Цели стерилизации:
· Предупреждение заноса микробов в организм человека при медицинских вмешательствах,
· Исключение контаминации питательных сред и культур клеток при диагностических и научных исследованиях, в процессе биотехнологического производства,
· Предупреждение микробного разрушения материалов, в том числе диагностических и лекарственных средств.
Стерилизации в медицинской практике подвергают все, что соприкасается с раневой поверхностью, поврежденной кожей, слизистыми оболочками, вводится во внутреннюю среду организма, а также лекарственные препараты, питательные среды, лабораторная посуда, воздух операционных и др.
Различают методы стерилизации:
1. Физические – термический (тепловой), лучевой, механический.
2. Химические – растворами и газами.
Выбор метода стерилизации зависит от свойств материалов, из которых состоят стерилизуемые изделия, их размера и других конструктивных особенностей, от необходимости длительного сохранения стерильности и других факторов.
Тепловая стерилизация является наиболее надежным, экологически безопасным, дешевым и хорошо контролируемым методом. Она основана на чувствительности микробов к высокой температуре. Для тепловой стерилизации применяют в основном сухой жар и пар под давлением.
Наиболее универсальным методом стерилизации является обработка насыщенным паром под давлением в паровых стерилизаторах (по-старому в автоклавах). Она более предпочтительна, чем воздействие сухого жара в воздушных стерилизаторах (сухожаровом шкафу). Паровой стерилизации подвергают изделия их текстиля (белье, перевязочный материал, шовный материал), из резины, полимерных материалов, многие инструменты, питательные среды, лекарственные препараты, инфекционный материал.
|
|
Паровой стерилизатор (автоклав) представляет собой металлический цилиндр с прочными стенками, герметически закрывающийся, состоящий из водопаровой и стерилизующей камер. Аппарат снабжен манометром, термометром и другими контролирующими приборами. В герметичной камере создается повышенное давление, что приводит к увеличению температуры кипения воды. Так, при давлении 2 атм температура кипения воды 121°С. При этом споры погибают уже при 120°С. Время стерилизации уменьшается при повышении давления и температуры кипения. Микроорганизмы погибают за несколько секунд, но материал обрабатывают в течение большего времени, так как высокая температура должна быть и внутри стерилизуемого объекта, а также существует так называемое поле безопасности, рассчитанное на возможное отклонение от заданных параметров при работе автоклава.
При воздушной стерилизации в сухожаровом шкафу обрабатывают изделия из металла, стекла, силиконовой резины. Воздушный стерилизатор представляет собой металлический плотно закрывающийся шкаф, нагревающийся с помощью электричества и снабженный термометром. Используют следующие режимы работы: температура 160°С в течение 150 минут и 180°С в течение 60 минут. Недостаток метода – высокую температуру выдерживают только некоторые объекты.
В настоящее время в мед. учреждения поступают новые, более совершенные аппараты для паровой и воздушной стерилизации. В них имеются системы индикации режима стерилизации, аварийной сигнализации, автоматические устройства блокировки дверей, в отличие от обычных аппаратов отклонения от заданной температуры минимальны. Это позволяет уменьшить время паровой стерилизации до 3-10 минут, воздушной – до 30-120 минут.
|
|
По отношению к термолабильным предметам допустима дробная стерилизация текучим паром в автоклаве при 100°С или нагревание на водяной бане при 60-80°С. Такой режим применяют для стерилизации сывороток, питательных сред с углеводами, некоторых лекарственных препаратов.
Химическую стерилизацию используют при обработке крупногабаритных изделий, приборов, аппаратов, а также термолабильных изделий – эндоскопы, изделия из резин, полимерных, титановых сплавов.
Для газовой (холодной)стерилизации используют герметичные контейнеры, которые заполняют парами формальдегида или окиси этилена, смесью окиси этилена и бромистого метила. Эти вещества в присутствии воды способны инактивировать ферменты, другие белки, ДНК и РНК, что приводит к гибели микробов. Этот вид стерилизации опасен для персонала и окружающей среды.
Для химической стерилизации растворами применяют отечественные (первомур, перекись водорода, анолит, бианол) и импортные препараты (гигасепт, глутаровый альдегид, дюльбак).
