВО.

Цоликлоны представляют собой разведенную (реагенты приготовлены на солевом растворе хлорида натрия, что препятствует ложной агглютинации эритроцитов) асцитную жидкость мышей, носителей соответствующей гибридомы, в которой содержатся специфические иммуноглобулины, направленные против группоспецифических антигенов А и В человека.

Показания:

• кровопотеря более 20% объема циркулирующей крови;

• шок средней и тяжелой степени;

• выраженная анемия с гемоглобином ниже 80 г/л и гематокритом ниже 30%;

• тяжелые травматичные операции;

• тяжелые интоксикации и гнойно-воспалительные заболевания;

• болезни крови.

Противопоказания:

• декомпенсация сердечной деятельности;

• отек легких;

• септический эндокардит;

• гипертоническая болезнь III стадии;

• нарушение мозгового кровообращения;

• тромбоэмболическая болезнь;

• острый гломерулонефрит;

• тяжелая печеночно-почечная недостаточность;

• общий амилоидоз;

• диссеминированный туберкулез легких;

• аллергическое состояние;

• бронхиальная астма.

.

Методика определения практических навыков

Европейский стандарт обработки рук, EN – 1500.

Последовательность движений

 

1. Знать методику обработки рук;

2. Определение уровня знаний (свойства цоликлональных сывороток);

3. Определение уровня понимание (обоснованный поход к этапам определения группы крови);

4. Определение уровня применение (правильное, последовательное выполнение определения группы крови);

5. Определение уровня клинического мышления (обосновать результаты исследования).

 

Этапыобъективного структурированного клинического

Экзамена по хирургии

Определение группы крови по Цоликлону

I–этап Свойства цоликлональных сывороток
IV - этап Описание определения группы крови
II- этап Подготовка материала к исследованию
V - этап Описание результата исследования  
III этап Подготовка к проведению определению группы крови

 

 


I этап - Свойства цоликлональных сывороток

Описание этапа Техника проведения
1. Цоликлоны анти-А и анти-Вявляются продуктом гибридомных клеточных линий, полученных в результате слияния мышиных антителообразующих В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы. Индивидуальные гибридомные линии продуцируют гомогенные антитела только одного класса иммуноглобулинов, которые полностью идентичны по структуре и биологической активности. Антитела, продуцируемые клетками одного клона (потомство одной клетки), являются моноклональными.    
2. Культура клеток Культура клетокодной специфичности, происходящих из одного лимфоцита, образует клетки одного клона. Главное заключается в следующем: необходимо получить от одной клетки специфические антитела и наработать их в неограниченном количестве. Трудность заключается в преодолении двух задач: во-первых, нормальные клетки после нескольких делений погибают; во-вторых, только раковые клетки способны неограниченно размножаться. Для решения этих двух несовместимых проблем в 1975 году Г. Кёлер и К. Мильштейн создали клеточные гибриды, или гибридомы. Гибридомы— это слияние нормальных лимфоцитов в питательной среде с клетками миеломы. Лимфоциты в этой среде не погибают, а от миеломного партнера получают возможность бесконечно размножаться. Таким образом, гибридомный клан размножается, а в результате этого процесса образуются моноклональные антитела.
3. Выработка антител Лимфоциты, несущие агтлютиноген А, вырабатывают специфическое антитело анти-А; лимфоциты, несущие агтлютиноген В, вырабатывают специфическое антитело анти-В.
4. Состав Цоликлона     Моноклональные анти-А и анти-В антителапродуцируются двумя различными гибридомами. Цоликлоны анти-А и анти-В представляют собой разведенную асцитную жидкость мышей-носителей соответствующей гибридомы, в которой содержатся специфические иммуноглобулины класса М (IgM), направленные против группоспецифических антигенов А или В человека. Таким образом, цоликлоныне содержат антител иной специфичности и поэтому не вызывают неспецифической полиагглютинации эритроцитов.
5. Авидность Авидность, то есть времянаступления реакции агглютинациии ее выраженность, у цоликлонов анти-А и анти-В выше, чем у изогемагглютинирующих АВО-сывороток, особенно в случае слабо выраженных антигенов эритроцитов.  

