Таким образом, циклоспорин и такролимус нарушают активацию клетки, не убивая ее.

Занятие 10

Тема 19. Иммунотерапия

 

Выделяют 2 основных подхода к иммунотерапии:

-медикаментозная иммунотерапия;

-иммунобиотерапия.

 

Медикаментозная иммунотерапия предполагает использование фарма­кологических препаратов, точнее определенных групп этих препаратов, действующих на иммунную систему — иммуностимуляторов (иммуномодуляторов) и иммунодепрессантов.

Биотерапия — более новое направление терапии, основанное на использовании с лечебной целью агентов биологи­ческой природы, преимущественно получаемых с помощью современных биотехнологий —

- моноклональных антител,

-рекомбинантных цитокинов,

-молекул, созданных с помощью генной инженерии, а также клеток, как правило, клонированных.

 

Медикаментозная иммунотерапия

Очевидно, что при иммунодефицитах необходима иммуностимуляция, а при патологии, основанной на гиперчувствительности, — иммуносупрессия.

Задача подавления иммунитета стоит также при аллотрансплантации органов и тканей.

 

 

ИММУНОМОДУЛЯТОРЫ

 

I. Препараты на основе природных факторов:

1)препараты, происходящие из организма человека и высших позвоноч­ных:

—препараты иммуноглобулинов;

—пептидные препараты (пептиды тимуса и их аналоги, пептиды иной природы);

—цитокины и их рецепторы (интерфероны, интерлейкины, раствори­мые рецепторы цитокинов);

—

2)препараты бактериального происхождения:

—на основе компонентов клеточной стенки бактерий;

—на основе нуклеиновых кислот;

—прочие препараты микробного происхождения;

 

II. Синтетические препараты:

1)циклические соединения;

2)полиэлектролиты;

3)синтетические аналоги природных иммуномодуляторов;

4)другие синтетические иммуномодуляторы.

Препараты иммуноглобулинов

Среди средств иммунотерапии, в основе которых лежит преимущественно заместительный механизм действия, первыми следует назвать препа­раты иммуноглобулинов человека.

Их готовят из смеси сывороток крови, полученных от большого числа людей (не менее 5000).

Препараты иммуноглоублинов содержат естественные антитела к раз­личным патогенам.

В связи с этим их с успехом применяют для повышения резистентности к разнообразным инфекционным заболеваниям, особенно у лиц с иммунодефицитами.

Пептидные иммуномодуляторы

Препараты тимуса — тималин (В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон), тимозин, тимоген.

 

Получен ряд модификаций этого препарата:

-тимодепрессин.

-бестим.

-неоген.

Есть данные, что они усиливают выработку Th1-цитокинов, включая IL-2 и IFNy.

Предполагают, что эти препараты обусловливают некое «дозрева­ние» Т-лимфоцитов в периферическом отделе иммунной системы.

Показано, что эффекты тимусных пептидов не являются строго специфич­ными для Т-клеток.

Показания к использованию пептидных препаратов тимуса и их синте­тических аналогов — слабовыраженные иммунодефициты.

Наиболее адек­ватно применение этих препратов при подавлении выработки собственных пептидных гормонов тимуса, например при старении, действии неблаго­приятных факторов среды, включая облучение (т.е. заместительная тера­пия).

Преимущество пептидных препаратов тимуса — их безвредность: осложнения, в том числе аллергические, весьма редки.

 

Таким же мягким действием обладает отечественный препарат миелопид, представляющий комплекс пептидов, выделенных из костного мозга.

Первоначально считали, что эти препараты служат факторами дифференцировки В-лимфоцитов и их следует использовать при функциональной недостаточности этих клеток.

Изучение действия индивидуальных пептидов показало, что некоторые из них реализуют свою активность через Т-лимфоциты, другие — через макрофаги.

Влияние на В-клетки, если и проявляется, то посредством Т-лимфоцитов.

В настоящее время допущено для использо­вания в клинической практике 2 индивидуальных миелопептида.

