Проведите анализ мочи на полуавтоматическом мочевом анализаторе. Оцените результаты с позиции «норма-патология».
Для проведения анализа потребуется: мочевой анализатор, диагностические полоски, бумажные салфетки, центрифужные пробирки, штатив, стакан с 0,1% экомином для каретки, лоток, контейнер с экомином.
1. Налить 10 мл мочи в центрифужную пробирку.
2. Достать нужное количество полосок из контейнера, не касаясь руками тестовых зон, немедленно закрыть контейнер.
3. Нажмите кнопку «START»
4. Погрузить полностью полоску в мочу на 2 сек.
5. Вынуть полоску из пробы, провести ею по край контейнера, чтобы удалить излишки мочи, или промокнуть на абсорбирующую бумагу.
6. Держать полоску в горизонтальном положении во избежание смешивания химических веществ из разных тестовых зон.
7. Поместить полоску в каретку в течение 50 сек. тестовыми зонами вверх так, чтобы она упиралась в бок каретки.
Процесс анализа проводится анализатором путем измерения каждого поля полоски последовательно шаг за шагом.
8. Подождать, пока каретка с полоской выедет назад, результаты будут распечатаны.
9. Удалить использованную полоску из кареты и выбросить ее в контейнер с отходами.
10. Вынуть каретку, поместите в стакан с 0,1% экомином на 10 мин так, чтобы светлый прямоугольник остался выше уровня жидкости.
11. Промыть водой и вытереть насухо ветошью.
12. Поместить обратно в прибор.
Задание 1. Решите ситуационную задачу
В лабораторию доставлен полупрозрачный эякулят в объёме 2 мл. Пациент исследуется по поводу отсутствия зачатия при регулярной половой жизни в течение года.
Задания к задаче
1. Подготовьте эякулят для подсчета количества сперматозоидов в 1 мл эякулята.
2. Заполните камеру Горяева и расскажите, как провести подсчет сперматозоидов в 1 мл.
3. Расскажите, как подсчитать общее количество сперматозоидов в эякуляте.
Эталон ответа
1. Для проведения анализа потребуется: центрифужные пробирки, пастеровские пипетки, раствор Барбагалло, камера Горяева, микроскоп, лоток, спиртовые салфетки, контейнер с 6% перекисью водорода, контейнер с экомином.
Для подсчета количества сперматозоидов в камере Горяева необходимо обездвиживание сперматозоидов и разведение спермы раствором Барбагалло. Так как эякулят имеет повышенную вязкость, то для взятия точного объема рекомендуется использовать пипетки.
Развести эякулят. Если число сперматозоидов в поле зрения 15-20 - разводят 1:10;
если 40-200 - 1:20; если более 200 - 1:50.
2. Заполнить камеру Горяева. Подсчитывают сперматозоиды в 5 больших квадратах по диагонали (как эритроциты). Считают только те сперматозоиды, головки которых лежат внутри квадратов.
Расчет ведут по формуле:
X= A x 50 000 x степень разведения
Где Х - количество сперматозоидов в 1 мл, А – количество сперматозоидов в 5 больших квадратах.
Если сперматозоидов очень мало (менее 1-2 в поле зрения при х400), рекомендуется центрифугировать эякулят в течение 15 мин со скоростью 1500 об/мин, удалить надосадочную семенную плазму, измерить ее объем, подсчитать количество сперматозоидов в счетной камере Горяева и оценить их подвижность. В бланке-ответе отметить, что сперма была подвергнута центрифугированию, так как этот процесс влияет на подвижность и морфологию сперматозоидов.
3. Общее количество сперматозоидов в эякуляте рассчитывают, умножая количество сперматозоидов в 1 мл спермы на объем доставленной в лабораторию спермы. В норме в 1 мл эякулята должно содержаться не менее 20 млн сперматозоидов. Общее количество – не менее 40 млн сперматозоидов.
Задание 2. Выполните манипуляцию
Покрасьте вагинальный мазок метиленовым синим и промикроскопируйте готовый препарат. Выпишите результаты, оцените с позиции «норма-патология».