Лучевая стерилизация осуществляется с помощью γ-лучей или ускоренных электронов. Гибель микробов происходит в результате повреждения нуклеиновых кислот.
Применяется на специальных установках при промышленной стерилизации изделий однократного применения, является альтернативой газовой стерилизации. Несмотря на экологическую опасность и неэкономичность, применение этого метода оправдано благодаря возможности широкомасштабной стерилизации.
|
|
Фильтрование (механический метод) осуществляется с помощью мелкопористых фильтров различных типов, задерживающих только клеточные формы микробов и их споры. Применяют для стерилизации жидких питательных сред, сывороток, антибиотиков, лекарств, бактериофагов и др. биопрепаратов.
5. Дезинфекция – мероприятия, направленные на уничтожение патогенных и условно-патогенных микроорганизмов во внешней среде, в том числе на объектах и изделиях.
Цель дезинфекции – прерывание передачи возбудителей от инфицированного организма к здоровому через объекты внешней среды. После дезинфекции в отличие от стерилизации не нужно защищать продезинфицированный материал от попадания микробов извне.
Используют следующие методы дезинфекции:
- Химический,
- Физический (тепловой и лучевой),
- Механический,
- Биологический.
Тепловая дезинфекция включает воздействие горячей водой и насыщенным паром: при температуре 80°С – 10 минут, при 90°С – 1 мин. При этом режиме погибают все вегетативные формы бактерий и большинство вирусов. Температура 100°С в течение 5 минут убивает все вегетативные формы бактерий и почти все вирусы, добавление в воду 2% гидрокарбоната натрия способствует растворению белков и жиров на поверхности предмета, предупреждает коррозию инструментов. Для дезинфекции применяют также сухое тепло, например, прокаливание.
Разновидностью тепловой дезинфекции является пастеризация – щадящий способ тепловой обработки, при котором инактивируется большинство вегетативных форм бактерий, однако споры сохраняются. Используют для обезвреживания жидких продуктов – молока, вина, пива, соков для сохранения их вкусовых качеств и ценных компонентов. Чаще всего используется режим 60-70°С в течение 20-30 минут (низкая пастеризация), реже - 72°С от 15 до 60 сек (высокая пастеризация), после чего жидкость быстро охлаждают для предотвращения прорастания спор.
Тепловая дезинфекция – наиболее эффективный, дешевый и экологически безопасный метод обработки.
Химическая дезинфекция осуществляется с помощью различных дезинфицирующих веществ. Дезинфектанты действуют, растворяя липиды клеточных оболочек (детергенты) или разрушая белки и нуклеиновые кислоты (окислители).
Выбор дезинфицирующего вещества, его концентрация и экспозиция зависят от биологических свойств микроба и среды, в которой будет происходить контакт дез. вещества с патогенными микроорганизмами.
В мед. учреждениях применяют достаточно высокие концентрации дез. средств, обладающих широким спектром микробоцидного действия, реже используют сочетание химической и температурной обработки (пароформалиновая дезинфекция).
Применяют следующие основные группы дезинфектантов:
· Галоидсодержащие, на основе соединений хлора, брома, йода,
· Кислородсодержащие на основе перекисных соединений,
· Поверхностно-активные вещества на основе четвертично-аммониевых соединений и амфотерных поверхностно-активных соединений (аламинол, санифект, велтолен, септодор),
· Гуанидины и их смеси с ПАВ (демос, катасепт, лизоформин),
· Спирты ((на основе этанола),
· Альдегидсодержащие (гигасепт, сайдекс, гтутарал),
· Фенолсодержащие (фенол высокотоксичен, разрешен амоцид).
Лучевая дезинфекция заключается в использовании ультрафиолетовых лучей с длиной волны 200-450 нм, которые излучают специальные бактерицидные лампы (настенные, потолочные, передвижные), для обеззараживания воздуха, поверхностей в операционных, перевязочных, микробиологических лабораториях, на предприятиях пищевой промышленности.
Виды дезинфекции: профилактическая (проводится постоянно для предупреждения появления и распространения инфекционных болезней) и очаговая (в эпидемическом очаге), которая делится на текущую и заключительную.
