Для определения содержания вещества методом градуи-ровочного графика готовят серию из 5-8 стандартных растворов разных концентраций (не менее 3 параллельных растворов для каждой точки).
При выборе интервала концентраций стандартных растворов руководствуются следующими положениями:
• он должен охватывать область возможных изменений концентраций исследуемого раствора, желательно, чтобы оптическая плотность исследуемого раствора соответствовала примерно середине градуировочной кривой;
• желательно, чтобы в этом интервале концентраций при выбранных толщины кюветы I и аналитической длины волны лсоблюдался основной закон светопоглощения, т. е. график D = /(С) был линейным;
• интервал рабочих значений D, соответствующий интервалу стандартных растворов, должен обеспечивать максимальную воспроизводимость результатов измерений.
При совокупности перечисленных условий измеряют оптические плотности стандартных растворов относительно растворителя и строят график зависимости D = /(С).
Полученная кривая называется градуировочной (градуи-ровочным графиком).
Определив оптическую плотность раствора Dx, находят ее значения на оси ординат, а затем на оси абсцисс — соответствующее ей значение концентрации Сх. Этот метод применяют при выполнении серийных фотометрических анализов.
Метод добавок
Метод добавок представляет собой разновидность метода сравнения. Определение концентрации раствора этим методом основано на сравнении оптической плотности исследуемого раствора и того же раствора с добавкой известного количества определяемого вещества. Метод добавок обычно применяют для упрощения работы, для устранения мешающего влияния посторонних примесей, в ряде случаев для оценки правильности методики фотометрического определения. Метод добавок требует обязательного соблюдения основного закона светопоглощения.
Неизвестную концентрацию находят расчетным или графическим способами.
При соблюдении основного закона светопоглощения и постоянной толщине слоя отношение оптических плоскостей исследуемого раствора и исследуемого раствора с добавкой будет равно отношению их концентраций:
откуда
где Dx — оптическая плотность исследуемого раствора;
Dx + a — оптическая плотность исследуемого раствора с добавкой;
Сх — неизвестная концентрация исследуемого вещества в исследуемом окрашенном растворе;
Са — концентрация добавки в исследуемом растворе.
Источник:https://www.znaytovar.ru/new117.html
Метод градуировочного графика. Для определения содержания вещества методом градуировочного графика при выбранных оптимальных условиях обычно готовят серию не менее чем из 5 стандартных растворов разных концентраций (не менее 3 параллельных растворов для каждой точки).
При выборе интервала концентраций стандартных растворов руководствуются следующими положениями:
1) интервал должен охватывать область возможных изменений концентраций исследуемого раствора; желательно, чтобы оптическая плотность исследуемого раствора соответствовала примерно середине градуировочной кривой;
2) желательно, чтобы в этом интервале концентраций при выбранных толщине кюветы (l) и аналитической длине волны l * (в большинстве случаев l = l макссветопоглощающего соединения) соблюдался основной закон светопоглощения, т. е. график А = f (c) был прямолинейным;
3) интервал рабочих значений А, соответствующий интервалу стандартных растворов, должен обеспечивать максимальную воспроизводимость результатов измерений (минимальное отношение), т. е. A » 0,14–1,9**. Однако следует иметь в виду, что на практике при значениях А ³ 1,1–1,3 часто наблюдается уже нелинейный характер зависимости А = f (c).
При совокупности перечисленных условий измеряют оптические плотности стандартных растворов относительно растворителя и строят график зависимости А = f (с). Полученная кривая (рис. 14.4.18) называется градуировочной (градуировочным графиком). Периодически (раз в неделю или реже) ее проверяют по двум-трем свежеприготовленным стандартным растворам.
Рис. 14.4.18. Градуировочный график
Вопрос № 9 условия ф.о
Для достижения высокой воспроизводимости и правильности результатов фотометрического анализа важное значение имеют селективность выбранного реагента и условия проведения фотометрических определений.
Выбор реагента
Реагент для фотометрического определения выбирают, прежде всего, исходя из специфичности взаимодействия анализируемого вещества с определенными аналитическими группами органических реагентов. Например, для никеля специфическими реагентами являются органические вещества, содержащие оксимную гpyппy=N-ОН, для кобальта—реагенты, содержащие в ортоположении группы -N=О и -ОН, для меди — реагенты, содержащие тио- и аминогруппы одновременно и т. д. Необходимо также, чтобы окрашенные соединения удовлетворяли требованиям устойчивости и постоянства состава.
Для оценки специфических реагентов используют критерии, сформулированные А.К. Бабко [19]. Лучшим реагентом при прочих равных условиях считают такой, который при образовании окрашенного соединения обеспечивает:
1. Наибольшее смещение максимума поглощения D l = l к – l R (где l к и l R — длины волн максимального поглощения комплекса и реагента), характеризующее контрастность реакции. Контрастность фотометрической реакции считается достаточно высокой, если обеспечивается D l = l к – l R ³ 100 нм.
2. Наибольшие абсолютное и относительное изменения молярного коэффициента светопоглощения: D e = e к – e R и 
.
В тех случаях, когда молярные коэффициенты светопоглощения комплекса и реагента неизвестны, реагенты выбирают по наибольшей разности между суммарной оптической плотностью раствора А см и оптической плотностью реагента: D А = А см – АR.
3. Наибольшую разность в значениях рН при образовании окрашенных форм комплекса и реагента: D рН = рНк – рН R.
4. Наибольший интервал значений рН, в котором соблюдается постоянство оптической плотности раствора.
Практическим критерием чувствительности реагента служит угол наклона прямой, характеризующей зависимость оптической плотности (или разности оптических плотностей) от концентрации окрашенного вещества. Графическая, зависимость определяется при длине волны, где значение А (или D А) является максимальным. Чем больше угол наклона (или тангенс угла наклона) этой прямой, тем чувствительнее реагент.
Аналогично по тем же критериям можно оценивать селективные и групповые фотометрические реагенты, но их практическое применение для определения отдельных элементов возможно только в отсутствие мешающих компонентов либо в специальных условиях, при которых мешающее влияние сопутствующих элементов проявляется в незначительной степени.
В тех случаях, когда фотометрическая реакция характеризуется невысокой контрастностью и при выбранной длине волны наблюдается светопоглощение не только анализируемого комплекса, но и фотометрического реагента, находят разность оптических плотностей анализируемого комплекса и чистого реагента при той же концентрации, что и в анализируемом растворе.
Однако эту разность оптической плотности можно отождествлять с оптической плотностью раствора светопоглощающего комплекса только в тех случаях, когда светопоглощение комплекса и реагента обусловлено разными хромофорными группами, что на практике встречается сравнительно редко. Если светопоглощение комплекса и реагента обусловлено одной и той же функциональной группой, то этот прием можно использовать только в условиях большого избытка реагента, когда концентрацией реагента, затраченной на комплексообразование, можно пренебречь.