| Dirofilaria immitis | Dirofilaria repens | Dipetalonema reconditum | Dipetalonema dracunculoides | |
| Длина (мкм): | 262,1-338,2 | 274,6-361,9 | 241,2-286,9 | 190,8-211,8 |
| Ширина (мкм): | 4,0-6,2 | 5,8-7,3 | 3,8-5,0 | 4,8-5,8 |
| Передний конец | конический | прямоугольный | тупой | конический |
| Задний конец | прямой | прямой | часто крючко-образный | прямой |
Для обнаружения микрофилярий в крови можно также применять метод Куликова, который заключается в следующем: 20 мл венозной крови смешивают с 2 мл 3,8%-ного водного раствора лимоннокислого натрия (цитрата натрия) и отстаивают 20-25 минут. По истечении этого времени в пробирке образуется 3 слоя: внизу - эритроциты, в середине - лейкоциты и микрофилярии, вверху - плазма крови. Берут пипеткой средний слой, каплями наносят на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и исследуют при малом и среднем увеличении микроскопа.
Все вышеперечисленные методы не предусматриваютколичественного учета микрофилярий в крови. Однако для определения интенсивности инвазии, изучения сезонной и возрастной динамик инвазированности и оценки эффективности лечебно-профилактических мероприятий при дирофиляриозах собак определение количественных показателей необходимо. Поэтому Архиповой Д.Р. (2003) разработан количественный метод прижизненной диагностики дирофиляриозов собак, основанный на применении меланжера для подсчета количества лейкоцитов и счетной камеры Фукс-Розенталя. Меланжер до метки I заполняют кровью и до метки II раствором, состоящим из ледяной уксусной кислоты, раствора Фуксина и дистиллированной воды в соотношении 3:4:93. Для равномерного смешивания меланжер с кровью и раствором кладут на вибратор на 2-3 минуты. К чистой и сухой камере Фукс-Розенталя притирают покровное стекло до появления колец Ньютона. Затем раствор в меланжере встряхивают и каплю (но не первую) раствора наносят на среднюю часть пластинки камеры и при увеличении микроскопа в 100 раз подсчитывают количество микрофилярий во всех квадратах. Полученное количество личинок умножают на 6,23, так как для 20 мм3раствора потребовалось бы 6,23 объема камеры. Для определения количества микрофилярий в 1 мл крови число выявленных микрофилярий в 20 мм3 умножается на 50.
Эффективность описанных методов может повышаться при их комплексном применении. Однако ни один из этих методов не может исключать дирофиляриоз окончательно из-за распространенности амикрофиляриемической формы болезни и при небольшом количестве циркулирующих в крови личинок. Амикрофиляриемическая форма дирофиляриоза связана, очевидно, с развитием иммунологических реакций, приводящих к лизису микрофилярий. При амикрофиляриемической форме врач вынужден ставить диагноз на основании клинических, патологоанатомических, иммунологических, и рентгенографических методов диагностики.
Метод непрямой иммунофлюоресценции используется, с целью обнаружения антител к микрофиляриям, и может использоваться для диагностики дирофиляриоза при наличии микрофилярий в крови, и в тех случаях, когда личинки отсутствуют из-за иммунного разрушения. Также разработан метод иммуноферментного анализа при диагностике дирофиляриоза (ELISA), при помощи которого можно обнаружить антитела к дирофиляриям или сам антиген. Тесты, обнаруживающие непосредственно дирофиляриозный антиген, являются более предпочтительными. Метод непрямой иммунофлюоресценции и ИФА разработаны за рубежом, где стали широко использоваться из-за их точности, чувствительности, специфичности и быстроты исполнения.
Рентгенография грудной полости хотя и не является наилучшим методом для обнаружения дирофилярий, но позволяет косвенно определить степень инвазии по оценке изменений в сердце и легких. Рентгенографические изменения включают увеличение правого желудочка, расширение легочной артерии в месте ее выхода из сердца, расширение и увеличение рентгенографической плотности легочных артерий, а также извитость легочной артерии. Если при этом присутствует сердечная недостаточность, то отмечается увеличение синуса полых вен, печени и селезенки, а также наблюдается плевральный выпот или асцит.
Электрокардиография позволяет обнаружить аритмии, но по сравнению с рентгенографией не дает возможности выявить увеличение полостей сердца. Если по результатам рентгенографии нельзя предположить дирофиляриоз, то маловероятно, что электрокардиограмма поможет установить эту инвазию. Обнаружение увеличения правого желудочка позволяет заподозрить дирофиляриоз.
Эхокардиография относительно более чувствительна в обнаружении индуцированного гельминтами увеличения правого отдела сердца. Перекрестная эхокардиография может время от времени демонстрировать гельминтов в легочной артерии.
Гематологические (морфологические) и биохимические изменения показателей крови не позволяют поставить точный диагноз на дирофиляриоз, но помогают определить патологические изменения в органах и тканях, которые могут быть связаны с дирофиляриозом.
Наиболее часто при дирофиляриозах встречаются гипохромная нерегенеративная анемия, нейтрофилия, эозинофилия и базофилия. В тяжелых случаях, особенно, если присутствует сердечная недостаточность, повышается активность АлАТ и АсАТ, иногда отмечается гипербилирубинемия. Азотемия, может быть вне почечного происхождения, если присутствуют дегидратация или порок сердца, или может быть вторична при гломерулонефрите. Гломерулонефрит может усложнять клиническую картину.
При исследовании мочи редко выявляют изостенурию, чаще наблюдается альбуминурия.
Результаты исследований Архиповой Д.Р. (2003) показали, что наиболее патогенными являются дирофилярии вида D. immitis, которые вызывают снижение количества эритроцитов, гемоглобина, СОЭ и повышение количества лимфоцитов и эозинофилов. D. repens, паразитируя в организме собак вызывают менее выраженные изменения в показателях крови. В биохимических показателях крови собак также наблюдаются более существенные изменения при дирофиляриозе, вызванном D. immitis.
В случаях когда диагноз на дирофиляриоз приходиться ставить без обнаружения микрофилярий в крови (при отрицательных 2-3-х кратных исследованиях с интервалом в 1-2 недели) можно сделать следующие выводы:
1. До постановки диагноза для лечения был использован микрофиляриоцид, о чем неизвестно врачу.
2. Возможно, что у собаки паразитируют только самцы или самки.
3. Дирофилярии не достигли половой зрелости и не отрождают личинок.
4. Собака страдает от болезни сердца или сосудов другой этиологии.
При отсутствии половозрелых дирофилярий и при обнаружении микрофилярий:
1. Возможно, что половозрелые дирофилярии погибли несколько месяцев назад, а микрофилярии остались в крови.
2. Обнаруженные микрофилярии были личинками Dipetalonema sp. или некоторых других филяриид.
Используя существующие методы, невозможно определить количество половозрелых дирофилярий в организме, исходя из числа обнаруженных микрофилярий.