Гепаднавирусы (семейство Hepadnaviridae, вирус гепатита В)

Вирус гепатита А

Вирусные гепатиты наносят огромный ущерб здоровью населения и экономике всех стран мира. Они подразделяются на энтеральные — гепатиты А и Е и парентеральные — ге­патиты В, С, D, F, G и др. Вирус гепатита А вызывает острую инфек­ционную болезнь, характеризующуюся ли­хорадкой, преимущественным поражением печени, интоксикацией, иногда желтухой и отличающуюся склонностью к эпидемичес­кому распространению. Антропоноз.

Таксономия, морфология и антигенная струк­тура. Вирус гепатита А относится к семейс­тву Picornaviridae роду Hepatovirus. Типовой вид — вирус гепатита А — имеет один серотип. Это РНК-содержащий вирус, просто организованный, имеет диаметр 27—28 нм и один вирусоспецифический антиген.

Культивирование. Вирус выращивают в культурах клеток. Цикл репродукции более длительный, чем у энтеровирусов, цитопатический эффект не выражен.

Резистентность. Вирус гепатита А отличает­ся большей, чем у энтеровирусов, устойчивос­тью к нагреванию он сохраняется при 60 °С в течение 12 ч, инактивируется при кипячении в течение 5 мин. Относительно устойчив во внешней среде (воде, выделениях больных).

Восприимчивость животных. Эксперимен­тальную инфекцию возможно воспроизвести на обезьянах мармозетах и шимпанзе.

Эпидемиология. Источником инфекции являются больные как с выраженными, так и с бессимптомными формами инфекции. Механизм заражения — фекально-оральный. Вирусы выделяются с фекалиями начиная со второй половины инкубационного периода и в начале клинических проявлений в это время больные наиболее опасны для окру­жающих. С появлением желтухи интенсив­ность выделения вирусов снижается. Вирусы гепатита А передаются через воду, пищевые продукты, предметы обихода, грязные руки; в детских коллективах — через игрушки, горшки. Вирусы способны вызывать водные и пищевые эпидемические вспышки.

Гепатит А распространен повсеместно, но особенно в местах с дефицитом воды, пло­хими системами канализации и водоснабже­ния и низким уровнем гигиены населения.

Болеют преимущественно дети в возрасте от - до 15 лет. Подъем заболеваемости наблюдает­ся в летние и осенние месяцы.

Патогенез. Вирус гепатита А обладает гепатотропизмом. После заражения репликация вирусов происходит в кишечнике, а оттуда че­ рез портальную вену они проникают в печень и реплицируются в цитоплазме гепатоцитов Повреждение гепатоцитов возникает не за счет прямого цитотоксического действия, а в ре­ зультате иммунопатологических механизмов.

Клиника. Инкубационный период состав­ляет от 15 до 50 дней, чаще около месяца. Начало острое, с повышением температуры и явлениями со стороны ЖКТ (тошнота, рвота и др.). Возможно появление желтухи на 5—7 -й день. Клиническое течение заболевания, как правило, легкое, без особых осложнений; у детей до 5 лет — обычно бессимптомное Продолжительность заболевания 2—3 недели. Хронические формы не развиваются.

Иммунитет. После инфекции формируется стойкий пожизненный иммунитет, связан­ный с IgG. В начале заболевания в крови появляются IgM, которые сохраняются в ор­ганизме в течение 4—6 месяцев и имеют диа­гностическое значение. У детей первого гола жизни обнаруживаются антитела, получен­ные от матери через плаценту. Помимо гумо­рального, развивается и местный иммунитет в кишечнике.

Микробиологическая диагностика. Материа­лом для исследования служат сыворотка и испражнения. Диагностика основана глав­ным образом на определении в крови IgM с помощью ИФА, РИА и иммунной электрон­ной микроскопии. Этими же методами можно обнаружить вирусный антиген в фекалиях. Вирусологическое исследование не прово­дят из-за отсутствия методов, доступных для практических лабораторий.

Лечение. Симптоматическое.

Профилактика. Неспецифическая профи­лактика должна быть направлена на повыше­ние санитарной культуры населения, улучше­ние водоснабжения и условий приготовления пищи.

Для специфической пассивной профилак­тики используют иммуноглобулин по эпид-показаниям. Иммунитет сохраняется около 3 месяцев. Для специфической активной про­филактики разработана и применяется инактивированная культуральная концентриро­ванная вакцина. Разработана также рекомбинантная генно-инженерная вакцина.