6. Микробиологический контроль объектов, подвергшихся стерилизации, как правило, не производится. Его заменяет контроль работы стерилизаторов (контроль процесса стерилизации). Способы контроля:
· Физические,
· Химические,
· Бактериологические.
Физический метод контроля стерилизации заключается в контроле за технической исправностью приборов, фиксирующих параметры работы стерилизатора. Химические методы заключаются в использовании химических веществ, меняющих свою окраску в процессе стерилизации (индикаторные ленты –ИС-120, ИС-132, бензойная кислота, мочевина), которые помещают на поверхности и в глубине стерилизуемого объекта.
Бактериологический метод заключается в применении биотестов, содержащих споровые формы бактерий, которые помещают внутрь стерилизуемого объекта. После стерилизации биотесты подвергают бактериологическому исследованию. Отсутствие роста тест-культуры в течение 7 суток указывает на эффективность работы стерилизатора.
Контроль качества дезинфекционных мероприятий, проводимых в лечебных учреждениях, проводится различными методами, в том числе путем контроля концентраций рабочих растворов дезинфицирующих средств.
Наиболее перспективным методом экспресс-контроля является разработка индикаторных полосок и наборов химических реактивов. Индикаторные полоски имеют ряд преимуществ:
– просты в применении;
– не требуют специального оборудования и химических реактивов;
– оперативны;
– могут использоваться непосредственно на рабочем месте;
– обеспечивают высокую точность исследования;
– имеют относительно низкую стоимость.
Применяются индикаторные полоски «Дезиконт-ДХИ» для определения активного хлора в дезинфицирующих средствах на основе дихлорциануровой кислоты, таких, как: «Хлормикс», «Пюржавель», «Санивап», «Жавель Солид», «Жавелион», «Деохлор таблетки» и др.
Индикаторные полоски «Молконт-ЧАС» позволяют контролировать наличие следов четвертичных аммониевых соединений в смывных водах, а также полноту отмывки оборудования после проведения дезинфекции такими дезинфицирующими средствами, как «Лизоформин-3000», «Новодез Форте», «Новодез-50», «Самаровка», «Септодор», «Септодор-Арома», «Септодор-Форте», «Септустин», «Эффект-Форте» и др.
Индикаторы в виде салфеток позволяют подтвердить факт дезинфекции. Салфетки применяются при использовании препаратов на основе хлора «Дезиконт-хлор» и четвертичных аммониевых соединений «Дезиконт-ЧАС». В зависимости от наличия и концентрации действующих веществ салфетки меняют свой цвет.
7. Для профилактики внутрибольничных и особенно хирургических инфекций применяют асептику и антисептику.
Асептика - комплекс мер, направленных на предупреждение микробного загрязнения объекта (раны, операционного поля, органов больного). Методы асептики применяют для борьбы с экзогенной инфекцией. Асептика включает стерилизацию и сохранение стерильности инструментов, перевязочного материала, перчаток, лекарственных препаратов для парентерального введения, то есть всего, что приходит в соприкосновение с раной; дезинфекцию рук хирурга, операционного поля, аппаратуры, воздуха, и т.д. Это совокупность прямых методов воздействия на микроорганизмы. Также применяются косвенные (разделительные) методы асептики: планировка операционных, герметичные перегородки в рабочих помещениях, система воздушных бактериальных фильтров, применение специальной одежды, масок, перчаток. Таким образом предупреждают или снижают риск заноса микроорганизмов в «рабочую зону» -операционную рану, питательную среду, пищевой продукт, организм больного.
Антисептика – совокупность мер, направленных на уничтожение микробов в ране, патологическом очаге или организме в целом. Принципы антисептики введены в медицину И. Земмельвейсом в 1847 г.
Антисептика включает различные методы: механические (удаление некротизированных тканей, инородных тел), физические (дренирование ран, введение тампонов), биологические (использование протеолитических ферментов, бактериофагов, антибиотиков). Главным методом являются химические – обработка химическими веществами с микробостатическим действием (антисептиками) с учетом спектра их антимикробной активности и чувствительности конкретных возбудителей.
