Принципы микробиологической диагностики.

Вирус гепатита G.

Таксономическое положение вируса гепатита G остается невыясненным. Его условно относят к семейству Flaviviridae. Геном образован несегментированной молекулой +РНК. Нуклеокапсид образован по типу кубической симметрии. По набору Аг вирионов высказывают предположение о наличие, как минимум, 3 подтипов вирусов. Предположительно, вирус гепатита G является дефектным вирусом, и для его репродукции необходимо присутствие вируса гепатита С. Резервуар возбудителя – больные острым и хроническим гепатитом G и носители вируса гепатита G. Частота регистрации заболевания сравнительно невелика. В РФ частота выявления РНК вируса гепатита G колеблется от 2% в Москве до 8% в Якутии. В то же время в сыворотке крови доноров частота выявления РНК вируса гепатита G составила 1,4%. Чаще маркеры инфицирования вирусом гепатита G выявляют у лиц, получающих множественные переливания цельной крови или ее препараты, а также среди пациентов с трансплантатами. Особую группу риска составляют наркоманы (среди лиц, вводящих наркотики внутривенно, частота выявления РНК вируса гепатита G достигает 33-35%). Нарушения иммунного статуса способствует развитию длительного носительства вируса. Доказана возможность вертикального пути передачи вируса гепатита G от инфицированной матери к плоду. Гепатит G в большинстве случает протекает как микст-инфекция с вирусным гепатитом С, существенно не влияя на характер развития основного процесса. Принципы микробиологической диагностики. Маркеры репликации вируса – АТ (IgM) к Аг вируса гепатита G и вирусная РНК. Вирус-специфические IgM выявляют методом ИФА,начиная с 10-12-х суток после инфицирования; диагностические титры сохраняются в течение 1-2 мес. АТ класса IgG к Аг вируса гепатита Е появляются через месяц после перенесенного заболевания. РНК вируса выявляют в реакциях ПЦР и молекулярной гибридизации. РНК вируса можно выявлять с первых суток инфицирования; однако, в желтушном периоде обнаружить ее невозможно.

 

Эпидемический паротит, или «свинка», - острая инфекция с преимущественным поражением околоушных слюнных желез, часто сопровождающаяся эпидемическими вспышками. Возбудитель (вирус эпидемичекского паротита) выявили К.Джонсон и Р.Гудпасчер. Морфологически вирус сходен с прочими парамиксовирусами, содержит внутренний белок NP и поверхностные гликопротеины NH и F. Вирусы проявляют гемадсорбирующую, гемолитическую, нейраминидазную и симпластообразующую активность. Эпидемиология.

Основной резервуар вируса эпидемического паротита – больной человек, также известны случаи заболевания собак, заразившихся от хозяев. Возможно экспериментальное воспроизведение инфекции у приматов. Возбудитель передается воздушно-капельным путем. Заболевание регистрируют в течение всего года с увеличением заболеваемости в осеннее-зимние месяцы. Наиболее подвержены заболеванию дети в возрасте 5-10 лет, мальчики болеют чаще, чем девочки. Вирус эпидемического паротита чувствителен к действию высоких температур, инсоляции и дезинфектантов.

Антигенная структура.

Иммуногенные свойства проявляют белок NP (цитоплазматический S-Аг) и поверхностные NH – и F- гликопротеины. Антигенная структура стабильна; известен 1 серовар вируса эпидемического паротита.

Патогенез поражений.

Первоначально возбудитель размножается в эпителии носоглотки, затем проникает в кровоток и в период вирусемии проникает в различные органы – околоушные железы, яички, яичники, поджелудочную, щитовидную железы, головной мозг и другие органы.

Клинические проявления. Инкубационный период эпидемического паротита составляет 14-21 суток; типичная форма заболевания проявляется как одно- или двухсторонний паротит, сопровождающийся лихорадкой. Инфицирование слюнных желез происходит путем гематогенного распространения вируса (вирусемии), возникающего через 3-5 суток после проявления симптомов. Вирусемия приводит к диссеминированию вируса по всему организму; возможны серозные менингиты, эпидидимоорхиты (регистрируют у 20-35% мальчиков постнубератном периоде) и др. Выздоровление сопровождается развитием стойкой невосприимчивости к повторным заражениям.

Принципы микробиологической диагностики.