К пептидным препаратам относят фактор переноса, первоначально полученный из диализата лейкоцитов человека.

Иммунотропное действие препарата имеет черты специфичности в отношении конкретных антиге­нов, что пока практически не поддается рациональному объяснению.

 

Иммуномодуляторы бактериальной природы

Первыми природными молекулами с установленным иммуномодулирующим действием были компоненты клеток микроорганизмов, в первую очередь эндотоксины.

Их практическое использование затрудняет не только токсичность, но и способность вызывать нежелательные поликлональные эффекты.

Тем не менее на основе бактериальных препаратов были созда­ны иммуномодуляторы, в частности, продигиозан.

Вакцинные препараты на основе Micobacterium tuberculosis и Corintbacterium parvum апробировали в качестве противоопухолевых средств с иммуномодулирующим действием.

Всем комплексным препаратам свойственно выраженное стимулирую­щее действие на иммунную систему, реализуемое через врожденное звено иммунитета.

Характер иммунотропного действия иммуномодуляторов бактериальной природы соответствует естественной роли микроорганизмов в развитии иммунных процессов.

Все они содержат PAMP (патоген ассоциированные молекулярные паттерны - образцы), оказывающие мощное стимулирующее действие на клетки врожденного иммунитета, а через них — на адаптивный иммунитет.

В то же время для препаратов этой группы свойственны недостатки, обусловленные их многокомпонентностью и нестандартностью.

 

Как потенциальный источник иммуномодулирующих молекул внимание исследователей достаточно давно привлекли пептидогликаны клеточной стенки микроорганизмов.

В России на основе модификации природных пептидогликанов разработан препарат ликопид (глюкозаминилмурамил-дипептид).

Спектр эффектов ликопида соответствует описанному выше типичному действию иммуномодуляторов бактериальной природы.

Ликопид реализует свое действие через разновидность патогенраспознающих рецепто­ров — NOD-рецепторы, локализованные внутриклеточно.

Основная мишень его действия — макрофаги.

Ликопид усиливает выработку цитокинов, экспрессию молекул гистосовместимости (в том числе MHC-II), молекул адгезии.

Его положительный эффект продемонстрирован при раз­нообразных заболеваниях и связан со стимуляцией иммунных процессов и корригирующим влиянием на иммунологические показатели.

Для ликопида характерны свойства иммунокорректора: он не влияет на исходно нормаль­ные показатели, а измененные доводит до уровня нормы.

 

К группе иммуномодуляторов микробного происхождения можно отнес­ти препараты на основе нуклеиновых кислот.

Обычно эти препараты полу­чают из микроорганизмов и дрожжей.

Главное действующее вещество этих препаратов — неметилировнные CpG -последовательности, свойственные ДНК микроорганизмов, активирующие клетки через толл-подобные рецепторы TLR-9.

Иммуностимулирующим действием обладают пиримидиновые основания (С, Т, U), входящие в состав нуклеиновых кислот.

Мишени действия препаратов на основе бак­териальных и дрожжевых нуклеиновых кислот — клетки, несущие TLR9 (в первую очередь клетки врожденного иммунитета, а также естественные киллеры и В-лимфоциты).

 

 

Синтетические иммуномодуляторы

Первые синтетические иммуномодуляторы были разработаны для дру­гих целей.

 

Так, декарис (левамизол), был создан как противоглист­ный препарат.

Однако оказалось, что он обладает иммуностимулирующим действием, причем его мишенью служат преимущественно Т-лимфоциты, функциональную активность (пролиферативный потенциал, секрецию цитокинов) которых он повышает.

В связи с этим левамизол использовали для иммунотерапии рака и иммунокоррекции при хронических легочных заболеваниях.

Однако в связи с токсичностью препарат перестали приме­нять в качестве иммуномодулятора.

 

Диуцифон был первоначально апробирован как антилепрозный химиопрепарат.

У него обнаружили многочисленные эффекты, мишенью которых служат Т-лимфоциты.