Для проведения анализа потребуется: 1% водный раствор метиленового синего, кювета для окраски мазков, предметное стекло, готовый препарат вагинального мазка, стакан с водой, лоток, микроскоп, спиртовые салфетки, иммерсионное масло, контейнер с экомином.
1. Налить на приготовленный препарат 1% водный раствор метиленового синего на 1-2 минуты.
2. Смыть и высушить препарат.
3. Микроскопировать с иммерсионной системой при увеличении x 100 и оценить результат.
4. Оценить результат с позиции «норма-патология».
Ядра окрашиваются – в синий цвет, а цитоплазма – в голубой. В норме во влагалищном отделяемом должны быть лактобациллы, немного клеток плоского эпителия, единичные лейкоциты (до 10-15 в п/зр.).
Задание 1. Решите ситуационную задачу
В лабораторию поступила мутная моча. При исследовании лаборант приступил к определению белка, не устранив мутность.
Задания к задаче
1. Подготовьте мочу к исследованию на белок.
2. Определите белок в моче качественно с 20% сульфосалицилловой кислотой.
3. Дайте классификацию видов протеинурии.
4. Укажите, какую лабораторную посуду обеззараживают в 6% перекиси водорода.
Эталон ответа
1. Белок под действием сульфосалициловой кислоты коагулирует, что приводит к появлению мути. Во избежание ложноположительного результата перед определением белка определяют прозрачность мочи визуально на черном фоне (моча должна быть прозрачной). Для устранения мути 10 мл исследуемой мочи наливают в центрифужную пробирку и центрифугируют 5 мин при 1500 об/мин.
Также перед определением белка определяют рН (моча должна быть кислой реакции); мочу с щелочной реакцией подкисляют 2-3 каплями 30 % СНЗСООН на 10 мл мочи.
2. Для проведения анализа потребуется: центрифужные пробирки, штатив, центрифуга, пастеровские пипетки, 20% сульфосалициловая кислота, лист черной бумаги, контейнер с экомином.
Налить в центрифужную пробирку 10 мл мочи.
Процентрифугировать мочу 5-10 мин. при 1500 обор/ мин.
Внести в две пробирки 1-2 мл центрифугированной мочи.
Капнуть в одну пробирку 2-3 капли 20% сульфосалициловой кислоты. Другая пробирка служит контролем (реактив в нее не добавляют).
Сравнить 1 и 2 пробирку на темном фоне.
Оценить результат: если жидкость помутнела, значит, в моче есть белок.
3. В зависимости от причины, вызвавшей протеинурию, различают:
1) преренальную (ожоги, опухоли);
2) ренальную (почечную);
3) постренальную протеинурию.
Ренальная протеинурия в свою очередь делится на функциональную и органическую.
Функциональные (физиологические): ортостатическая (юношеская), алиментарная, после переохлаждения, после физической нагрузки.
Функциональная почечная протеинурия обусловлена временным преходящим увеличением фильтрации белков крови в ответ на сильные внешние раздражения и не связана с поражением почек и мочевыводящих путей.
Органическая - обусловлена поражением почечного нефрона (клубочковая и канальцевая).
Клубочковая протеинурия наблюдается при всех заболеваниях почек, протекающих с поражением клубочков (острый и хронический гломерулонефрит, сахарный диабет, опухоль почки).
Канальцевая протеинурия развивается при острой и хронической почечной недостаточности, пиелонефрите и т.д. При ренальной форме протеинурии в моче обычно присутствуют цилиндры.
Постренальная (внепочечная) протеинурия чаще всего связанна с воспалительной экссудацией (заболеванием мочевого пузыря, мочеиспускательного канала, половых органов). Сопровождается появлением в моче большого количества лейкоцитов или эритроцитов.
4. Кварцевые, стеклянные, пластмассовые кюветы и пробирки измерительной аппаратуры, счетные камеры обеззараживают погружением в 6%-ный раствор перекиси водорода на час и промывают проточной водой.