Для антисептики применяют растворы кислородсодержащих препаратов на основе перекисных соединений, спирты и другие вещества с антимикробной активностью.
Микрофлора организма человека. Микрофлору человека составляет совокупность микробных биоценозов, встречающихся в организме здоровых людей и сформировавшихся в процессе эволюции. Данные биоценозы характеризуются относительным постоянством, однако качественный и количественный состав микрофлоры организма человека меняется в течение жизни и зависит от пола, возраста, питания, климата и др. Кроме того, изменения микробных биоценозов могут быть обусловлены возникновением заболеваний, применением химиотерапевтических и иммунологических средств. Микроорганизмы заселены в кожные покровы и слизистые оболочки многих органов и полостей, сообщающихся с внешней средой. Кровь, лимфа, внутренние органы, головной и спинной мозг, спинномозговая жидкость стерильны.
Микрофлору организма человека можно условно разделить на две группы: облигатную (или резидентную, аутохтонную) и факультативную (или транзиторную). К облигатной микрофлоре относятся микроорганизмы, максимально приспособленные к существованию в организме человека и закономерно встречающиеся в его органах и полостях. Факультативная микрофлора является временной, необязательной и определяется микробной обсемененностью окружающей среды и состоянием резистентности организма человека. В состав резидентной и транзиторной микрофлоры входят сапрофитные и условно-патогенные микроорганизмы. В последнее время все большее значение в патологии человека приобретают внутрибольничные или госпитальные инфекции, возбудителями которых являются условно-патогенные микроорганизмы, относящиеся к резидентной микрофлоре человека. Их патогенность реализуется при ослаблении резистентности макроорганизма.
Микрофлора отдельных биотопов тела человека различна и требует раздельного рассмотрения.
Микрофлора кожи. Поверхность кожи человека, особенно открытые ее части, обсеменены различными микроорганизмами, здесь определяется от 25 000 000 до
1 000 000 000 особей микробов. Собственная микрофлора кожи человека представлена сарцинами, стафилококками, дифтероидами, некоторыми видами стрептококков, бациллами, грибами и др. Кроме характерной для кожи микрофлоры здесь могут присутствовать транзиторные микроорганизмы, быстро исчезающие под влиянием бактерицидных свойств кожи. Большой способностью к самоочищению обладает чисто вымытая кожа. Бактерицидность кожи отражает общую резистентность организма.
Неповрежденные кожные покровы для большинства микроорганизмов, в том числе и патогенных, непроницаемы. При нарушении их целостности и понижении резистентности организма могут возникать заболевания кожи.
Санитарно-бактериологическое исследование кожи Санитарно-бактериологическое исследование кожи проводится двумя методами:
· Посев отпечатков пальцев рук на МПА в чашках Петри с последующим макроскопическим и микроскопическим изучением выросших колоний.
· Посев смывов с кожи для определения общего микробного числа и кишечной палочки.
Микрофлора полости рта. В ротовой полости имеются благоприятные условия для развития микроорганизмов: наличие питательных веществ, оптимальная температура, влажность, щелочная реакция слюны. В поддержании качественного и количественного постоянства нормальной микрофлоры полости рта главную роль играет слюна, обладающая антибактериальной активностью за счет содержащихся в ней ферментов (лизоцим, лактоферрин, пероксидаза, нуклеаза) и секреторных иммуноглобулинов.
В ротовой полости новорожденных к концу первой недели обнаруживаются стрептококки, нейссерии, лактобактерии, дрожжеподобные грибы, актиномицеты. Количественный и видовой состав микробов полости рта находится в зависимости от диеты и возраста ребенка. Во время прорезывания зубов появляются облигатные грамотрицательные анаэробы.
