Аналитические методики должны быть валидированы. Необходимо учитывать соответствие рабочих параметров (характеристик) методики целям конкретного анализа.
Валидации подлежат:
· Впервые разрабатываемые методики.
· Модификации ранее утвержденных аналитических методик, улучшающие производительность или расширяющие область применения исходной методики (например, возможность определения дополнительных соединений в образце).
· Утвержденные аналитические методики, которые на данный момент не соответствуют требованиям настоящего Руководства.
· Классификация испытаний
· Испытания – главные методы оценки соответствия по сертификации. Ключевой задачей испытаний является оценка продукции с помощью получения количественных и качественных характеристик.
· Различают следующие виды испытаний:
· Исследовательские испытания:
· испытания, проводимые для изучения определенных характеристик свойств объекта (СТБ 1218, ГОСТ 16504).
· Доводочные испытания:
· исследовательские испытания, проводимые при разработке продукции с целью оценки влияния вносимых в нее изменений для достижения заданных значений показателей ее качества (СТБ 1218, ГОСТ 16504).
· Стендовые испытания:
· испытания объекта, проводимые на испытательном оборудовании (СТБ 1218, ГОСТ 16504).
· Предварительные испытания:
· контрольные испытания опытных образцов и (или) опытных партий продукции, проводимые с целью определения возможности их предъявления на приемочные испытания (СТБ 1218, ГОСТ 16504).
· Приемочные испытания:
· контрольные испытания опытных образцов, опытных партий продукции или изделий единичного производства, проводимые соответственно с целью решения вопроса о целесообразности постановки этой продукции на производство и (или) использования по назначению (СТБ 1218, ГОСТ 16504).
· Сертификационные испытания:
· контрольные испытания продукции, проводимые с целью установления соответствия характеристик ее свойств национальным и (или) международным нормативным документам (СТБ 1218, ГОСТ 16504).
· Квалификационные испытания:
· контрольные испытания установочной серии или первой промышленной партии, проводимые с целью оценки готовности изготовителя к выпуску продукции данного типа в заданном объеме (СТБ 1218, ГОСТ 16504).
· Периодические испытания:
· контрольные испытания выпускаемой продукции, проводимые в объемах и в сроки, установленные нормативным документом, с целью контроля стабильности качества продукции и возможности продолжения ее выпуска (СТБ 1218, ГОСТ 16504).
· Типовые испытания:
· контрольные испытания выпускаемой продукции, проводимые с целью оценки эффективности и целесообразности вносимых изменений в конструкцию, рецептуру или технологический процесс (СТБ 1218, ГОСТ 16504).
· Подконтрольная эксплуатация:
· эксплуатация заданного числа изделий в соответствии с действующей эксплуатационной документацией, сопровождающаяся дополнительным контролем и учетом технического состояния изделий с целью получения более достоверной информации об изменении качества изделий данного типа в условиях эксплуатации.
· Эксплуатационные испытания:
· испытания объекта, проводимые при эксплуатации (СТБ 1218, ГОСТ 16504).
Принципы проведения валидации Применение системы менеджмента качества (СМК) для целей повышения эффективности деятельности предприятия независимо от того, будет она в последующем сертифицирована или нет, имеет более широкое значение в проблеме технического регулирования, нежели просто сертификация. Роль СМК в обеспечении качества и безопасности продукции обусловлена составом и характером входящих в эти системы элементов. Важнейшим принципом, положенным в основу требований стандарта ИСО 9001:2000, является процессный подход. Стандарт требует, чтобы организация определила все необходимые ей процессы менеджмента качества, включая их входы, выходы и взаимодействие. По отношению к процессам, определенным в самом стандарте, организация должна установить, а в ряде случаев и документировать процедуры их выполнения. Это обусловливает «прозрачность» системы, что очень важно с точки зрения установления доверия к ней со стороны всех заинтересованных сторон. Процессный подход является определенной альтернативой традиционному функциональному менеджменту предприятия. Он придает предприятию гибкость, мобильность и дает возможность гораздо более эффективно использовать имеющиеся ресурсы, что очень важно для обеспечения выживаемости предприятий в быстро меняющемся окружающем мире. Ряд положений стандарта ИСО 9001:2000 определяют механизм, который должен обеспечить уверенность в соответствии продукции всем установленным к ней требованиям, включая требования безопасности. Например, при определении требований к продукции организация независимо от того, установил ли это потребитель, должна определить все законодательные и другие обязательные требования, проанализировать свою способность выполнить их и только после этого принимать обязательства по их выполнению. При разработке или проектировании продукции организация должна применять верификацию и валидацию проекта и разработки, чтобы предоставить свидетельства возможности выполнения установленных, в том числе обязательных, требований. Продукция, закупаемая как сырье или комплектующие изделия для включения в поставляемую продукцию, должна приобретаться у поставщиков и затем верифицироваться. Используемое при производстве оборудование должно обеспечивать выполнение установленных требований, в том числе обязательных. Процессы производства, результаты которых нельзя проверить последующим контролем, должны подвергаться валидации. Необходимо вести мониторинг продукции, при этом все возникающие несоответствия следует анализировать, а их причины устранять корректирующими действиями с последующей оценкой результативности этих действий.