Применяют вирусологические и серологические методы. Материалы для исследования – слюна, СМЖ, пунктаты околоушных желез и моча. Возбудитель выделяют заражением 7-8-суточных куриных эмбрионов и культур клеток фибробластов кур. Идентификацию вируса эпидемического паротита проводят в РТГА (агглютинирует эритроциты кур, уток, морских свинок и собак), РН, РСК и РИФ. Сывороточные АТ определяют в парных сыворотках в РСК или РТГА.

Лечение и профилактика.

Средства специфической химиотерапии отсутствуют. Симптоматическое лечение оказывает благоприятный эффект. Для специфической профилактики применяют живые вакцины; иммунизацию проводят однократным подкожным введением. Для лечения и поздней профилактики используют специфический γ -глобулин, но он малоэффективен при лечении орхитов.

 

Вирус ветряной оспы и опоясывающий лишай.

Ветряная оспа – острое ин­фекционное заболевание, вызываемое ви­русом из семейства герпес-вирусов, пере­дающееся воздушно-капельным путем, ха­рактеризующееся лихорадкой, умеренно выраженной интоксикацией и распростра­ненной везикулезной сыпью.

Этиология: возбудитель – ДНК-овый вирус Varicella-Zoster (семейство Herpesviridae, 3-й тип).

Геном представлен молекулой ДНК, вирус имеет овальную форму, является одетым. Т.е имеет суперкапсид с гликопротеиновыми шипами- антигены.

Культуральные свойства. Заражают фибробласты человека и наблюдают за ЦПД с дальнейшей идентификацией и есть включеия симпласты.

Эпидемиология: Антропоноз не заразна для животных.

Болеют дети от 5 месяцев до 10 лет. Источник инфекции больной человек. Пути передачи воздушно-капельный, реже контактно-бытовой.

Патогенез входными воротами являются верхние дыхательные пути.

Разносится с кровотоком и поражается шиповатый слой эпидермиса. Появляется папулёзная сыпь появляется по всему телу, но в отличие от остальных инфекций может появится в волосистой части головы. Также на коже и на слизистых.

Клиника. Интоксикация. температура, зуд. В детстве болеют в основном.

Взрослые тяжело переносят заболевание, высыпания могут оставлять рубцы, что у ребенка встречается редко из-за растягивания кожи.

Формируется пожизненный иммунитет.

Диагностика.

Материал для исследования - кровь, СМЖ, элементы сыпи, носоглоточное отделяемое.

Вирусоскопический метод. Берут исследуемый материал, делают мазки, окрашивают по Романовскому-Гимзе, микроскопируют. Наблюдают синтиции.

Вирусологический метод заражают культуру клеток. С последующим цитопатичским действием. Наблюдается повышение иммуноглобулина джи.

Серологический метод парными сыворотками смотрят нарастание титра антител в острый период и в период реконвалесценции если нарастание титра антител происходит в 4 раза и более значит, что у человека ветряная оспа.

Лечение. Обрабатывают 1% бриллиантовым зеленым, марганцовкой. Стараются не срывать, не чесать, дабы не остались дефекты (рубцы).Даем противаллергические препараты, чтобы не было зуда и иммуномодуляторы

Профилактика вакцина есть против ветрянки, чтобы не заболеть. Вакцинируются особенно взрослые.

Неспецифическом накладывается карантин, изоляция, санитарно-гигиенические мероприятия.

 

Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом.

Вирус относится к семейству Bunyaviridae, рода Hantavirus. Это лихорадка, поражающая почки.

Вирус имеет сферическую форму. Геном представлен молекулой РНК, вирус голый (суперкапсид отсутствует).

Вирус не выдерживает высокие температуры, действие химических веществ.

Антигенные свойства вируса обусловлены наличием антигенов нуклео-капсидного белка и антигенов поверхностных гликопротеинов, вызывающих образование вируснейтрализующих антител.

ГЛПС - строгий природноочаговый зооноз. Резервуаром возбудителя служат мышевидные грызуны, между грызунами передается через клещей и блох. Пути передачи воздушно-капельный, алиментарный.

Входные ворота слизистые верхних дыхательных путей, через ЖКТ.

На дачных участках грызуны, бегая, выделяют возбудителей с мочой. При уборке поднимается пыль и человек вдыхает. Поэтому с целью профилактики рекомендуется проводить уборку в маске. Или же заражение происходит через пищу (алиментарный путь). Грызуны бегали в пищевых продуктах, затем человек употребил их, не помыв.

Клиника. Есть 4 стадии протекания заболевания. Лихорадочная, олигоурическая, полиурическая, стадия реконвалесценции.