Гепаднавирусы (семейство Hepadnaviridae, вирус гепатита В)

Гепаднавирусы (семейство Hepadnaviridae ) относятся к обратно транскрибирующимся ДНК-содержащим вирусам включают вирус гепатита В (ВГВ).

Гепатит В — антропонозная инфекция, преимущественно с парентеральным меха­низмом заражения, которая может проте­кать в форме вирусного носительства, ост­рой и хронической форм и характеризуется поражением печени с возможным разви­тием острой печеночной недостаточности, хронического гепатита, цирроза печени и первичного рака печени (гепатоцеллюлярной карциномы).

Таксономия. ВГВ относится к семейс­тву Hepadnaviridae роду Orthohepadnavirus.

Морфология ВГВ является сложноорганизованным ДНК-содержащим вирусом сфе­рической формы (диаметр 42-47 нм). Он со­стоит из сердцевины, построенной по куби­ческому типу симметрии, состоящей из 180 белковых частиц, составляющих сердцевин­ный НВс-антиген, диаметром 28 нм, и липидсодержащей оболочки, содержащей поверх­ностный HBs-антиген. Внутри сердцевины находятся ДНК, фермент ДНК-полимераза, обладающая ревертазной активностью, и кон­цевой белок НВе-антиген.

Геном представлен двунитевой ДНК коль­цевой формы, с молекулярной массой 1,6х10⁶ Да, у которой плюс-цепь укорочена на '/₃ длины. Полноценная минус-цепь ковалентно связана с ДНК-полимеразой, которая достра­ивает плюс-цепь до полноценной структуры. Геном записан на минус-цепи и состоит из 4 генов-транскриптов: Р, С, S, X, кодирующих структурные белки и полимеразу.

Культуральные свойства. ВГВ не культи­вируется на куриных эмбрионах, не облада­ет гемолитической и гемагглютинирующей активностью. ВГВ культивируется только в культуре клеток, полученной из ткани пер­вичного рака печени, в виде персистирующей инфекции, без оказания цитопатического эффекта и с малым накоплением вирионов. К вирусу чувствительны приматы: шимпанзе, горилла, орангутанг, которые используются в качестве экспериментальной модели.

Резистентность. ВГВ отличается высо­кой устойчивостью к факторам окружаю­щей среды и дезинфицирующим веществам. Температуру —20 °С выдерживает более 10 лет. При нагревании до 100 °С в течение 5 мин сохраняет инфекционную активность. Термоустойчивость вируса повышается, если он находится в крови, т. е. защищен белками крови. Вирус устойчив к длительному воз­действию кислой среды (pH 2,3), УФ-излучению, действию спирта, фенола. Чувствителен к действию формалина, эфира, хлорамина.

Антигенная структура. ВГВ обладает слож­ной антигенной структурой. В суперкапсиде вируса находится HBs-антиген, который ло­кализован в гидрофильном слое на поверх­ности вириона. В формировании НBs-анти­гена участвуют 3 полипептида в гликозилиро- ванной форме: preSl — большой полипептид; preS2 — средний полипептид; S — малый мажорный полипептид. Белки оболочки различаются по антигенной специфичности. Существует 4 антигенных фено­типа вируса (ayr, ayw, adr, adw), которые распро­странены в различных географических зонах.

HBs-антиген обнаруживается в крови не только в составе вирионов, но и в виде само­стоятельных фрагментов. Впервые HBs-анти­ген был обнаружен и описан Б. Блумбергом. 1963 г. в крови австралийских аборигенов, поэтому получил название «австралийского антигена». Присутствие HBs-антигена в кро­ви свидетельствует об инфицированное™ ор­ганизма ВГВ.

Сердцевинный НВс-антиген никогда не об­наруживается в свободном состоянии в крови. Его можно обнаружить в зараженных вирусом гепатоцитах.

НВе-антиген также является сердцевин­ным антигеном, производным НВс-антигена.

Появление НВе-антигена в крови связано с репликацией вируса в гепатоцитах.

НВх-антиген — трансактиватор, является еще одним антигеном ВГВ, накопление ко­торого связывается с развитием первичного рака печени.