Валидационные характеристики и показатели точности. Специфичность, линейность, диапазон применения, предел обнаружения, предел количественного определения, чувствительность, правильность, повторяемость, промежуточная прецизионность, воспроизводимость, робастность. Организация экспериментальных исследований и обработка их результатов.
Характеристики (свойства) метода, как правило, должны быть установлены в процессе его разработки.
Специфический метод дает возможность определять анализируемое вещество в присутствии других веществ и/или примесей других веществ. При оценке специфичности устанавливают факторы, мешающие или влияющие на определение. При наличии таких факторов они должны быть указаны в НД на метод. Для оценки специфичности может быть использован метод добавок и стандартные образцы. При использовании метода добавок процент выявления не должен превышать +/- 10% от добавленного количества анализируемого вещества.
Линейность метода определяют, проводя анализ проб с различной концентрациейанализируемого вещества или образцов плацебо с внесенным веществом в диапазоне, предусмотренном методом контроля. По результатам анализа строят график вручную или с помощью машинной обработки, для построения графика отмечают на оси OX - ожидаемое количество анализируемого соединения; на оси ОУ - величину аналитического сигнала. Стандартное отклонение и доверительный интервал точки пересечения графика с осью ОУ и наклона линии регрессии могут быть вычислены, например, методом наименьших квадратов или с помощью машинной обработки с пакетом статистических программ для регрессионного анализа.Если метод является линейным лишь в определенном диапазоне, должна быть указана область линейности. Должны быть регламентированы требования к построению калибровочного графика. При последующей валидации должен быть установлен доверительный интервал для линии регрессии.
Чувствительность - это способность метода регистрировать минимальные изменения концентрации. Мерой чувствительности является наклон линии регрессии при определении линейности
Диапазон определяемых величин - это интервал между верхним и нижним значениями концентрации анализируемого вещества (включая эти значения), для которого продемонстрирована пригодность данной методики с точки зрения линейности, повторяемости, воспроизводимости и правильности в одной лаборатории.
Предел обнаружения характеризует минимальное количество вещества, которое может выявлять метод. Данная характеристика необходима для методов, предназначенных для испытания на чистоту или выявления остаточных количеств веществ, которые были использованы при получении препарата. Предел обнаружения может быть установлен с использованием визуальной или инструментальной оценки. При использовании инструментальной оценки предел обнаружения устанавливают расчетным путем - по соотношению аналитического сигнала анализируемой пробы и контрольного раствора.
Предел количественного определения характеризует минимальное количество вещества, которое может быть количественно определено. Данная характеристика необходима для методов определения примесей.Установление предела количественного определения может проводиться расчетным путем на основании величины стандартного отклонения и угла наклона графика при определении линейности.
Повторяемость характеризуется стандартным отклонением повторяемости. Стандартное отклонение определяют при многократном определении нескольких образцов. Многократное определение проводят при максимально одинаковых условиях, а именно в условиях повторяемости (получают независимые результаты), т.е. проводят несколько серий определений один за другим в одной лаборатории, с применением одного метода, на идентичных частях одной и той же пробы, одним и тем же оператором, на одном и том же комплекте (экземпляре) испытательного оборудования и средств измерения. Число образцов в каждом диапазоне должно быть одинаковым.Рассчитывают стандартное отклонение повторяемости и доверительный интервал разности двух результатов, полученных в условиях повторяемости
Определение внутрилабораторнойвоспроизводимости) Для определения внутрилабораторнойвоспроизводимости проводят определение показателя в образцах, в одной организации одним и тем же методом на идентичных частях одной и той же пробы в одной или нескольких лабораториях, меняя следующие факторы: - разные операторы; - различные комплекты (экземпляры) испытательного оборудования и средств измерения, предусмотренные в НД на метод.Воспроизводимость характеризуется стандартным отклонением вопроизводимости. Определение правильности Для нового метода с целью определения правильности применяют метод добавок. Анализируемое вещество и образцы плацебо с внесенным в них веществом, охватывающие заданный диапазон концентраций, исследуются в соответствии с методом. По результатам анализа строят график, для построения которого отмечается на оси ОХ - ожидаемое количество анализируемого соединения; на оси ОУ - измеренное количество анализируемого соединения. При отсутствии систематической ошибки измеренные значения должны лежать на прямой линии, проходящей через начало координат и имеющей наклон. Рассчитывают стандартное отклонение и доверительный интервал точки пересечения графика с осью ОУ и угол наклона графика. Для построения графика используют, как правило, метод наименьших квадратов, для расчета коэффициентов - регрессионный анализ.