В ротовой полости обнаруживаются более 100 видов микроорганизмов, большинство из которых аэробы и факультативные анаэробы. Основная масса микроорганизмов полости рта локализуется в зубном налете: в 1 мг сухой массы зубного налета содержится около 250 млн микробных клеток. Большое количество микроорганизмов обнаруживается у шейки зуба, в промежутке между зубами и в других участках полости рта, малодоступных обмыванию слюной, а также на слизистых глоточных миндалин. Индивидуальные колебания в качественном и количественном составе микрофлоры полости рта зависят от возраста, диеты, гигиенических навыков, резистентности слизистой оболочки, наличия патологических процессов в зубах и деснах. Резидентную группу бактерий полости рта составляют стрептококки (Streptococcus salivarius), непатогенные стафилококки, сапрофитные нейссерии, коринебактерии, лактобациллы, бактероиды, фузиформные бактерии, дрожжеподобные грибы, актиномицеты, микоплазмы, простейшие (Entamoeba buccalis).
Среди факультативных микроорганизмов встречаются энтеробактерии (роды Esherichia, Klebsiella, Enterobacter, Proteus), синегнойная палочка, спорообразующие бактерии (роды Bacillus, Clostridium), микроорганизмы рода Campylobacter. Для качественного и количественного изучения микрофлоры полости рта используют бактериоскопический и бактериологический методы исследования.
Бактериоскопический метод. Исследуемым материалом является зубной налет. Мазок окрашивают по Граму или Бурри и изучают морфологические и тинкториальные свойства микроорганизмов.
Бактериологический метод. Материалом для исследования является слизь из зева, которую забирают при помощи стерильного ватного тампона. Делают посев этим же тампоном штрихами на чашку Петри с кровяным агаром. После суточной инкубации при 37°С из выросших колоний готовят мазки, окрашивают по Граму и изучают морфологические и тинкториальные свойства выделенной культуры микроорганизмов.
Микрофлора желудочно-кишечного тракта. При нормальном функционировании желудка микрофлора в нем почти отсутствует, вследствие кислой реакции желудочного сока и высокой активности гидролитических ферментов. Поэтому в желудке могут быть обнаружены в небольшом количестве кислотоустойчивые виды - лактобактерии, дрожжи, Sarcina ventriculi и др. В двенадцатиперстной и верхних отделах тонкой кишки микроорганизмов встречается мало, несмотря на то, что кислая среда желудка сменяется щелочной. Это объясняется неблагоприятным воздействием на микробы присутствующих здесь ферментов. Тут обнаруживаются энтерококки, молочнокислые бактерии, грибы, дифтероиды (106 клеток на 1 мл содержимого). В нижних отделах тонкой кишки, постепенно обогащаясь, микрофлора сближается с микрофлорой толстой кишки.
Микрофлора толстой кишки наиболее разнообразна по числу видов (более 200 видов) и количеству обнаруживаемых микробов (10 9 -10 11 клеток на 1 мл содержимого). Микробы составляют 1/3 сухой массы фекалий. Облигатная микрофлора представлена анаэробными (бактероиды, бифидумбактерии, вейлонеллы) бактериями (96-99%) и факультативными анаэробами (E.coli, энтерококки, лактобациллы-1-4%).
Транзиторная микрофлора представлена следующими родами и видами: протей, клебсиеллы, клостридии, синегнойная палочка, кампилобактер, дрожжеподобные грибы рода Candida и др. Микроорганизмы рода Campylobacter встречаются в толстом кишечнике человека при иммунодефицитных состояниях различной природы. Состав микрофлоры кишечника меняется в течение жизни человека. У новорожденных в первые часы после рождения меконий стерилен - асептическая фаза. Вторая фаза - фаза возрастающей обсемененности (первые три дня жизни ребенка). В этот период в кишечнике преобладают эшерихии, стафилококки, энтерококки, дрожжеподобные грибы. Третья фаза - фаза трансформации флоры кишечника (начиная с 4 дня жизни). Устанавливается молочнокислая микрофлора, лактобактерии, ацидофильные бактерии. После окончания грудного вскармливания начинает постепенно формироваться постоянный биоценоз в пищеварительном тракте.
В микрофлоре желудочно-кишечного тракта различают мукозную (М) и просветную (П) микрофлору, состав которой различен. М-флора тесно ассоциирована со слизистой оболочкой, более стабильна и представлена бифидумбактериями и лактобактериями. М-флора препятствует пенетрации слизистой оболочки патогенными и условно-патогенными микроорганизмами. П-флора наряду с бифидум- и лактобактериями включает и других постоянных обитателей кишечника. Для изучения микрофлоры толстого кишечника исследованию подвергают испражнения, которые забирают стерильной деревянной или стеклянной палочкой и помещают в пробирку с консервантом. Материал доставляют в лабораторию в течение 1 часа, так как при более длительном хранении значительно нарушаются взаимоотношения между видами.