Эпидемиология. ВГВ повсеместно распро­странен среди населения земного шара. Вос­приимчивость людей к ВГВ высокая. Наибо­лее восприимчивы дети первого года жизни. Для инфицирования достаточно 0,0001 мл инфицированной крови. Основным резерву­аром ВГВ и источником инфекции являются вирусоносители, общее число которых в мире значительно превышает 400 млн. Источником инфекции являются также больные острой и хронической формами гепатита В. Особенно опасны лица с НВе-антигеном в крови. Еже­годно в мире от патологий, связанных с гепа­титом В, умирает около 2 млн человек.

Развитие инфекционного процесса насту­пает при попадании ВГВ в кровь. Заражение происходит при парентеральных манипуля­циях (инъекциях, хирургических вмешатель­ствах, трансплантации органов, искусствен­ном оплодотворении, стоматологических и гинекологических манипуляциях, нанесении татуировок), переливании крови и при вве­дении препаратов из крови. Часто зараже­ние происходит также при половых контак­тах, через микротравмы в быту и, вероятно, трансмиссивно через клопов. ВГВ передается трансплацентарно от матери плоду и при про­хождении плода через родовые пути. Риск заражения ребенка от матери — носителя ВГВ составляет 60 %, а в случае свежего заболева­ния матери — 90 %. ВГВ у всех инфициро­ванных лиц находится во всех биологических жидкостях: крови, слюне, моче, сперме, вла­галищном секрете, синовиальной жидкости, цереброспинальной жидкости, грудном моло­ке. В крови ВГВ появляется за 2—3 месяца до наступления симптомов поражения печени и хранится до 5 лет после клинического выздо­ровления.

Патогенез и клиника заболевания. Инкуба­ционный период 3—6 месяцев. Инфекцион­ный процесс наступает после проникновения вируса в кровь. ВГВ из крови эндоцитозом проникает в гепатоцит, видимо, при посред­ничестве сывороточного альбумина, рецеп­торы к которому обнаружены как на preS2- антигене ВГВ, так и на гепатоцитах. После проникновения вируса в гепатоцит происхо­дит достраивание плюс-нити ДНК ДНК-полимеразой до полноценной структуры, после чего возможно развитие двух типов вирусной инфекции: интегративной и продуктивной.

Интегративная инфекция сопровождается интеграцией кольцевой ДНК вируса в хромо­сому гепатоцита с образованием провируса. При этом наблюдается синтез HBs-антигена. Клинически это проявляется вирусоносительством, показателем которого является обнаружение в крови HBs-антигена. У но­сителей ВГВ ДНК вируса может быть обна­ружена встроенной, помимо ДНК гепатоци- тов, в ДНК клеток поджелудочной железы. Следствием вирусоносительства может быть развитие первичного рака печени, при этом в крови начинает определяться НВх-антиген. Предполагается, что НВх-антиген связывает белок р53, который выполняет функцию супрессора опухолевого роста, регулируя процес­сы клеточного деления.

В процессе продуктивной инфекции про­исходит формирование новых вирусных час­тиц. Клинически это проявляется активным инфекционным процессом в виде острого или хронического гепатита, маркером кото­рых служит появление в крови анти-HBc-IgM антител. Репликация ВГВ протекает в ци­топлазме.

Клиническая картина характеризуется сим­птомами поражения печени, в большинстве случаев сопровождается развитием желтухи. Возможны и безжелтушные формы. В 1 % случаев возникают молниеносные формы, обычно со смертельным исходом. Острый гепатит в 5—10 % случаев переходит в хрони­ческое течение, с развитием цирроза и по­жизненного носительства ВГВ. Вероятность возникновения пожизненного носительства ВГВ особенно велика в 50-90 % случаев у детей первого года жизни, заразившихся от матерей.

Иммунитет. Гуморальный иммунитет, пред­ставленный главным образом антителами к Н Bs-антигену, которые образуются как в про­цессе активной вирусной инфекции, так и у носителей, защищает гепатоциты от вируса, элиминируя его из крови.

Клеточный иммунитет, в формировании ко­торого основная роль принадлежит НВс-антигену, освобождает организм от инфицирован­ных гепатоцитов благодаря цитолитической функции Т-киллеров (CD8 Т-лимфоцитов), а выделяемые ими цитокины вызывают угнете­ние репликации вируса. Переход острой фор­мы в хроническую обеспечивается наруше­нием Т-клеточного иммунитета, а также де­фектами образования а-интерферона и ИЛ-1. Сероконверсия, характеризующаяся исчезно­вением из крови НВе-антигена и появлением антител к нему, имеет положительное про­гностическое значение, так как коррелирует с активацией Т-клеточного (CD4) иммунного ответа. У лиц, с хроническим персистирую- щим гепатитом В отсутствует выраженный Т-клеточный (CD4) иммунный ответ.

