(практические, семинарские, лабораторные)
Тема 22. - Решение экспертной задачи по проведению ненаправленного, химико-токсикологического анализа на вещества, изолируемые экстракцией водой:
- выполнение предварительных испытаний анализируемой пробы;
- проведение химико-токсикологического исследования;
- написание экспертного заключения (заключение химико-токсикологической экспертизы).
Цель: освоение студентами ненаправленного лабораторного поиска токсиканта:изолирование и обнаружение минеральных кислот, едких щелочей и их солей.
Задачи обучения: научиться проводить методы изолирования и обнаружения минеральных кислот, едких щелочей и их солей.
Форма проведения: групповое обсуждение теоретического материала и выполнение заданий парами студентов.
Задания по теме:
Задание 1 (групповое обсуждение теоретических вопросов по теме занятия)
1. Характеристика группы веществ, изолируемых экстракцией водой в сочетании с диализом. Токсичность.
2. Обоснование выбора объекта исследования.
3. Какие предварительные испытания проводят на анализируемую пробу.
4. Особенности анализа и токсикологическое значение отдельных веществ, входящих в данную группу.
5. Написание экспертного заключения (акта химико-токсикологической экспертизы).
Задание 2 (для 2 студентов).
Токсикологическая химия. Ситуационные задачи и упражнения. Под ред. Н.И. Калетиной. –М. -2007. -С. 312.
Ситуационная задача № 8.
На ХТА доставлены: моча, кровь, рвотные массы пострадавшего; остатки жидкости во флаконе.
Обстоятельства дела.
Вбольницу г. Н. был доставлен пациент с явными признаками ожога слизистой оболочки полости рта, пищевода и желудка. Пострадавшего нашли лежащим без сознания на улице. В кармане плаща обнаружили флакон с остатками бесцветной жидкости без запаха.
Информация
Со слов друга. Пострадавший последние 2 дня был в подавленном состоянии после ссоры с женой и утром не вышел на работу.
При анализе жидкости, содержащейся во флаконе, получены следующие результаты. Реакция с гексагидроксостибатом калия положительная: образуется белый микрокристаллический осадок. Реакция с цинкуранилацетатом положительная: образуются характерные желтые октаэдрические и тетраэдрические кристаллы.
При первичном исследовании содержимого желудка и рвотных масс было установлено,что:
• спиртовой раствор фенолфталеина дал малиновое окрашивание.
• лакмус посинел в парах исследуемых рвотных масс.
Цель исследования: провести ХТА представленных биообъектов.
Приведите схему химико-токсикологического анализа представленных биообъектов, опираясь на методологию системного химико-токсикологического анализа (СХТА).
Лаборатория работает согласно принципам GLP и оснащена аналитическим оборудованием в соответствии с современными рекомендациями TIAFT.
ПРИМЕЧАНИЕ
При решении задачи следует:
• представить информацию о выборе биообъекта, используя знание физико-химических свойств токсикантов, их токсикокинетики и метаболизма;
• представить информацию о способе пробоподготовки и изолирования (выделения) токсикантов, используя знание физико-химических свойств токсикантов и учитывая Ваш выбор последующих методов анализа;
• выбрать методы идентификации и количественного определения токсикантов, учитывая их чувствительность и специфичность, преимущества и недостатки;
• обосновать выбор способа количественного определения, поэтапно изложить схему и процедуру его проведения, привести математические формулы; если необходимо, то произвести вычисления;
• представить интерпретацию полученных количественных результатов;
• дать заключение об обнаружении токсикантов.
Задание 3 (для 2 студентов). Написание экспертного заключения по 2-му заданию (акта судебно-химического исследования).
Литература
1. Токсикологическая химия: метаболизм и анализ токсикантов: учебное пособие + СD/ под ред. Н.И. Калетиной. – М., 2008. – 1016 с. Переплет.
2. Токсикологическая химия: учебник / под ред. Т.В. Плетеневой. – 2-ое изд. – М., 2008. – 512 с. Переплет.
3. Крамаренко В. Ф. Токсикологическая химия / В. Ф. Крамаренко. - Киев, «Высшая школа», 1989. - 272с.
4. Швайкова М.Д. Токсикологическая химия/ М.Д. Швайкова. - М., «Медицина», 1975. -376 с.
Контрольные вопросы:
1. Характеристика кислот, щелочей и солей щелочных металлов, изолируемых экстракцией водой в сочетании с диализом. Токсичность.
2. Какие предварительные испытания проводят на анализируемую пробу.
3. Особенности анализа и токсикологическое значение отдельных веществ, входящих в данную группу.
4. Написание экспертного заключения (акта судебно-химического исследования).
ПРИЛОЖЕНИЕ
1. Ненаправленный лабораторный поиск токсиканта с последовательным определением в биологическом материале веществ разных классов (например, барбитуратов, фенотиазинов, хлорированных углеводородов, опиатов и др.) занимает много времени. Чаще всего поступающие для исследования материалы не содержат указаний на направление поиска. В сопроводительных документах, как правило, пишут: «Отравление токсикантом неизвестной природы» - в таком случае требуется проведение не направленного ХТА.
2. Изолирование кислот, щелочей, солей Исследуемый объект смешивают с небольшим количеством дистиллированной воды до образования густой кашицы, способной фильтроваться, и смесь через 1—2 ч фильтруют. Для отделения белковых веществ смесь (даже до фильтрования) или фильтрат подвергают диализу. Диализ проводят 2—3 раза по 4—6 ч. Слитые вместе диализаты выпаривают на водяной бане до объема 5—10 мл и исследуют на наличие кислот, щелочей и солей. Перспективен для этих целей электродиализ.
3. Исследование веществ, изолируемых экстракцией водой в сочетании с диализом, на наличие этих веществ в биоматериале проводится тогда, когда предварительные испытания дают для этого основания или материалы дела указывают на возможность отравления указанными веществами.
Анионы неорганических и некоторых карбоновых кислот в биологических жидкостях и тканях в настоящее время определяют методами газовой хроматографии, ВЭЖХ, ионной хроматографии, капиллярного электрофореза, масс-спетрометрии с индуктивно-связанной плазмой, флюорометрии, электрохимическими, биохимическими и другими методами. Наиболее распространенным способом анализа смеси анионов, включающей бромид -, йодид-, цианид-, роданид-, нитрит- и сульфид-ионы, в биологических жидкостях является перевод их в летучие пентафторбензильные производные. Химические и биохимические методы также применимы в ряде случаев. Объектами исследования на наличие этой группы веществ являются содержимое желудка, рвотные массы, остатки пищи, части одежды и др. При исследовании на соли к перечисленным объектам следует отнести также печень.