Лихорадочная стадия характеризуется повышением температуры, головной болью, слабостью. Наблюдаются галлюцинации, бред, судороги.

Олигоурическая стадия наступает на 3-4 день. Происходит поражение почек, человек не мочится. Почки увеличивается в размерах, появляется боль в пояснице. Возможны кровоизлияния, связанные с нарушением целостности капсулы почек.

Полиурическая стадия на 8-13 день. Улучшение состояния организма, восстанавливается диурез, прекращается рвота, сон и аппетит становятся лучше.

Реконвалесценция. Выздоровление медленное, общая слабость уходит, восстанавливаются функции организма. Выздоровление длительное. Происходит постепенно. Может быть почечная недостаточность.

Заболевание опасно разрывом паренхимы почек, поэтому рекомендуется постельный режим без лишних движений, дабы не оказать давление на капсулы почек.

Диагностика. Материалом для исследования служит сыворотка крови.

Вирусологичекий метод. Заражение куриных эмбрионов, с последующей индикацией и идентификацией. заражение культуры клеток (появляется ЦПД) также с последующей идентификацией.

Серологический. Парные сыворотки для определения титра нарастания антител. ИФА, РИФ.

Молекулярно-генетический метод: ПЦР.

Лечение. Обязательно лечение в стационаре, используется симптоматическое лечение: болеутоляющие, препараты, направленные на восстановление почечной функции, капельницы, антибиотики.

Профилактика. Специфическая профилактика не разработана, неспец-контроль за численностью грызунов, санитарно-гигиенические мероприятия: личная гигиена, уборка в масках, обезопасить группу риска: лесники работники сельского хозяйства. Своевременное выявление и лечение больных.

 

ДЕРМАТОМИКОЗЫ

Род: Epidermophyton, Microsporum, Trichophyton.

Более распространенными яв-ся дерматомикозы- эпидермофития,трихофотия,фавус. Они развиваются после заражения грибами – дерматофитами.Они широко распространены в природе. Паразитирует на коже,волосах, в ногтях,реже во внутренних органах человека и животных. Наиболее распространенной яв-ся эпидермофития(воз-ль Epidermophyton floccosum).Поражаются кожа стоп, межпальцевые и крупные складки тела, ногти, никогда не поражаются волосы.

Трихофития или «стригующий лишай» (возб-ль Trichophyton tonsurans,T..rubrum)- поражаются волосы(с образованием плешин), ногти и верхние слои кожи. Больного беспокоит зуд.

При микроспории (возб-ли Microsporum ferrugineum, М. canis)-поражаются волосы,кожа,реж ногти,волосы обламываются и покрываются беловатыми чехлами.

При фавусе (возб-ль Тг. Schonleinii) – поражаются волосы,кожа головы(с выпадением волос),ногти. На коже головы образуются желтого цвета щитки,кот. сливаются корку, издающую нередко мышиный запах.

Свойства.Не относятся к диморфным грибам. В кератинизированных тканях образуют только гифы и артроспоры. На глюкозном агаре Сабуро при культивировании при 200С в течении 1-3 недель образует септированный мицелий со спиралями,артроспорами,хламидоспорами,макро- и микроконидиями. Виды различаются по пигментации и форме колоний. Дерматофиты образуют пушистые колонии с зеленовато- желтым,оранжевым пигментом.Они содержат эндотоксины. Антигенные свойства выражены слабо. Гликопротеиды клеточной стенки дерматофитов явл-ся аллергенами.

Лаборатор. Диагностика. Материал для исследования:соскобы с кожи и ногтей, пораженные волосы).Исследуемый материал помещают в каплю 10-20% раствора КОН на предметном стекле, закрывают покровным стеклом и микроскопируют. В кожных и ногтевых пластинках обнаруживаются ветвящиеся гифы или цепочки артроспор. Возб-ли микроспории образуют плотный чехол вокруг волоса из мозаично располагающихся спор;возб-ли трихофитии обр-ют параллельные ряды спор снаружи; При фавусе в волосе обнаруживают тонкие и широкие гифы, споры круглой формы, пузырьки воздуха.Идентификация дерматофитов основана на изучении культур,полученных на среде Сабуро по морфологич. Особенностям мицелия и спор. При ультрафиолетовом облучении пораженных волос наблюдается светло-зеленое свечение.

Проф-ка: Спец. Проф. отсутствует. Неспец. Проф. заключается в соблюдении правил личной гиены,стерилизации инструментов,эффективном лечении больных и уменьшении контактов с инфицированным материалом.