Проводят микроскопическое исследование мазков фекалий, окрашенных по Граму, а так же производят посев испражнений на питательные среды: Эндо, кровяной агар, молочно-солевой агар, агар Сабуро.
Микрофлора дыхательных путей. В дыхательные пути вместе с воздухом попадают пылевые частички и микроорганизмы, 3/4-4/5 которых задерживаются в полости носа, где и погибают через некоторое время вследствие бактерицидного действия лизоцима и муцина, защитной функции эпителия, деятельности фагоцитов. В состав облигатной микрофлоры носовых ходов входят стафилококки, коринебактерии. Факультативная микрофлора представлена золотистым стафилококком, стрептококками, непатогенными нейссериями. Микрофлора носоглотки представлена стрептококками, бактероидами, нейссериями, вейлонеллами, микобактериями. Слизистая оболочка трахеи и бронхов стерильна. Мелкие бронхи, альвеолы, паренхима легких человека свободны от микроорганизмов.
Для микробиологического исследования материал из носа берут стерильным тампоном, а из носоглотки - стерильным заднеглоточным тампоном. Делают посев на кровяной агар и желточно-солевой агар. Материал, оставшийся на тампоне, используют для приготовления мазков, которые окрашивают по Граму и Нейссеру.
Микрофлора конъюнктивы. В значительном проценте случаев микрофлора конъюнктивы отсутствует, что обусловлено бактерицидными свойствами слезной жидкости. В отдельных случаях на конъюнктиве глаза могут обнаруживаться стафилококки, коринебактерии, микоплазмы. При снижении естественной защиты организма, нарушении зрения, гиповитаминозах нормальная микрофлора слизистых оболочек глаз может вызывать различные заболевания: конъюнктивиты, блефариты и другие нагноительные процессы.
Микрофлора уха. В наружнем слуховом проходе обнаруживаются непатогенные стафилококки, коринебактерии, дрожжеподобные и плесневые грибы (Aspergillus), которые в определенных условиях являются возбудителями патологических процессов. Во внутреннем и среднем ухе микробы в норме не содержатся.
Микрофлора мочеполовой системы. Почки, мочеточники и моча в мочевом пузыре стерильны. В мочеиспускательном канале мужчин обитают стафилококки, дифтероиды, бактероиды, микобактерии, грамотрицательные непатогенные бактерии. Уретра женщин стерильна.
На наружных половых органах мужчин и женщин обнаруживаются микобактерии смегмы, стафилококки, коринебактерии, микоплазмы, сапрофитные трепонемы.
Состав влагалищной микрофлоры разнообразен, непостоянен и зависит от уровня гликогена в клетках эпителия и рН влагалищного секрета, что связано с функцией яичников.
Заселение влагалища лактобактериями происходит сразу после рождения. Затем в микробиоценоз включаются энтерококки, стрептококки, стафилококки, коринебактерии. Кокковая флора становится ведущей и характерной для периода детства вплоть до наступления полового созревания. С наступлением половой зрелости в составе микрофлоры преобладают аэробные и анаэробные молочнокислые бактерии, доминирует группа бактерий Додерлейна.
Различают несколько категорий чистоты влагалища здоровых женщин: 1-я категория - в мазках-препаратах обнаруживаются палочки Додерлейна, других видов микроорганизмов почти нет; 2-я категория - кроме молочнокислых бактерий встречается небольшое количество грамположительных диплококков; 3-я категория - уменьшается количество молочнокислых бактерий, увеличивается количество лейкоцитов и другой микрофлоры; 4-я категория - обильное количество лейкоцитов и различной микрофлоры, палочки Додерлейна почти отсутствуют. 1 и 2 категории наблюдаются у здоровых женщин, 3 и 4 - у женщин с воспалительными процессами во влагалище. Полость матки у здоровых женщин стерильна.