В частности, он оказался костимулятором выработки IL-2.

Показана эффективность диуцифона при ряде иммунодефицитных состояний, включая иммунодефициты, сопутствующие хроническим вос­палительным процессам, ожоговой болезни.

 

Полиоксидоний (азоксимера бромид).

Основная мишень препарата — макрофаги и В-лимфоциты.

Молекулярные механизмы его действия не раскрыты.

Применение препарата показано при вторичных иммунодефицитных состояниях на фоне хронических воспалительных про­цессов, злокачественных опухолей, цитотоксической терапии (химиотера­пия, лучевая терапия), при послеоперационных состояниях, ожоговой и других травмах.

В комплексе со средствами базовой терапии его рекомендуют использовать также при лечении аллергических и вирусных заболеваний.

 

Иммуномодулирующее действие в определенной степени может быть присуще различным средствам, относящимся к другим фармакологическим группам (например, дибазолу).

Благоприятное действие на иммун­ную систему оказывают также препараты общего действия (витамины, мик­роэлементы, адаптогены).

Адаптоге́ны — фармакологическая группа препаратов природного или искусственного происхождения, способных повышать неспецифическую сопротивляемость организма к широкому спектру вредных воздействий физической, химической и биологической природы.

 

ИММУНОДЕПРЕССАНТЫ

 

Химические иммунодепрессанты

В качестве иммунодепрессантов, особенно при пересадке органов, сначала использовали те же лекарственные средства, которые применяли в качестве цитотоксических агентов при лечении злокачественных опухолей.

Первым препаратом такого рода, использованным в иммунологии, был меркаптопурин.

В связи с высокой токсичностью возникла необходимость химической модификции этого вещества.

Так был получен препарат азатиоприн.

Другой широко применявшийся препарат этой группы — циклофосфамид.

Названные препараты объединяет общий принцип действия.

Являясь струк­турными аналогами азотистых оснований, входящих в состав нуклеотидов, они вмешиваются в синтез предшественников нуклеиновых кислот и нару­шают процесс репликации ДНК, что приводит к гибели клетки в процессе деления.

Таким образом, иммунодепрессанты первого поколения неизбира­тельно повреждают все делящиеся клетки, в том числе лимфоциты, всту­пившие в иммунный ответ, а также злокачестенные клетки.

Это объясняет наличие большого количества побочных эффектов, а также неспецифичность действия этих препаратов: они нарушают процессы гемопоэза, обновление тканей, вызывают опустошение лимфоидной ткани, подавляют все формы иммунного ответа, в том числе защиту от инфекционных заболеваний.

 

Существенным достижением на пути совершенствования иммунодепрессантов стало создание препарата циклоспорина.

Это циклический декапептид с метилированными остатками и наличием необычного нинеоненового аминокислотного остатка.

Он был выделен из почвенного гриба Tolypocladium inflatum, а в настоящее время синтезируется химически.

Вскоре из Streptomyces inflatum было выделено вещество FK506, ныне называемое т акролимусом, имеющее иную структуру, но очень схожий механизм действия.

Он состо­ит в предотвращении активации фосфатазы кальциневрина при связывании этих веществ с иммунофиллинами [циклоспорин — с циклофиллином, а такролимус — с белком FKBP (FK506-binding protein)].

Иммунофилины — внутриклеточные белки, с которыми специфически свя­зываются иммунодепрессивные препараты — циклоспорин А, рапамицин и такролимус.

Комплексы названных иммунодепрессантов с иммунофи-линами блокируют внутриклеточные пути проведения активационных сигналов в Т-лимфоцитах, в результате Т-лимфоциты не активируются и не развивается иммунное воспаление.

Кальциневрин (Calcineurin) - белок с ферментативными свойствами (точнее - это кальций-зависимая серин/треонин-фосфатаза).

 

В норме активация кальциневрина происходит под влиянием ионов Са²+.