Микробиологическая диагностика. Исполь­зуют серологический метод и ПЦР. Методами ИФА и РНГА в крови определяют маркеры гепатита В антигены (HBs и НВе) и антите­ла (анти-HBc-IgM, анти-HBc-IgG, анти-HBs, анти-HBe-IgM). ПЦР определяют наличие вирусной ДНК в крови и биоптатах печени. Для острого гепатита в преджелтушном и начальной стадии желтушного периода ха­

рактерно обнаружение HBs антигена, НВе антигена и анти-HBc-IgM антитела; в период реконвалесценции — анти-HBe-IgM, анти- HBc-IgG, анти-HBs антител.

Лечение. Использование интерферона, интерфероногенов виферона, амиксина, инги­битора ДНК-полимеразы, препарата аденин- рибонозида.

Профилактика. Важнейшей и наиболее эф­фективной мерой профилактики гепатита В является исключение попадания вируса при парентеральных манипуляциях и перелива­ниях крови. Это достигается: а) применением одноразовых шприцев, систем переливания крови, инструментов с последующим, после их использования, регламентированным сбо­ром и уничтожением; б) надежной стерилиза­цией инструментов в централизованных пун­ктах; в) проверкой на гепатит В по наличию HBs-антигена в крови доноров крови, органов и тканей, используемых для трансплантации и искусственного обсеменения; г) учетом всех вирусоносителей в диспансерах и лечением больных гепатитом В в специализированных отделениях инфекционных больниц; д) обя­зательной работой персонала, имеющего дело с кровью, в перчатках. Группу высокого риска заражения гепатитом В составляют хирурги, гинекологи, акушеры, стоматологи, манипуляционные сестры, сотрудники отделений переливания крови, гемодиализа, сотрудники лабораторий и лица, занятые в производстве иммунобиологических препаратов из донорс­кой и плацентарной крови.

Для предотвращения передачи гепатита В половым путем принимают все те же меры, что при ВИЧ-инфекции.

Специфическая профилактика осущест­вляется вакцинацией рекомбинантной генно-инженерной вакциной, содержащей HBs- антиген. Вакцинации подлежат все новорож­денные в первые 24 часа жизни, далее — по календарю прививок — через 1 месяц и в 5—6 месяцев или по схеме: 4—5 месяцев, 5—6 ме­сяцев, 12—13 месяцев жизни ребенка. Среди взрослого населения трехкратной вакцина­ции подвергаются лица, относящиеся к груп­пе высокого риска заражения гепатитом В. Длительность поствакцинального иммуните­та — не менее 7 лет.

 

 

Вирус гепатита С

Вирус гепатита С (ВГС) относится к се­мейству Flaviviridae роду Hepacivirus.

Морфология. ВГС является сложноорганизованным РНК-содержащим вирусом сфе­рической формы (диаметр 55-65 нм). Геном представлен одной линейной «+» цепью РНК, обладает большой вариабельностью. Известно около 14 генотипов вируса. Наиболее виру­лентен lb генотип.

Антигенная структура. Вирус обладает слож­ной антигенной структурой. Антигенами яв­ляются:

Гликопротеины оболочки (gp-антигеы), El и Е2.

Сердцевинный антиген НСс-антиген (соге-антиген)

Неструктурные белки: NS2, NS3, NS4, NS5.

Культуральные свойства. ВГС не культи­вируется на куриных эмбрионах, не облада­ет гемолитической и гемагглютинирующей активностью. Экспериментальной моделью является шимпанзе. Трудно адаптируется к культивированию в культуре клеток.

Резистентность. ВГС чувствителен к эфиру, детергентам, УФ-лучам, нагреванию до 50 °С

Эпидемиология. Заражение ВГС аналогично заражению ВГВ. Однако для заражения ВГС требуется булыиая заражающая доза, чем при гепатите В. Наиболее часто ВГС передается при переливаниях крови (²/₃ случаев), трансплацентарно (10 %), половым путем (7 %).