Промежуточная прецизионность – прецизионность в промежуточныхусловиях, т.е. один и тот же метод, идентичные образцы, одна лаборатория,но изменяющиеся условия (разные операторы, разное время, оборудование,калибровка).Главным признаком объекта испытаний является то, что по результатам его испытаний принимается то или другое решение по этому объекту - о его годности или забраковании, о возможности предъявления на следующие испытания, о возможности серийного выпуска и другие.
Робастность — свойство статистического метода, характеризующее независимость влияния на результат исследования различного рода выбросов, устойчивости к помехам. Робастный метод — метод направленных на выявление выбросов, снижение их влияния или исключение их из выборки.Под робастностью в статистике понимают нечувствительность к различным отклонениям и неоднородностям в выборке, связанным с теми или иными, в общем случае неизвестными, причинами[1][2]. Это могут быть ошибки детектора, регистрирующего наблюдения, чьи-то добросовестные или намеренные попытки «подогнать» выборку до того, как она попадёт к статистику, ошибки оформления, вкравшиеся опечатки и многое другое.
Внутрилабораторный контроль точности результатов испытаний. Контроль с использованием контрольных нормативов. Контроль стабильности с использованием контрольных карт.
В соответствии с требованиями СТБ ИСО/МЭК 17025 лаборатория должна осуществлять внутренний контроль качества результатов испытаний. Без внутреннего контроля невозможно гарантировать качество технически сложных косвенных измерений (таких, как количественный химический анализ, измерения интегральных показателей объектов окружающей среды,показателей качества нефтепродуктов и т. д.), а также многих других объектов измерений.Внутренний контроль (контроль стабильности) связан с периодическим контролем показателей правильности и прецизионности (повторяемости, промежуточной прецизионности). Для проверки стабильности результатов, получаемых в лаборатории, предлагается использовать контрольные кapты Шухарта (ИСО 8258) и контрольные карты кумулятивных сумм (ISO/ТR 7871). В тех случаях, когда прецизионность и правильность имеют тренд или сдвиг, использование контрольной карты кумулятивных сумм более эффективно, чем карты Шухарта, в то время как при наличии внезапных изменений (скачков) использование карты кумулятивных сумм вместо контрольной карты Шухарта не дает никаких преимуществ. Поскольку возникновение тренда или сдвига наиболее вероятно в отношении правильности, а внезапные изменения (скачки) в отношении прецизионности, карта кумулятивных сумм рекомендуется для проверки правильности, а карта Шухарта – для проверки прецизионности. Контрольные карты представляют собой графики, на которых погоризонтальной оси откладывают порядковый номер подгруппы измерений, а по вертикальной – результаты измерений, обычно значения измеряемой величины для стандартного образца или другие рассчитанные по результатам измерений статистики (стандартное отклонение, размах, кумулятивные суммы и т. д.). На картах имеется центральная линия – обычно среднее значение измеряемой величины или статистики, определенное по результатам большого числа предшествующих измерений и предельные границы – границы регулирования, а также предупреждающие границы, выход результата за которые свидетельствует о нестабильности процесса измерений (рис. 2).Контроль стабильности результатов измерений обычно осуществляется с использованием стандартных образцов.Контрольная карта Шухарта для контроля за стабильностью прецизионности могут использоваться следующие виды контрольных карт Шухарта:
· стандартных отклонений S(S-карта);
· расхождений (размахов) (R-карта);
· текущих (скользящих) расхождений (Rск.-карта).
Оценка смещения
1. Скользящий размах,
2. Граница регулирования (3σ) = 0,199
Предупреждающая граница (2σ) = 0,133
Предупреждающая граница (2σ) = - 0,133
Граница регулирования (3σ) = - 0,199
Предупреждающая граница (2σ) = 0,188
Граница регулирования (3σ) = 0,245
Центральная линия = 0,075
Дата проведения анализа (номер подгруппы)
Для контроля за стабильностью правильности могут быть использованы следующие карты:
· средних арифметических (-карта);
· отклонений средних арифметических от эталонного значения(-карта);
· кумулятивная сумма (-карта).