Лечение. Заключается в удалении инфицированных и омертвевших струткр эпителия(выщипывание,стрижка) и местной обработки головы противогрибковыми препаратами. Эффективны микозолоновая мазь, ундециновая кислоа, салициловая и бензойная мазь.

Грибы рода Candida входят в норм состав микрофлоры кожи, рот полости итд. При снижении иммунитета, при чрезмерном употреблении антибактериальных препаратов идет развитие молочницы, стоматит, кандидоз складок у тучных людей.

Candida albicans

Кандидоз-это антропонозный микоз, характеризующийся поражением слизистых оболочек и кожи. Возможно развитие висцерального кандидоза (все внутр органы- легкие, кишечник,ЖКТ). Кандиды не относятся к истинным диморфным грибам, т.к. в тканях можно выявить как дрожжевые клетки, так и гифы.

Морфология. Дрожжеподобные грибы. Дрожжевая форма- овальные или круглые клетки, бластоспоры. Мицелиальный форма- цепочки удлиненных клеток с трехслойной клеточной стенкой, образующими псевдомицелий.

Культуральные. на среду Сабуро, вырастают колонии s-формы «в виде капель майонеза»

Грибы рода Кандида явл нормальными обитателями ротовой полости, ЖКТ, встречаются на коже. Любые нарушения целостности слизистой или кожных покровов может приводить к развитию заболевания. Выделяют мочеполовой кандидоз-передается половым путем. (молочница, зуд, жжение, дискомфорт). Провоцирующий фактор- нерациональное употребление антибак препаратов.

Диагностика. Материал- мазок из пораженный участков (слизистые ротовой- желтоватые, творожистые).

1) Микроскопический. Мазок окр по Ром.-Гинзме, видят клетки округлой формы, также псевдомицелий.

2) Микологический. Материал на среду Сабуро, вырастают колонии s-формы «в виде капель майонеза», выделяют чистую культуру. Изучают бх св-ва.Ферментируют глюкозу, мальтозу обр кислоты и газа.

Лечение и профилактика. дифлюкам, пимофуцин, нистатин(таблетки), ламизил(акридерм), фклюконазол.

Спец.проф нет

Неспец.проф. личная гигиена, иключение случайных половых связей. Рац исп антибак препаратов

ТОКСОПЛАЗМОЗ.

Toxoplasma gondii.

Морфология. Гетероксеническое развитие, включая половое и бесполое размножение со сменой хозяев. Основной хозяин кошка. Промежуточный – млекопитающие, человек.

Бывют формы 1) ооциста- размножаются в слизистой оболочке кишечника кошки. Овальной формы. Выделяются с фекалиями кошки, созревают через 3 дня в окр среде. Попав в кишеник человека высвобождают спорозоты (разм бесполым путем), затем внедряются в другие клетки.

2) Тахезоиты- форма апельсиновых долек (имеют 1 ядро), размножаются в эпителиальных клетках. При окраке по романовскому – гимзе, ядро кр, цит голуб.

3) Цисты- неблаг условия, толстая оболочка.

Культуральные св-ва. На курином эмбрионе или культуре клеток.

Эпидемиология. Распространено повсеместно. Механизм- фекально оральный, контактный бытовой(непосредственно с кошкой), алиментарный. Путь- водный, пищевой.

Источник- кошки, кошка заражается при употреблении сырого мяса.

Опасно для беременных – уродство плода, выкидыши.(особенно в превом триместре)

Патогенез и клиника. В большинстве случаев проходит бессимптомно, идет только выработка антител. Токсоплаз попадает в тонкую кишку, разм-ся в лмф узлах, затем с током лимфы разносится по всем органам, где образует ооцисты и цисты, в актвной форме поражает цнс, печень итд.

При врожденном токсоплазмозе наличие специфических антител.

Диагностика 1) Серологический. Материал- сыворотка крови. Смотрят наличие IgМ(острая стадия), IgG(перенесенное заболевание). Могут смотреть нарастание титра антител в острый период

2) Микроскопический. Материал кровь. Окраска по Ром.-гимзе (ядро кр, цит голуб)(апельсиновые дольки).

3) Кожно аллерг проба – положительна в острый период и при наличии антител

Лечение и профилактика. Пириметамин с сульфаниламидами. При беременности спирамицин вместо пириметамина, т к не проникает через плаценту.

Неспец. проф мытье рук, ограниченное общение с кошками,уничтожение мух,грызунов, тараканов.

Спец. нет