Клиника заболевания. Инкубационный пе­риод короче, чем при гепатите В, и составляет от 6 до 120 недель. Клиническое течение ос­трого гепатита С более легкое, чем гепатита В. Часто встречаются безжелтушные формы, выявить заболевание при которых можно по увеличению аланинтрансаминазы в крови. Но, несмотря на более легкое, чем при гепатите В течение инфекции в острой форме, в 50 % слу­чаев процесс переходит в хроническое течение с развитием цирроза и первичного рака печени. Переход в хроническое состояние связан с от­сутствием выраженного клеточного CD4 им­мунного ответа. CD4 имунный ответ направлен против неструктурного белка NS3 и направлен на эпитоп, который одинаков у всех генотипов. При ослаблении CD4 иммунного ответа про­исходит реактивация вируса. Предполагается, что ВГС представляет собой персистирующую вирусную инфекцию, при которой вирус персистирует в лимфатических узлах.

Диагностика. Используются ПЦР и серо­логическое исследование. Подтверждением активного инфекционного процесса является обнаружение в крои вирусной РНК ПЦР. Серологическое исследование направлено на определение антител к NS3 в парных сыво­ротках методом ИФА.

Профилактика и лечение. Для профилакти­ки используют те же мероприятия, что и при гепатите В. Для лечения применяют интерфе­рон и рибовирин. Специфическая профилак­тика не разработана.

 

Вирус гепатита D

Вирус гепатита D (ВГD) впервые был об­наружен в 1977 г. Ризетто. ВГd не классифи­цирован. ВГD является сателлитом вируса гепатита В и представляет дефектный вирус, не имеющий собственной оболочки. Вирион В TD имеет сферическую форму (диаметр 36 нм), который состоит из однонитчатой РНК и сердцевинного HDc-антигена (дельта-ан­тигена), который построен из двух белков, имеющих полипептидные цепи разной дли­ны. Эти белки регулируют синтез генома ви­руса: один белок стимулирует синтез генома, другой — тормозит. Различают три генотипа вируса. В России преобладает 1 генотип. Все генотипы относятся к одному серотипу. В качестве внешней оболочки В TD использует HBs-антиген внешней оболочки вируса ге­патита В.

Резервуаром BID в природе являются но­сители ВГВ. Заражение ВГБ аналогично ин­фицированию ВГВ. Одновременное инфи­цирование ВГВ и ВГ0 (коинфекция) приво­дит к развитию умеренной формы болезни. Инфицирование ВГБ больных хронической формой гепатита В утяжеляет течение инфек­ции, приводя к развитию острой печеночной недостаточности и цирроза печени. РНК ви­руса можно обнаружить в гепатоцитах ПЦР.

Диагностика осуществляется серологичес­ким методом путем определения антител к ВГО методом И ФА.

Для профилактики гепатита D применя­ются все те мероприятия, которые исполь­зуют для профилактики гепатита В. Для ле­чения используют препараты интерферона. Вакцина против гепатита В защищает и от гепатита D.

 

Вирус гепатита Е

Вирус гепатита Е (HEV) вызывает гепатит Е — антропонозную инфекцию с фекально-оральным механизмом передачи возбудителя и преимущественным поражением печени.

HEV ранее относился к семейству Caliciviri­dae. Недавно он переведен из данного семейс­тва в отдельный род Hepevirus..

Структура. Вирион безоболочечный, сфери­ческий; диаметр 27—34 нм. Геном — однонитевая плюс-РНК, которая кодирует РНК-зависимую РНК-полимеразу, папаинподобную протеазу и трансмембранный белок, обеспе­чивающий внедрение вируса в клетку.

Эпидемиология, клиника. Источник инфек­ции — больные люди. Основной путь пере­дачи — водный. Инкубационный период 2—6 недели. Заболевание сопровождается умерен­ным поражением печени, интоксикацией и, реже, желтухой. Прогноз благоприятный, кро­ме беременных, у которых заболевание может привести к летальному исходу.

Иммунитет. После перенесенного заболева­ния стойкий.

Микробиологическая диагностика: 1) сероло­гический метод — в сыворотке, плазме крови с помощью ИФА определяют: антитела к вирусу (анти-HEV IgM, анти-HEV IgG); 2) молекулярно-генетический метод — применяют ПЦР для определения РНК вируса (HEV RNA) в кале и в сыворотке крови больных в острой фазе инфекции.

Лечение. Симптоматическое. Беременным рекомендуется введение специфического им­муноглобулина.

Профилактика. Неспецифическая профилак­тика направлена на улучшение санитарно-гигиенических условий и снабжение качественной питьевой водой. Созданы неживые цельновирионные вакцины, разрабатываются рекомбинантные и живые вакцины.