Активированный кальциневрин дефосфорилирует фактор сNF-AT, благодаря чему этот фактор приобретает способность мигрировать в ядро и, связываясь с промоторами ряда генов, выполняя функцию одного из дифференцировочных факто­ров, запускающих активацию Т-клеток.

Взаимодействие иммунофиллинов с кальциневрином предотвращает усиление фосфатазной активности послед­него ионами кальция. Дефосфорилирования фактора NF-AT не происходит, он не перемещается в ядро и не участвует в активации лимфоцитов.

Таким образом, циклоспорин и такролимус нарушают активацию клетки, не убивая ее.

Расшифровка молекулярных основ действия этих веществ стала первым случаем такого рода для иммунотропных препаратов.

Иным механизмом действия, приводящего к сходному результату, обла­дает антибиотик рапамицин (сирулим), выделенный из стрептомицет.

Его внутриклеточным рецептором служит белок FKBP, но связывание рапамицина с FKBP влияет не на кальциневрин, а вызывает инактивацию одной из протеинкиназ, участвующих в активации гена а-цепи рецептора

IL-2 (CD25).

Таким образом, рапамицин приводит к аналогичному результату, блокируя восприятие сигнала от IL-2.

Циклоспорин и его функциональные аналоги обладают явными преиму­ществами перед всеми остальными иммунодерессантами, поскольку дейст­вуют прицельно на активируемые Т-клетки, при этом не повреждая их.

Проявляемая ими токсичность (эти вещества могут повреждать почки и ока­зывают ряд других побочных эффектов) выражена слабее, чем у цитотоксичес-ких препаратов.

Значительный прогресс в пересадке несовместимых органов однозначно связан с внедрением в практику этих иммунодепрессантов.

 

Глюкокортикоиды

О противовоспалительном и иммунодепрессивном действии глюкокортикоидов известно давно.

Однако очень скоро обнаружились многочисленные отрицательные последс­твия применения гормональных препаратов — от привыкания к ним до выра­женных побочных эффектов и осложнений (развитие язв, отеков, изменений костей и кожи, эндокринных нарушений, инфекционных осложнений).

При совершенствовании препаратов были достигнуты большие успехи: получе­ны лекарственные средства типа дексаметазона и бетаметазона с высокой активностью, более продолжительным действием и выраженным противо­воспалительным эффектом, не сопровождающимся задержкой ионов Na+.

Гормональные препараты на основе стероидов коры надпочечников до сих пор являются важнейшим компонентом в терапевтическом комплексе при лечении бронхиальной астмы, СКВ и других системных патологий соедини­тельной ткани и аллергических заболеваний.

В последнем случае очередной прогресс в использовании глюкокортикоидов был связан с разработкой пре­паратов для местного применения (преимущественно в виде спреев).

 

 

ИММУНОБИОТЕРАПИЯ

Использование цитокинов в качестве лекарственных препаратов

Раньше других нашли медицинское применение интерфероны (особенно IFN I типа) благодаря наличию у них антивирусной активности.

Ряд особенностей физиологии цитокинов осложняет их применение в качестве лекарственных средств.

• Как факторы преимущественно местного действия, цитокины, как правило, быстро выводятся.

Так, для IL-1, IL-2 и ряда других цитокинов время их полувыведения составляет минуты.

Это требует частых инъ­екций или непрерывного капельного (или с помощью микронасосов) вливания препаратов.

• Цитокины — полифункциональные молекулы.

В связи с этим трудно добиться целенаправленного эффекта от их применения без сопутству­ющих побочного действия или даже серьезных осложнений.

• Цитокины функционально взаимосвязаны и образуют единую цитокиновую сеть.

Введение цитокинов извне влияет на функционирова­ние сети, усиливает (реже ослабляет) выработку практически всех ее компонентов в результате чего результирующая реакция может быть обусловлена не введенным цитокином, а другими составляющими сети.

Например, при введении высоких доз IL-2 может развиться шок, подоб­ный септическому, за счет гиперпродукции TNFα.

