СТАНЦИИ
Объективного структурированного клинического экзамена
По хирургии
Утверждено на заседании кафедры
Протокол №___ от «___»_____________2014 г.
Зав.кафедрой ____________акад. М.А. Алиев
Алматы,2014
Группа крови (фенотип) наследуется по законам генетики и определяется набором генов (генотипом), получаемых с материнской и отцовской хромосомой. Человек может иметь только те антигены крови, которые имеются у его родителей. Наследование групп крови по системе АВО определяется тремя генами — А, В и О. В каждой хромосоме может быть только один ген, поэтому ребенок получает от родителей только два гена (один от матери, другой от отца), которые и вызывают появление в эритроцитах двух антигенов системы АВО. Антигены крови появляются на 2—3-м месяце внутриутробной жизни и к рождению ребенка хорошо определяются. Естественные антитела выявляются с 3-го месяца после рождения и к 5—10 годам достигают максимального титра.
Цоликлоны предназначены для определения групп крови человека путем выявления в эритроцитах антигенов (агглютиногенов) системы АВО.
Цоликлоны представляют собой разведенную (реагенты приготовлены на солевом растворе хлорида натрия, что препятствует ложной агглютинации эритроцитов) асцитную жидкость мышей, носителей соответствующей гибридомы, в которой содержатся специфические иммуноглобулины, направленные против группоспецифических антигенов А и В человека.
Показания:
• кровопотеря более 20% объема циркулирующей крови;
• шок средней и тяжелой степени;
• выраженная анемия с гемоглобином ниже 80 г/л и гематокритом ниже 30%;
• тяжелые травматичные операции;
• тяжелые интоксикации и гнойно-воспалительные заболевания;
|
• болезни крови.
Противопоказания:
• декомпенсация сердечной деятельности;
• отек легких;
• септический эндокардит;
• гипертоническая болезнь III стадии;
• нарушение мозгового кровообращения;
• тромбоэмболическая болезнь;
• острый гломерулонефрит;
• тяжелая печеночно-почечная недостаточность;
• общий амилоидоз;
• диссеминированный туберкулез легких;
• аллергическое состояние;
• бронхиальная астма.
.
Методика определения практических навыков
Европейский стандарт обработки рук, EN – 1500.
Последовательность движений
1. Знать методику обработки рук;
2. Определение уровня знаний (свойства цоликлональных сывороток);
3. Определение уровня понимание (обоснованный поход к этапам определения группы крови);
4. Определение уровня применение (правильное, последовательное выполнение определения группы крови);
5. Определение уровня клинического мышления (обосновать результаты исследования).
Этапыобъективного структурированного клинического
Экзамена по хирургии
Определение группы крови по Цоликлону
I–этап Свойства цоликлональных сывороток |
IV - этап Описание определения группы крови |
II- этап Подготовка материала к исследованию |
V - этап Описание результата исследования |
III этап Подготовка к проведению определению группы крови |
I этап - Свойства цоликлональных сывороток
№ | Описание этапа | Техника проведения |
1. | Цоликлоны анти-А и анти-Вявляются продуктом гибридомных клеточных линий, полученных в результате слияния мышиных антителообразующих В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы. Индивидуальные гибридомные линии продуцируют гомогенные антитела только одного класса иммуноглобулинов, которые полностью идентичны по структуре и биологической активности. Антитела, продуцируемые клетками одного клона (потомство одной клетки), являются моноклональными. |
![]() |
2. | Культура клеток | Культура клетокодной специфичности, происходящих из одного лимфоцита, образует клетки одного клона. Главное заключается в следующем: необходимо получить от одной клетки специфические антитела и наработать их в неограниченном количестве. Трудность заключается в преодолении двух задач: во-первых, нормальные клетки после нескольких делений погибают; во-вторых, только раковые клетки способны неограниченно размножаться. Для решения этих двух несовместимых проблем в 1975 году Г. Кёлер и К. Мильштейн создали клеточные гибриды, или гибридомы. Гибридомы— это слияние нормальных лимфоцитов в питательной среде с клетками миеломы. Лимфоциты в этой среде не погибают, а от миеломного партнера получают возможность бесконечно размножаться. Таким образом, гибридомный клан размножается, а в результате этого процесса образуются моноклональные антитела. |
3. | Выработка антител | Лимфоциты, несущие агтлютиноген А, вырабатывают специфическое антитело анти-А; лимфоциты, несущие агтлютиноген В, вырабатывают специфическое антитело анти-В. |
