Лабораторная работа. Диагностика. Профилактика и меры борьбы при Алеутской болезни норок
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
Направление подготовки (специальность)
36.05.01 Ветеринария
для студентов факультета биотехнологий и ветеринарной медицины
УФА 2018
УДК 619: 616.9 ББК 48 Э 71
Рассмотрена и одобрена на заседании методической комиссии факультета биотехнологии и ветеринарной медицины от 29 марта 2018 г. (протокол № 9)
Составители:
профессор кафедры инфекционных
болезней, зоогигиены и ветсанэкспертизы,
д-р. ветеринар. наук А.И. Иванов
Рецензент:
зав. кафедры морфологии,
патологии, фармации и незаразных болезней,
д-р. ветеринар. наук, профессор Е.Н. Сковородин
Ответственный за выпуск:
зав. кафедрой инфекционных
болезней, зоогигиены и ветсанэкспертизы
др. биол. наук, профессор А.В. Андреева
г. Уфа, БГАУ, кафедра инфекционных болезней,
зоогигиены и ветсанэкспертизы
Лабораторная работа. Диагностика. Профилактика и меры борьбы при Алеутской болезни норок
Цель работы
Изучить методы диагностики, профилактики и меры борьбы при Алеутской болезни норок.
Материалы и оборудование
Биопрепараты, ветеринарное законодательство, таблицы, плакаты, наставления, инструкции.
Задание
1.Изучить методы диагностики. Составить схему дифференциальной диагностики при Алеутской болезни норок.
2.Изучить профилактику и меры борьбы при Алеутской болезни норок.
ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ
Алеутская болезнь норок (Morbus aleutica lulreolarum), вирусный плазмоцитоз - контагиозная вирусная болезнь, для которой чрезвычайно характерным является системная (распространенная) пролиферация плазматических клеток во многих органах (плазмоцитоз). Проявляется высоким подъемом уровня иммуноглобулина в крови, прогрессирующим исхуданием, кровотечениями из носа и рта, жаждой, гломерулонефритом и гепатитом.
|
Возбудитель - ДНК-содержащий вирус из семейства парвовирусов. Вирионы размером 20 - 25 нм. В организме животных вирус индуцирует образование специфических антител. Антигенной вариабельности и родства его с другими вирусами не установлено. Спектр патогенности ограничен норками и хорьками. Штаммы вируса различаются по вирулентности для определенных генотипов норок. Так, штамм Pullman патогенен для норок с геном алеутской окраски (аа), например сапфировых, и редко вызывает заболевание у норок других генотипов. Напротив, штамм Utah-I патогенен для тex и других норок. Некоторые штаммы занимают промежуточное положение. В СССР был
выделен и отселекционирован производственный и музейный штамм «П-1», высокопатогенный для норок всех генотипов.
Вирус культивируют в организме норок или в перевиваемой культуре клеток кошачьих почек для исследовательских целей и для промышленных (для получения днагностикума).
Вирус инактивируется при 80 0С через 30 мин. Он чувствителен к ультрафиолетовым лучам, настойке йода (0,5 %-ной), растворам глютарового и формалинового альдегида и едким щелочам (2 %-ные). Вирус устойчив к воздействию эфира, фреона, кислой рН. При 6 °С он не терял активность в течение 11 час.
ДИАГНОСТИКА
Диагноз устанавливают на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений и результатов лабораторных исследований.
|
Эпизоотологические данные. К алеутской болезни восприимчивы норки всех генотипов (пород), независимо от пола и возраста, и в некоторой степени хорьки. Вирус долго сохраняется (персистируется) в организме лисиц, песцов, соболей, кроликов, диких зверей, собак, кошек и других животных, не теряя во многих случаях патогенности для норок. Он может персистировать и в организме человека, не вызывая заболевания. Источник возбудителя инфекции - в первую очередь зараженные норки. Вирус находится во всех органах и тканях больного животного, экскретах, перитонеальной и околоплодной жидкости, в плаценте и тканях эмбрионов. Он связан с клеточными ядрами и различными органеллами цитоплазмы. Заражение происходит вертикально (от матери в утробе или во время родов и первых часов жизни) и горизонтально (при контакте) — орально, аэрогенно и через кожу (при покусах). Предполагается возможность трансмиссивной передачи возбудителя (через блох). В распространении болезни определенное значение имеют контаминированные вирусом клетки, сачки, рукавицы, корма. После скармливания в неблагополучных хозяйствах сырых или плохо проваренных тушек убойных норок заболеваемость резко увеличивается. Основная причина распространения болезни в благополучных хозяйствах — завоз зараженных норок, не выявленных при диагностике (недиагностируемая стадия болезни). Для алеутской болезни характерны стационарность эпизоотических очагов, наличие прямой зависимости между уровнем реагирующих на тот или иной диагностический тест и частотой резорбции эмбрионов у самок (пропустование), абортов, мертворождаемости, ранней гибели молодняка и т. д. На течение и исход болезни влияет генотип животного, а также сезон года и условия кормления. В осенне-зимний период гибель зверей ускоряется, так как больные норки вследствие замерзания воды в поилках не могут утолить жажду, обычно возникающую при данной болезни. Ухудшение кормления тоже увеличивает падеж и без того истощенных больных норок. В зависимости от давности эпизоотического очага формы проявления болезни могут быть разными. В свежем очаге преобладает прогрессирующая форма, в стационарном — непрогрессирующая, или инаппарантная (бессимптомная). В течение нескольких лет заболевание может охватить почти все поголовье. Максимальная пораженность (превалентность), обнаруженная в отдельных шедах при помощи серологических исследований, достигает 97%.
|
Течение и симптомы. Инкубационный период (включая и срок появления специфических антител в крови) длится 6—150 сут, но обычно 10—15 сут. Клинические признаки обнаруживают незадолго до смерти через 1—24 мес. после заражения. Характерные из них — прогрессирующее исхудание, периодическое кровотечение из носа и рта, анемичность слизистых оболочек, дегтеобразные фекалии, усиливающаяся жажда и кахексия. Иногда нарушается координация движений, отмечают парезы и параличи конечностей (особенно у молодняка). Смерть наступает от почечной недостаточности или вторичных инфекций (сальмонеллез, колибактериоз, псевдомоноз и др.). У самок, заразившихся до гона, нередко происходят впоследствии аборт, пропустование или утрата материнских качеств (типично для алеутской болезни). Следует иметь в виду, что не у всех больных норок клинические признаки развиваются в полном объеме. В. А. Берестов и В. А. Самсонов (1969) наблюдали кровотечения из ротовой полости у 20% больных, тогда как полидипсию и дегтеобразные фекалии — постоянно. У отдельных зараженных норок симптомы не выявляются на протяжении нескольких месяцев или лет (вплоть до 8), но показатели щенения самок в этих случаях бывают в среднем на 0,5—2,5 щенка ниже, чем у здоровых. Форма болезни определяется я значительной мере потреблением подсосными щенками молока инфицированных самок. Так, инаппарантная форма развивается обычно при наличии колостральных специфических антител, получаемых новорожденными щенками от инфицированных матерей одновременно с возбудителем или вскоре после его внедрения. Она характеризуется замедленным подъемом уровня специфических антител в крови щенков во время подсосного периода, резким его снижением после отъема и постепенным повышением е последующем, недоступностью для клинической (симптоматика), биохимической (йодно- агтлютинационный тест — ЙАТ) и иногда для серологической диагностики, невысокой летальностью в течение первого года после заражения, непостоянным наличием патологических изменений. Позднее эта форма не отличается от прогрессирующей. Прогрессирующую форму наблюдают преимущественно при горизонтальном заражении, не связанном с потреблением молока (колостральных антител) инфицированных матерей. Она характеризуется быстрым подъемом уровня специфических антител в организме щенков, значительной доступностью для биохимической и, тем более, серологической диагностики, характерными клиническими признаками, непродолжительным течением у норок с геном алеутской окраски, большой летальностью уже в течение первого года после заражения, типичными патологическими изменениями. Прогноз, как правило, неблагоприятный. Летальность зависит от формы болезни. При прогрессирующей форме более 50% норок погибает уже в течение первого года после заражения, при непрогрессирующей — в 2—3 раза меньше. На втором году летальность достигает 80%. Большинство инфицированных зверей погибают на 17—345-й день (иногда на 675-й), в среднем на 60—215-й. Титр специфических антител у павших норок составляет 9—12 log-2 и более. Необходимо подчеркнуть, что летальный исход опосредуется также и генотипом. Так, норки с геном аа погибают обычно через 3—5 мес. после заражения, тогда как другие могут жить еще несколько месяцев или лет.
Патологоанатомические изменения. При вскрытии павших норок обнаруживают характерные патологические изменения: истощение, увеличение лимфоузлов, селезенки, почек, печени. Селезенка довольно плотная, объем ее увеличен в 4—10 раз. Под капсулой почек находят тёмно-фиолетовые или темно-коричневые кровоизлияния, отчего почки приобретают пестрый вид — крапчатость. Увеличенные почки серо-желтого оттенка с наличием бледноокрашенных некротизированных очажков. При хроническом течении почки сморщены, поверхность их бугристая. Эти изменения соответствуют нефрозо-нефриту. Изменения печени не отличаются своеобразием. В желудке и на слизистой оболочке ротовой полости видны мелкие кровоточащие эрозии. У хорьков тоже находят спленомегалию и лимфаденопатию, но не так сильно выраженную, как у норок. Однако тимус гипертрофирован более резко. Патогистологические изменения проявляются, прежде всего, пролиферацией плазматических клеток в костном мозге, лимфоузлах, селезенке, печени, почках и других органах.
Разработано несколько видов серологических реакций: реакция имму-нофлуоресценции (РИФ), иммуноферментный анализ (ELISA), тимоловая проба, реакция йодной агглютинации, проба мочи на белок Бенс-Джонса, реакция иммуноэлектроосмофореза. В настоящее время для диагностики болезни широко применяют также ИФА и ПЦР. Реакция иммуноэлектроосмофореза (РИЭОФ) широко применяется и служит основнымметодом прижизненной диагностики алеутской болезни норок, так как отличается высокой специфичностью, позволяя выявлять до 98 % больных через 6... 15 дней после заражения. В норме содержание гамма-глобулинов в сыворотке крови у норок составляет 15 %, а у больных особей увеличивается до 35...55 %. Алеутскую болезнь следует дифференцировать от жировой дистрофии печени алиментарного происхождения и псевдомоноза. Алеутская болезнь сходна с жировой дистрофией печени алиментарного происхождения и с псевдомонозом, вызываемым Pseudomonas aeruginosa. От дистрофии печени алеутская болезнь отличается очаговостью заболевания, характерными изменениями почек, положительным результатом прижизненных и посмертных исследований крови при помощи РИЭОФ. При псевдомонозе заболевание возникает внезапно, быстро прогрессирует, кровотечения из носа и рта бывают более обильными и завершаются смертью в течение суток; при вскрытии павших норок находят характерную геморрагическую пневмонию.
ПРОФИЛАКТИКА И МЕРЫБОРЬБЫ
Мероприятия по профилактике и ликвидации АБ основаны на охране хозяйств от заноса возбудителя болезни, исследованиях сыворотки крови реакциейиммуноэлектроосмофореза (РИЭОФ), изоляции и убое зараженных норок, проведении хозяйственных и санитарных мероприятий.
Сведения о количестве положительно реагирующих животных, не имеющих клинических признаков и патологоанатомических изменений, отражают в ветеринарной отчетности только по форме № 1-вет А "Отчет о противоэпизоотических мероприятиях". Контроль за выполнением в хозяйствах мероприятий по профилактике и ликвидации АБ осуществляют государственные ветеринарные инспекторы районов (городов), главные государственные ветеринарные инспекторы областей, краев, республик. В благополучных хозяйствах профилактика АБ основывается на строгом соблюдении правил ввоза норок, выборочном и плановом исследовании проб сыворотки крови по РИЭОФ, выполнении общих ветеринарно-санитарных и хозяйственных мероприятий.
Ввоз норок в благополучные хозяйства допускается только из благополучных хозяйств после исследования сыворотки крови по РИЭОФ и получения отрицательного результата.
Завезенных норок содержат в профилактическом карантине 30 дней и исследуют по РИЭОФ. При отрицательном результате РИЭОФ всех клинически здоровых зверей переводят на ферму. В случае обнаружения животных с положительными серологическими реакциями срок карантинирования животных продлевают до их оздоровления.
С целью контроля эпизоотической обстановки в благополучном хозяйстве проводят исследование сыворотки крови подозрительных по заболеванию и павших норок, а также подлежащих продаже на племя.
Ветеринарный специалист, обслуживающий хозяйство, обязан при возникновении подозрения на заболевание норок АБ поставить об этом в известность главного ветеринарного врача района и принять меры к уточнению диагноза.
При подтверждении диагноза на АБ в хозяйстве (на ферме) в установленном порядке вводят ветеринарные ограничения и одновременно утверждают план оздоровительных мероприятий.
В неблагополучных хозяйствах мероприятия по ликвидации заболевания основываются на плановых и вынужденных исследованиях проб крови по РИЭОФ, изоляции и выбраковке животных, давших положительную реакцию, строгой регламентации перегруппировок зверей, проведении дезинфекционных работ.
Одновременно запрещают выставки норок, вывоз норок в благополучные хозяйства, скармливание всем видам зверей тушек убойных норок, норкового жира и остатков несъеденного корма.
В неблагополучном хозяйстве проводят плановые исследования крови на АБ в период комплектования основного стада, перед гоном, до отъема молодняка, у норок, подлежащих продаже, а также у самок без приплода (подозрительных по заболеванию), у всех павших и вынужденно убитых животных. Результаты исследований учитывают по каждому шеду. Внеплановые (внеочередные) исследования проводят в тех шедах, где установлен положительный результат РИЭОФ при исследовании подозрительных по заболеванию или павших и вынужденно убитых норок.