В настоящее время область медицинского применения цитокинов отно­сительно узка.

Препараты цитокинов используют в нескольких областях медицины.

• Интерфероны α и β применяют в качестве антивирусных препаратов для лечения гепатитов В и С.

• IFN β используют для лечения рассеянного склероза.

• Препараты GM-CSF (молграмостим) и G-CSF (ф илграстим) используют для стимуляции соответственно грануломиело- и гранулопоэза, нару­шенных в результате химиотерапии, а также действия ионизирующей радиации.

G-CSF используют также для мобилизации стволовых кро­ветворных клеток в кровоток с последующим использованием крови в качестве источника этих клеток для восстановления гемопоэза, нару­шенного летальным облучением при лечении гемобластозов.

• Для лечения злокачественных опухолей применяют препараты.

Применение с той же целью препаратов IL-2 приос­тановлено.

В ограниченном масштабе применяют мутеины — генети­чески модифицированные производные TNFα и ряд других цитокинов.

Цитокины обычно вводят внутривенно, капельно, короткими курсами.

Несколько подробнее остановимся на использовании цитокинов для лечения злокачественных опухолей.

Цитокиновую терапию зло­качественных опухолей стали разрабатывать и внедрять в онкологическую клиническую практику с начала 80-х годов прошлого века, когда в экспери­ментах на мышах была показана противоопухолевая эффективность высоких доз рекомбинантного IL-2.

Вскоре этот подход был реализован в клиничес­кой практике и была показана его эффективность (положительный ответ на монотерапию в 20—25% случаев) при первичном раке почки и злокачествен­ной меланоме.

Недостатком метода были тяжелые осложнения, приводив­шие к летальному исходу в 2% случаев.

В настоящее время использование IL-2 для лечения опухолей приостановлено в связи с риском индукции регуляторных Т-клеток.

Более широкое распространение получило лечение с использованием рекомбинантных форм IFNα2.

 

 

Его применяют (также в высоких дозах) для лечения вышеупомянутых

иммунозависимых опухолей, а также лимфом, рака молочной железы, рака мочевого пузыря, некоторых сар­ком.

Противоопухолевое действие IFNα основано на способности усиливать

экспрессию молекул MHC-I, антипролиферативном эффекте, стимуляции дифференцировки Т-лимфоцитов в направлении Th1-клеток и ряде других эффектов.

Хотя лечение IFNα также дает осложнения, они проявляются реже и в менее выраженной форме, чем при лечении IL-2.

В настоящее время IFNα является единственным цитокином, прочно вошедшим во вспомогательный арсенал противоопухолевых препаратов.

Его используют на фоне базовой противоопухолевой терапии; показана его способность усиливать эффект химиотерапевтических препаратов.

Нативный TNFα при­меняют для локальных перфузий участков тела (например, конечностей), в которых расположена опухоль.

Разработано и используется в онкологической практике несколько препаратов мутеинов — продуктов мутантных генов TNFα с ослабленной токсичностью, способных избирательно взаимодейство­вать с рецептором TNFRI (р55), передающим сигналы к апоптозу клетки.

IFNγ, играющий столь важную роль в противоопухолевом иммунитете, в качест­ве лечебного препарата оказался недостаточно эффективным и способным давать осложнения, обусловленные неадекватной активацией макрофагов.

Аналогичные недостатки свойственны препаратам на основе IL-12. Некоторые побочные эффекты, вызываемые цитокинами, удается обойти, вынося этап их действия на клетки иммунной системы за пределы организма.

С лечебными целями используют преимущественно препараты рекомбинантных цитокинов.

В ограниченном масштабе применяют экстракты лей­коцитов, обогащенные цитокинами [отечественные препараты лейкинферон (интерферон лейкоцитарный человеческий) и суперлимф (препарат для местного применения, созданный Л.В. Ковальчуком)]; в последнем лечебная эффективность обусловлена не только цитокинами, но и дефензинами).

Дефензины (англ. defensin, от англ. defense — защита) — катионные пептиды иммунной системы, активные в отношении бактерий, грибков и многих оболочечных и без-оболочечных вирусов.

 

Наиболее часто проявляется 4 типа осложнений цитокинотерапии.

• Гриппоподобный синдром — недомогание, тошнота и рвота, боли в мышцах и суставах, а также другие проявления, характерные для начала инфекционных заболеваний, при которых эта симптоматика связана с выделением провоспалительных цитокинов.

• Шок, подобный септическому, без бактериемии — тяжелое осложнение, проявляющееся внутрисосудистым свертыванем крови, падением кро­вяного давления; обусловлен повышенной выработкой TNFα.

• Синдром протекания капилляров — патогенетически не до конца про­ясненное состояние, причиной которого служит повышение прони­цаемости капилляров преимущественно для жидкой части крови; оно проявляется развитием сначала насморка и диареи, а затем отека легких, часто смертельного.

• Синдром наркотической зависимости — проявляется особенно часто при лечении интерферонами.

 

Антицитокиновая терапия

Антицитокиновая терапия основана на применении антагонистов цитокинов.

Ее используют преимущественно при лечении воспалительных заболеваний аутоиммунной природы.

Разрабатывают подходы к ее исполь­зованию при аллергических заболеваниях.

В качестве противовоспалительных средств используют рекомбинантные аналоги природных белков — рецепторный антагонист IL-1 — raIL-1, растворимые рецепторы для TNFα (TNFRII), а также гуманизированные моноклональные антитела к TNFα (инфликсимаб, ремикейд).

Благоприятный клинический эффект препаратов на основе моноклональных антител к TNFα получен при ревматоидном артрите, болезни Крона, спондиллоартрите, ювенильном артрите, псориатическом артрите, псориазе, гранулематозе Вегенера, полиомиозите, рассеянном склерозе.

Антицитокиновая терапия для лечения аллергических заболеваний находится в процессе разработки.

Сообщалось об испытании при брон­хиальной астме и других аллергических заболеваниях гуманизированных моноклональных антител к ряду цитокинов, как имеющих прямое отно­шение к патогенезу аллергических процессов (IL-5, IL-4, IL-13, IL-9), так и к провоспалительным цитокинам TNFa, IL-1 и IL-25.

Испытаны также растворимые рецепторы для IL-4, моноклональные антитела к ним и IL-4-мутеины.

Несмотря на улучшение ряда лабораторных показателей, например, ослабление эозинофилии при лечении антителами к IL-5, кли­ническая эффективность препаратов оказалась в целом незначительной.

Только при высоких дозах наблюдали снижение риска развития обостре­ний. Умеренный клинический эффект получен от применения раствори­мых препаратов рецепторов для IL-4 и моноклональных антител к IL-13.

Более выраженный клинический эффект достигнут при использовании инфликсимаба (анти-TNFα), что согласуется с представлениями об участии TNFα в патогенезе бронхиальной астмы.

 

Использование моноклональных антител в иммунотерапии

Выше мы рассмотрели несколько примеров использования моноклональных антител к цитокинам в иммунотерапии воспалительных заболеваний.

Другая важная область применения лечебных препаратов на основе моно-клональных антител — онкология, в особенности лечение лейкозов.

С этой целью используют антитела к мембранным молекулам, характерным для клеток, вовлеченных в лейкозный процесс, и экспрессированым на них с плотностью, достаточной, чтобы вызвать элиминацию клеток (путем комплемент зависимого цитолиза, фагоцитоза опсонизированных клеток или антителозависимого контактного цитолиза).

Наиболее яркий пример препарата, успешно используемого для лечения хронического В-клеточного лимфолейкоза — препарат мабтера (ритуксимаб) на основе моноклональных антител к мембранной молекуле CD20, являющейся одной из маркерных молекул В-лимфоцитов.

Другой пример лечебных моноклональных антител — антите­ла к молекуле СD52 — СAMPATH.

Антитела обоих типов принадлежат к клас­су IgG, который характеризуется медленным выведением из организма, что облегчает создание необходимой концентарции антител.

Все моноклональные антитела, используемые в иммунотерапии, исходно мышиные.

Однако с помощью генно-инженерных процедур все их составные части, кроме V-гена или гипервариабельных участков, заменены на человеческие.

Такие моноклональные антитела называют гуманизированными.

Для лечения солидных опухолей разрабатывают препараты иммунотоксинов — молекул, совмещающих прицельность антител с цитотоксичностью растительных токсинов.

Для этого полумолекулу (состава HL) моноклональных антител, специфичных к маркерной молекуле опухоли, ковалентно связывают с токсической субъединицей растительного токси­на, чаще всего рицина или винкулина.

Благодаря прицельной доставке молекулы иммунотоксина к опухолевой клетке (за счет специфичности активного центра антитела) цитолиз клетки-мишени может быть достигнут при концентрации иммунотоксина, практически безвредной для организма.

Известны варианты этого подхода — использование вместо ток­сина радионуклида, комплексирование двух антител с разной специфич­ностью, направленной против опухолевого антигена и эффекторной клетки (для их сближения).

Однако эти подходы при их очевидной привлекатель­ности пока не нашли широкого практического применения из-за недоста­тка моноклональных антител в отношении опухолевых клеток точной эффективности и возможного риска проявления общетоксического эффекта препаратов.

 

Цитотерапия и генотерапия

В связи с тем, что цитокинотерапия злокачественных опухолей нередко сопровождается осложнениями, было разработано направление биотера­пии, основанное на использовании клеток иммунной системы, обработан­ных цитокинами вне организма.

Оно получило наименование адоптивной (от adoptive — приемный) иммуноцитотерапии.

 

Принцип дан­ного подхода состоит в том, чтобы вынести этап действия на иммуноциты токсичных цитоикнов за пределы организма и вводить в него уже акти­вированные аутологичные клетки.

Известно 3 варианта клеток, использу­емых в адоптивной цитотерапии — LAK-, CIK- и TIL-клетки.

LAK-клетки (лимфокин активированные клетки)-это NK-клетки, стимули­рованные in vitro IL-2 или другими цитокинами в течение 5—7 сут, в резуль­тате чего они приобретают способность лизировать более широкий спектр трансформированных клеток, чем обычные NK-клетки.

CIK-клетки (цитокин-индуцированные клетки) — это мононуклеары (или очищенные CD8 + Т-клетки), активирован­ные моноклональными антителами к CD3 с добавлением смеси IL-2, IL-1 и IFNy, что обеспечивает поликлональную пролиферацию толь­ко Т-лимфоцитов и их дифференцировку в цитотоксические Т-клетки.

TIL-клетки (опухоль инфильтрирующие Т-лимфоциты).

Реактивация цитокинами in vitro значительно повышает их способность лизировать опухоле­вые клетки.

 

Разрабатывают также методы сочетания цитотерапии с генотерапией.

Последняя состоит в переносе клеток, в которые предварительно трансфецированы гены, кодирующие вещества с противоопухолевой актив­ностью, чаще всего цитокины (IFNγ, TNFα, IL-2, IL-12 и др.).

Гены могут внедрять в сами опухолевые клетки, в клетки стромы опухоли или в TIL.

Трансфецированные клетки вводят в опухоль, в которой они секретируют цитокины, что обеспечивает их оптимальную доставку к мишеням — опухолевым клеткам или эффекторным клеткам иммунной системы.

Генотерапию используют (пока в очень ограниченном масштабе) для лечения первичных иммунодефицитов.

Наиболее успешным оказалось использование этого подхода для лечения варианта ТКИН (тяжелая комбинированная иммунная недостаточность) с дефицитом аденозин_дез-аминазы.

В аутологичные клетки костного мозга больного трансфецируют ген ADA и трансплантируют их в организм.