 

IIэтап - Подготовка материала к исследованию

 

Описание этапа Техника проведения
  Врач одевает на руки стерильные перчатки, маску, очки
Забор крови у пациента проводиться двумя способами
2. Внутривенный забор крови
3. Забор крои из пальца  

 

IIIэтап - Подготовка к проведению определению группы крови

 

Техника проведения
1. Врач одевает на руки стерильные перчатки, маску, очки  
2. Получить кровь реципиента и донора.  
3.     Убедиться в пригодности цоликлонов, донорской крови
4. Материальное обеспечение: 1) цоликлон анти-А, В, АВ, Д СУПЕР; 2) исследуемая кровь; 3) маркированный планшет; 4) предметные стекла (стеклянные палочки); 5) пипетка для взятия крови; 6) перчатки; 7) часы; 8) регламентированный дезинфек-тант;

 

IVэтап – Подготовка к проведению определению группы крови

 

Описание этапа Техника проведения
1. На поверхность керамической пластинки нанесите по одной капле (0,1 мл) цоликлона анти - А, анти - В и анти - АВ.  
2. Рядом с каждой каплей реагента нанесите маленькую (0,05-0,01 мл) каплю исследуемой крови.  
3. Смешайте каплю цоликлона с каплей крови индивидуальной чистой стеклянной палочкой.  
  Реакция агглютинации развивается в течение первых 3 - 5 секунд при мягком покачивании пластинки.
  Результаты реакции учитываются через 2,5 - 3 минуты после смешивания капель.  

 

Vэтап - Описание результата исследования

1. Положительный результат типирования выражается в появлении агглютинации (склеивания) эритроцитов, которую можно наблюдать невооруженным глазом, поскольку капля быстро просветляется, а эритроциты образуют крупные, хорошо различимые ярко-алые агрегаты.
2. При отрицательном результате гемагглютинация не развивается, капля продолжает оставаться равномерно окрашенной в красный цвет, агрегаты в ней не обнаруживаются.
3. В случае положительной реакции агглютинации эритроцитов с обоими цоликлонами, т.е. установления группы крови АВ (IV), для исключения неспецифической агглютинации (аутоагглютинации, панагглютинации), необходимо провести контрольное исследование данного образца крови с изотоническим раствором хлорида натрия.
4. Для этого смешивают одну большую каплю (0,1 мл) изотонического раствора, с маленькой (0,01 мл) каплей исследуемой крови. При отсутствии агглютинации в этой контрольной капле кровь принадлежит к группе AB (IV).

Оценка результатов:

1.При отсутствии агглютинации с двумя цоликлонами группа крови 0(I) - первая.

2.При наличии агглютинации с цоликлоном анти-А группа крови А(II) - вторая.

3.При наличии агглютинации с цоликлоном анти-В группа крови В(III) - третья.

4.При наличии агглютинации с двумя цоликлонами группа крови АВ(IV) - четвертая, что должно быть подтверждено агглютинацией с цоликлоном анти-АВ и отсутствием неспецифической агглютинации с изотоническим раствором натрия хлорида.

 

Учет результатов реакции агглютинации представлен в таблице:

Итоговая оценка формируется из суммы оценок 5 этапов, за каждый этап - 100 баллов, согласно таблицы1-2.

Таблица 1 –Оценка уровня знаний по ОСКЭ

План
Цели Всего вопросов % Когнитивные уровни +%
Запоминание Понимание Применение
Свойства цоликлональ-ных сывороток   25%      
Подготовка материала к исследованию   10%      
Подготовка к проведе-ниюопределению группы крови   20%      
Подготовка к проведе-ниюопределению группы крови   25%      
Описание результата исследования   24%      
Всего          

 

Таблица 2 – Буквенно – балльно – рейтинговая оценка по дисциплине

Оценка по буквенной системе Цифровой эквивалент баллов Процентное содержание % Оценка по традиционной системе
А 4,0 95-100   ОТЛИЧНО
А- 3,67 90-94
В+ 3,33 85-89   ХОРОШО
В 3,0 80-84
В- 2,67 75-79
С+ 2,33 70-74   УДОВЛЕТВОРИТЕЛЬНО
С 2,0 65-69
С- 1,67 60-64
D+ 1,33 55-59
D 1,0 50-54
F   0-49 НЕУДОВЛЕТВОРИТЕЛЬНО

 



Поделиться:




Поиск по сайту

©2015-2024 poisk-ru.ru
Все права принадлежать их авторам. Данный сайт не претендует на авторства, а предоставляет бесплатное использование.
Дата создания страницы: 2017-11-19 Нарушение авторских прав и Нарушение персональных данных


Поиск по сайту: