1. Подготовить к проверке материалы по самоподготовке (письменные ответы на вопросы домашнего задания, лекции по теме занятия).
2.Сформулировать цель занятия.
3.Контроль исходного уровня знаний.
4. Выполнить самостоятельное решение тестовых заданий, ситуационных задач в соответствии с алгоритмом:
5. Выполнить практическую часть занятия (демонстрация практических навыков, см. п.6).
Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время.
Тестовый контроль
1. Какой лабораторный тест является ключевым для дифференцировки Mycobacteriumtuberculosis от прочих микобактерий?
А) гидролиз миколовой кислоты;
Б) образование пигмента на свету;
В) образование ниацина;
Г) окраска по Циль-Нильсену
2. Пути передачи туберкулеза:
а)аэрогенный
б) воздушно-пылевой
в) алиментарный
г) все перечисленные
3.Какие биологические свойства микобактерий туберкулеза обусловили особенности микроскопического, микробиологического исследования материала от больного?
А) кислотоустойчивость;
Б) щелочеустойчивость;
В) спиртоустойчивость;
Г)все перечисленные
4.Каким образом подготовить материал к бактериологическому исследованию, чтобы, минуя получение изолированных колоний, приступить сразу к накоплению чистой культуры?
А) обработать материал этиловым спиртом;
Б) обработать материал серной кислотой;
В) добавить ксилол;
Г) обработать щелочью
5.Какая из перечисленных сред является рекомендованной ВОЗ для выделения Mucobacteriumtuberculosis?
А) среда Петраньяни
б)среда Левенштейна-Йенсена;
В) КА;
Д) среда Финн – II
6.Какие из нижеуказанных положений верны применительно к проказе?
А)заболевание передается при контакте человека с больным животным;
Б) заболевание распознают выделением и определением биохимических свойств возбудителя;
В)характер клинических проявлений в значительной степени обусловлен уровнем развития клеточных иммунных реакций
Г) все перечисленное
7. Чем отличаются туберкулезные микобактерии от M.leprae:
А) кислотоустойчивостью;
Б) расположением в виде пачек сигарет, шаров;
В) спиртоустойчивостью
Г) отсутствием патогенности
8.Какой вид иммунитета при туберкулезе?
А) врожденный;
Б) антитоксический
В) стерильный;
Г) нестерильный
10. С какой целью применяется препарат БЦЖ:
А) специфическая терапия
Б) профилактика
В) для постановки внутрикожной пробы
Г) для определения инфицированности организма
Ситуационные задачи.
1. На приеме у врача пациент предъявляет жалобы на кашель с выделением слизисто-гнойной мокроты в течение 3-х недель, ухудшение аппетита, повышенную потливость
Вопросы:
1. Какое заболевание должен заподозрить врач?
2. Какие методы лабораторного исследования необходимо назначить?
3. Вид диагностического материала.
2. Ребенку 5 лет, при рождении привит вакциной БЦЖ. Оценить реакцию Манту: диаметр реакции на туберкулин через 72 часа - 15 мм. Инфильтрат хорошо очерчен, ярко-красного цвета, возвышается над поверхностью кожи. Диаметр инфильтрата год назад составлял 5 мм.
Вопросы:
1. Как оценить данную реакцию?
2. Дальнейшая тактика.
3. Ребенку 7 лет, реакции на пробу Манту нет – отсутствие инфильтрата и гиперемии.
Вопросы:
1. Как оценить данную реакцию?
2. Дальнейшая тактика.
4. Получены результаты пересева штамма М. tuberculosis в пробирки со средой Левенштейна–Йенсена содержащей критические концентрации противотуберкулезных препаратов:
изониазид (1 мкг/мл) - обнаружен рост М. tuberculosis более 20 КОЕ
рифампицин (40 мкг/мл) – рост более 20 КОЕ
этамбутол (2 мкг/мл) – отсутствие роста
стрептомицин (10 мкг/мл) - рост более 20 КОЕ
Вопросы:
1. Какое свойство М. tuberculosis изучалось
2. Интерпретируйте результат исследования
9.Учебно-материальное обеспечение:
9.1.Литература:
а) обязательная
1. Лекция
2. Методическая разработка
3. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. В 2-х томах /под ред. В.В. Зверева, М.Н. Бойченко.- М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010.- 448 с.: ил.
4. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: учебник для студентов мед.вузов / под ред. А.А. Воробьева. - 2-е изд.,исправ.и доп. - М.: Медицинское информационное агентство, 2006. - 704 с.
5. Руководство по организации и проведению практических занятий по медицинской микробиологии / под ред. О.В. Бухарина. Екатеринбург: УрО РАН, 2009. 399 с.
6. Руководство по медицинской вирусологии / Под ред. Д. К. Львова. — М., 2008.
7. Пособие к практическим занятиям по общей микробиологии, вирусологии и иммунологии для студентов медицинских вузов.Шаркова В.А. с соавт.Владивосток: ИПК МГУ им. адм. Г.И. Невельского, 2010. 144 с.
б) дополнительная
1.Атлас-руководство по микробиологии, иммунологии и вирусологии/ под ред. Академика РАМН, проф. А.А. Воробьева и проф. А.С. Быкова.- М.: МИА. – 2003, 2005. – 563с.
2. Поздеев Щ.К. Медицинская микробиология / Под ред. В.И.Покровского. М., 2008. С. 662.
3. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология/ Под ред. Л.В. Борисова, 2008.
4. Микробиология, вирусология иммунология/ под ред. В.Н. Царева.- М., 2009.
5.Шаркова В.А., Забелина Н.Р., Воропаева Н.М. с соавт. Учебно-методическое пособие к практическим занятиям по общей микробиологии, вирусологии и иммунологии для студентов медицинских вузов. Владивосток: Медицина ДВ, 2011. 179 с.
6.Оттен Т.Ф., Васильев А.В. Микобактериоз.- СПб: Медицинская пресса.- 2005.- 220 с.
7. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования (пол ред. Биргера М.О.). М., 1982. С. 303.
8. Медицинская микробиология. Под ред. Королюка А.М., Сбойчакова В.Б. СПб: ЭЛБИ-СПб, 2002. 266 с.
10. Социально-значимые инфекции: (в 2-х ч.) / В. В. Нечаев, А. К. Иванов, А. М. Пантелеев; М-во здравоохранения и социал. развития РФ, С.-Петерб. гос. мед.акад. им. И.И. Мечникова. - СПб.: Береста, 2011. Ч. 1:Моноинфекции: туберкулез, ВИЧ-инфекция и вирусные гепатиты. - 2011. - 439 с.: ил.
11. Методические рекомендации по проведению микробиологических исследований на туберкулез. Для бактериологических лабораторий уголовно-исполнительной системы Министер-ства юстиции Российской Федерации. Москва, 2004.
12. Голышевская В.И., Шульгина М.В. Учебное пособие «Культуральные методы диагностики туберкулеза». Учебное пособие. Москва, 2007.
6.
9.2.Программное обеспечение и Интернет-ресурсы
базы данных, информационно-справочные и поисковые системы:
1.Реферативная база данных Медицина ВИНИТИ. https://www2.viniti.ru/
2. Электронные каталоги библиотеки. https://lib.vgmu.ru/catalog/
3. Базаданныхкомпании EBSCO Publishing
Medline, Medline with Full Text, Health Source Nursing/Academic Edition, Health Source Consummer Edition, Green FILEhttps://web.ebscohost.com/
4. Электронная библиотека Российской национальной библиотеки: фонд авторефератов диссертаций. https://leb.nlr.ru/search/
5. ЭБС «Университетская библиотека online». https://www.biblioclub.ru/
6. ЭБС «Консультант студента». https://www.studmedlib.ru/
7. КонсультантПлюс.https://www.consultant.ru/
8. Тихоокеанский медицинский журнал – электронная версия. https://lib.vgmu.ru/journal/?name=pmj
9. Сводный каталог периодики и аналитики по медицине MedArt. https://ucm.sibtechcenter.ru/
10. Электронный каталог «Российская медицина». Библиографическая база данных Центральной научной медицинской библиотеки. https://www.scsml.rssi.ru/
11. Электронные учебники CD и DVD диски
12. www.cardiosite.ru
15.https://consilium-medicum.com/media/consilium/07_01/4.shtml
16. Интернет-библиотека IQlibon-line доступ: https://www.iqlib.ru/
17. Электронные книги по медицине on-line доступ:
https://www.medbook.net.ru
https://www.medtext.ru/pafiledb/index.php
https://www.medliter.ru/
https://www.knigafund.ru/
10.Материальное обеспечение:
а) наглядные пособия (таблицы, схемы, слайды)
б) приборы, аппараты, лабораторное оборудование,микроскопы
в) технические средства обучения (проектор,оверхет, компьютер и т.п.)
Оценивание уровня сформированности компетенций обучающихся проводится по балльно – рейтинговой системе.
Приложение 1
Характеристика микобактерий и родственных таксонов.
| Свойство микроорга- низмов | Микобактерии | Нокардии | Родококки | Коринебактерии |
| Морфология | Палочки | Мицелий, позднее фрагменти-рующийся на палочки и кокки; воздушный мицелий | Скудный мицелий, фрагменти-рующийся на палочки и кокки | Полиморфные палочки, часто коклюшко- и дубинообразные |
| Скорость роста, в днях | 2–40 | 1–5 | 1–3 | 1–2 |
| Кислотоус-тойчивость | Полная | Частичная | Частичная | Слабая |
| Степень окраски по Граму | Слабая | Сильная | Сильная | Сильная |
Приложение 2
Культуральные признаки комплекса M. tuberculosis
| Культуральные признаки | Комплекс M. tuberculosis |
| Скорость роста | Медленнорастущие - 3 недели и более |
| Пигментообразование | Цвет слоновой кости |
| Морфология колоний | R или S формы |
| Наличие кислотоустойчивости | Выраженная кислотоустойчивая окраска |
| Температура роста | Оптимальный рост при 35 — 370С |
Тесты для дифференциации микобактерий комплекса M. tuberculosis
| Тесты для дифференциации | Микобактерии | |
| M. tuberculosis | Нетуберкулезные медленнорастущие | |
| Основные биохимические тесты на наличие: | ||
| Никотиновой кислоты | + | —* |
| Нитратредуктазы | + | ± |
| Термостабильной каталазы | — | + |
| Рост на среде с натрием салициловокислым (1000 мкг/мл) | — | +/± |
| Дополнительные тесты: рост на средах, содержащих: | ||
| Паранитробензойную кислоту (500 мкг/мл) | — | + ** |
| Натрия хлорид 5% | — | +*** |
* — За исключением M.simae
** — За исключением M.gastri
*** — За исключением M.marinum, M.terrae
Приложение 3
Тесты для дифференциации отдельных видов микобактерий комплекса
Mycobacterium tuberculosis
| Тесты для дифференциации | Виды микобактерий комплекса M. tuberculosis | |||
| M. tuberculosis | M. bovis | M. africanum | M. microti | |
| Основные биохимические тесты на наличие: | ||||
| Никотиновой кислоты | + | — | +/ — | +/ — |
| Нитратредуктазы | + | — | — | — |
| Термостабильной каталазы | — | — | — | —/+ |
| Способности расти на среде с натрием салициловокислым (1000 мкг/мл) | — | — | — | — |
| Дополнительные тесты: рост на средах, содержащих: | ||||
| Пиразинамид | + | —/+ | + | + |
| Мочевину | +/ — | +/ — | + | +/ — |
| Твин 80 (гидролиз твина в течение 10 дней) | —/ + | —/+ | — | —/+ |
| Тиофен-2 карбоксиловую кислоту (2 мкг/мл) | + | — | +/ — | +/ — |
Приложение 4
Характеристика наиболее часто встречающихся в клиническом материале видов нетуберкулезных микобактерий.
| Виды микобактерий | Скорость роста | Пигментация колоний | Рост при температуре | Восстанов-ление нитратов | Деградация салицилата натрия | |
| 22ºС | 45ºС | |||||
| M. avium M. intracellulare | M | H | + | + | _ | _ |
| M. xenopi | M | C | - | + | - | - |
| M. kansasii | M | Ф | + | - | + | - |
| M. malmoense | M | H | + | - | - | - |
| M. scrofulaceum | M | C | + | - | + | - |
| M. gordonae | M | C | + | - | - | - |
| M. terraecomplex | M | H | + | - | + | - |
| M. fortuitum | Б | Н | + | - | + | + |
| M. chelonae | Б | Н | + | - | - | + |
| M. flavescens | Б | С | + | - | + | - |
Примечание: М-медленнорастущие, Б-быстрорастущие, С-скотохромогенные, Ф-фотохромогенные, Н-нехромогенные.
Схема 1.
Непигментированные медленнорастущие микобактерии
Экспозиция на свету
ФотохромогенныеНехромогенные
(желтый пигмент) (Гладкие, мелкие, куполообразные колонии)
M.kansasii Гидролиз Твина 80
M.marinum
M.simiae + -
M. asiaticum M. terrae complex M. avium complex
M.gastriM. haemophilum
M. malmoense
Схема 2.
Скотохромогенныемедленнорастущиемикобактерии
(желтыеилиоранжевые)
Восстановление нитратов
+ -
M.szulgai
M.flavescens Гидролиз Твина 80
M.thermoresistibile
- +
M.scrofulaceum M.gordonae
M.xenopi
Схема 3.
Непигментированныебыстрорастущиемикобактерии
Трехдневнаяарилсульфатаза
+ -
M.fotuitum complex M.smegmatis
M.agri
M.fallax
Усвоениежелеза M. porcinum
Восстановление нитратов M. pulveris
M. moriokaense
+ - M.tsukamurella
M.fortuitumM.chelonae
Схема 4.
Пигментированные быстрорастущие микобактерии
СкотохромогенныеФотохромогенные
Появление Позднее Невысокая Высокая
пигмента фотохромогеннаяфотохромогенная
одновременно активность активность
с ростом
M.flavescensM.smegmatisM.marinumM. vaccae
M.aurum M. parafortuitum M. neoaurum
M.phlei
M.thermoresistibilae
M. gadium
M.chubuense
M.gilvum
M.poriferae
M.komossense
M.sphagni
M.obuense
M. aichiense
M.tokaiense
M.austroafricanum
Приложение 5
Чувствительность микобактерий к противотуберкулезным препаратам определяется неспособностью штамма расти на среде с минимальной ингибирующей концентрацией препарата, задерживающей рост микобактерий при стандартных условиях постановки опыта. Чувствительными к данному препарату считаются те штаммы микобактерий, на которые этот препарат в критической концентрации оказывает бактерицидное или бактериостатическое действие.
Устойчивость (резистентность) определяется как снижение чувствительности до такой степени, что данный штамм микобактерий способен размножаться при воздействии на него препарата в критической или более высокой концентрации. Особое место занимают микобактерии, у которых обнаруживается лекарственная устойчивость к двум основным противотуберкулезным препаратам (изониазиду и рифампицину) – штаммы, обладающие лекарственной устойчивостью одновременно к изониазиду и рифампицину, независимо от наличия устойчивости к другим противотуберкулезным препаратам, обозначаются как штаммы с множественной лекарственной устойчивостью (или штаммы с МЛУ).
Критические концентрации противотуберкулезных препаратов
для определения лекарственной устойчивости методом абсолютных концентраций
на среде Левенштейна-Йенсена
| Название препарата | Концентрация в мкг/мл |
| Препараты I-го (основного) ряда: | |
| Стрептомицин | |
| Изониазид | |
| Рифампицин | |
| Этамбутол | |
| Препараты II-го (резервного) ряда*: | |
| Канамицин | |
| Капреомицин | |
| Офлоксацин | |
| ПАСК | |
| Пиразинамид | |
| Протионамид (этионамид) | |
| Циклосерин |
Примечание: Выделенные жирным шрифтом препараты составляют обязательный набор противотуберкулезных препаратов I ряда, к которым определяется лекарственная устойчивость.
* Критические концентрации препаратов II ряда носят рекомендательный характер.