4. | Состав Цоликлона | Моноклональные анти-А и анти-В антителапродуцируются двумя различными гибридомами. Цоликлоны анти-А и анти-В представляют собой разведенную асцитную жидкость мышей-носителей соответствующей гибридомы, в которой содержатся специфические иммуноглобулины класса М (IgM), направленные против группоспецифических антигенов А или В человека. Таким образом, цоликлоныне содержат антител иной специфичности и поэтому не вызывают неспецифической полиагглютинации эритроцитов. |
5. | Авидность | Авидность, то есть времянаступления реакции агглютинациии ее выраженность, у цоликлонов анти-А и анти-В выше, чем у изогемагглютинирующих АВО-сывороток, особенно в случае слабо выраженных антигенов эритроцитов. |
|
|
IIэтап - Подготовка материала к исследованию
№ | Описание этапа | Техника проведения |
Врач одевает на руки стерильные перчатки, маску, очки | ![]() | |
Забор крови у пациента проводиться двумя способами | ||
2. | Внутривенный забор крови | ![]() |
3. | Забор крои из пальца | ![]() |
IIIэтап - Подготовка к проведению определению группы крови
№ | Техника проведения | |
1. | Врач одевает на руки стерильные перчатки, маску, очки | ![]() |
2. | Получить кровь реципиента и донора. | |
3. | Убедиться в пригодности цоликлонов, донорской крови | |
4. | Материальное обеспечение: 1) цоликлон анти-А, В, АВ, Д СУПЕР; 2) исследуемая кровь; 3) маркированный планшет; 4) предметные стекла (стеклянные палочки); 5) пипетка для взятия крови; 6) перчатки; 7) часы; 8) регламентированный дезинфек-тант; | ![]() |
IVэтап – Подготовка к проведению определению группы крови
№ | Описание этапа | Техника проведения |
1. | На поверхность керамической пластинки нанесите по одной капле (0,1 мл) цоликлона анти - А, анти - В и анти - АВ. | ![]() |
2. | Рядом с каждой каплей реагента нанесите маленькую (0,05-0,01 мл) каплю исследуемой крови. | ![]() |
3. | Смешайте каплю цоликлона с каплей крови индивидуальной чистой стеклянной палочкой. | ![]() |
Реакция агглютинации развивается в течение первых 3 - 5 секунд при мягком покачивании пластинки. | ![]() | |
Результаты реакции учитываются через 2,5 - 3 минуты после смешивания капель. | ![]() |
Vэтап - Описание результата исследования
1. | Положительный результат типирования выражается в появлении агглютинации (склеивания) эритроцитов, которую можно наблюдать невооруженным глазом, поскольку капля быстро просветляется, а эритроциты образуют крупные, хорошо различимые ярко-алые агрегаты. |
2. | При отрицательном результате гемагглютинация не развивается, капля продолжает оставаться равномерно окрашенной в красный цвет, агрегаты в ней не обнаруживаются. |
3. | В случае положительной реакции агглютинации эритроцитов с обоими цоликлонами, т.е. установления группы крови АВ (IV), для исключения неспецифической агглютинации (аутоагглютинации, панагглютинации), необходимо провести контрольное исследование данного образца крови с изотоническим раствором хлорида натрия. |
4. | Для этого смешивают одну большую каплю (0,1 мл) изотонического раствора, с маленькой (0,01 мл) каплей исследуемой крови. При отсутствии агглютинации в этой контрольной капле кровь принадлежит к группе AB (IV). |
Оценка результатов:
1.При отсутствии агглютинации с двумя цоликлонами группа крови 0(I) - первая.
2.При наличии агглютинации с цоликлоном анти-А группа крови А(II) - вторая.
3.При наличии агглютинации с цоликлоном анти-В группа крови В(III) - третья.
4.При наличии агглютинации с двумя цоликлонами группа крови АВ(IV) - четвертая, что должно быть подтверждено агглютинацией с цоликлоном анти-АВ и отсутствием неспецифической агглютинации с изотоническим раствором натрия хлорида.
Учет результатов реакции агглютинации представлен в таблице:
Итоговая оценка формируется из суммы оценок 5 этапов, за каждый этап - 100 баллов, согласно таблицы1-2.
Таблица 1 –Оценка уровня знаний по ОСКЭ
План | |||||
Цели | Всего вопросов | % | Когнитивные уровни +% | ||
Запоминание | Понимание | Применение | |||
Свойства цоликлональ-ных сывороток | 25% | ||||
Подготовка материала к исследованию | 10% | ||||
Подготовка к проведе-ниюопределению группы крови | 20% | ||||
Подготовка к проведе-ниюопределению группы крови | 25% | ||||
Описание результата исследования | 24% | ||||
Всего |
Таблица 2 – Буквенно – балльно – рейтинговая оценка по дисциплине
Оценка по буквенной системе | Цифровой эквивалент баллов | Процентное содержание % | Оценка по традиционной системе |
А | 4,0 | 95-100 | ОТЛИЧНО |
А- | 3,67 | 90-94 | |
В+ | 3,33 | 85-89 | ХОРОШО |
В | 3,0 | 80-84 | |
В- | 2,67 | 75-79 | |
С+ | 2,33 | 70-74 | УДОВЛЕТВОРИТЕЛЬНО |
С | 2,0 | 65-69 | |
С- | 1,67 | 60-64 | |
D+ | 1,33 | 55-59 | |
D | 1,0 | 50-54 | |
F | 0-49 | НЕУДОВЛЕТВОРИТЕЛЬНО |