В период комплектования основного стада (сентябрь, октябрь) исследуют племенных взрослых норок, а затем ремонтный молодняк, полученный от отрицательно реагирующих матерей. Положительно реагирующих зверей содержат в изоляторе до созревания волосяного покрова, после чего убивают на шкурку. Щенков от положительно реагирующих матерей и из тех пометов, где зарегистрирован положительный результат РИЭОФ, выбраковывают из стада без исследования и затем убивают.
В исключительных случаях из-за большого количества реагирующих норок допускается по согласованию с главным ветеринарным врачом района в течение одного года ограничиться убоем только положительно реагирующих норок.
В отделениях и бригадах, где в осенний период процент положительно реагирующих превышает средний по форме, проводят дополнительное исследование порок основного стада и ремонтного молодняка до завершения сезона убоя (в ноябре - декабре).
В январе - феврале, не позднее 10 - 15 дней до начала гона, исследуют всех норок. Положительно реагирующих убивают и заменяют отрицательно реагирующим ремонтным поголовьем.
С момента завершения гона и до начала отъема молодняка обследуют все основное стадо. Исследование крови беременных самок завершают до середины апреля, лактирующих самок и самцов основного стада - до отъема молодняка. Положительно реагирующих особей изолируют (лактирующих самок вместе с приплодом) и передерживают до созревания волосяного покрова.
По результатам серологических исследований решают вопросы ввоза и вывоза норок, их перегруппировок внутри бригад, ферм и между хозяйствами в следующем порядке:
из благополучных - без ограничений;
из неблагополучных - перемещают отрицательно реагирующих зверей в шеды с аналогичной или худшей эпизоотической обстановкой по АБ, оцениваемой по проценту положительно реагирующих зверей;
положительно реагирующих и содержащихся вместе с ними в одной клетке норок перемещают только в изолятор или специально выделенную неблагополучную бригаду для передержки до периода убоя.
В ветеринарном свидетельстве в графе "Особые отметки" указывается, какой процент положительно реагирующих по РИЭОФ норок зарегистрирован на дату выдачи. Предназначенную для вывоза группу норок ставят в профилактический карантин на 30 дней, где проводят ежедневно клинический осмотр и однократное исследование по РИЭОФ. Отбор и исследование норок в хозяйстве продавца осуществляют в присутствии ветврача, обслуживающего хозяйство покупателя. Норок, завезенных из неблагополучного хозяйства, размещают в профилактическом карантине на 30 дней и исследуют по РИЭОФ. Серопозитивных особей убивают, а отрицательно реагирующих клинически здоровых норок содержат обособленно от фермского поголовья. С учетом результатов очередных плановых исследований норок рассаживают на бригаде или ферме, руководствуясь правилами перегруппировки зверей. Текущую и вынужденную дезинфекцию клеток проводят 4-процентным горячим раствором формалина или 2-процентным раствором глутаральдегида, а деревянные и неметаллические части шедов 2-процентным горячим раствором (70 - 80 °C) едкой щелочи или 4-процентиым раствором формалина. Перед этим вшедах проводят механическую очистку и обязательный вывоз навоза из-под клеток. Дезинфекцию при минусовой температуре воздуха можно проводить огнеметом только с разрешения пожарной службы. Халаты, рукавицы и предметы ухода дезинфицируют в пароформалиновой камере, автоклаве, а также в 4-процентном растворе формалина, 5-процентном растворе кальцинированной соды или в 2-процентном растворе едкой щелочи не реже 1 раза в неделю и после работ, связанных с массовой ловлей зверей (при вакцинациях, инъекциях витаминов и др.). Во время ловли зверей рукавицы сменяют на дезинфицированные при переходе из одного шеда в другой. Для этих целей в неблагополучном хозяйстве у каждого зверовода должно иметься по 2 - 3 пары рукавиц. После завершения убоя больных и подозрительных по заболеванию норок проводят дезинфекцию убойного пункта. Персонал, работающий на убойном пункте, а также на транспортировке и переработке тушек убойных зверей, обеспечивают специальной одеждой, выносить которую с территории убойного пункта строго запрещено.
Хозяйство считается благополучным по алеутской болезни после получения 3-кратнсго отрицательного результата плановых исследований сыворотки крови основного стада и ремонтного поголовья норок по РИЭОФ.
ВОПРОСЫДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ
1. Опишите особенности эпизоотического процесса болезни?
2. Каковы клиническая картина и патологоморфологические изменения при алеутской болезни норок?
3. В чем заключается лабораторная диагностика болезни?
4. На чем основываются профилактика и оздоровительные мероприятия при алеутской болезни норок?