МЕТОДЫ И ТЕХНИКА МИКРОСКОПИИ.

Основными видами работы на лабораторных занятиях по гистологии являются самостоятельное микроскопирование и изучение гистологических препаратов. Анализируя структурные особенности гистологических объектов и характерные для них тинкториальные свойства, исследователь имеет возможность получить представление о функциональном состоянии изучаемых клеток, тканей и органов. Существенно дополняет эту информацию использование гистохимических методов и специальных микроскопических методов исследования. Успешное овладение микроскопической техникой и методами гистологического исследования создает условия для более глубокого изучения материала.

Цели занятия

• Ознакомиться с содержанием основных этапов изготовления фиксированного и окрашенного гистологического препарата.
• Получить представление о тинкториальных свойствах структур в гистологическом препарате.
• Познакомиться с принципами работы и использования приборов специальной микроскопии в исследовательских целях.
• Закрепить навыки микроскопирования гистологического препарата.

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ВНЕАУДИТОРНОЙ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЕ СТУДЕНТОВ

НЕОБХОДИМЫЙ ИСХОДНЫЙ УРОВЕНЬ ЗНАНИЙ

Из курса физики

1. Основные оптические приборы, используемые для микроскопирования.
2. Ход лучей в световом и электронном микроскопах.
3. Разрешающая способность и увеличение микроскопа.

По теме занятия

1. Методы исследования в гистологии.
2. Окраска срезов и тинкториальные свойства гистологических структур.

ЛИТЕРАТУРА ДЛЯ САМОПОДГОТОВКИ

1. Быков В.Л. Цитология и общая гистология (функциональная морфология клеток и тканей человека). – СПб: СОТИС, 2004 или 2007 г. (с. 12 -30)

2. Гистология, цитология и эмбриология. под редакцией Афанасьева Ю.И., Юриной Н.А. – М: «Медицина», 2002 г. (с. 9 - 21)

3. Гистология, эмбриология и цитология. под редакцией Улумбекова Э.Г., Челышева Ю.А. 3-е издание переработанное и дополненное. – М: ГЭОТАГ – Медицина, 2007 г. (с. 92 -101)

4. Кузнецов С.Л., Мушкамбаров Н.Н. Гистология, цитология и эмбриология: Учебник для медицинских вузов. – М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2007 г (с. 19 - 30).

ЗАДАНИЯ

1. Запишите в тетрадь требования, предъявляемые к гистологическому препарату (см. теор. блок)
2. Отметьте в таблице названия основных этапов изготовления гистологического препарата и укажите кратко сущность каждого из них.

1. Заполните таблицу, перечислив основные группы красителей, укажите названия структур, воспринимающих краситель, и примеры красителей.

1. Заполните таблицу, отметив основные виды микроскопии, их разновидности, кратко сформулируйте цели использования каждой разновидности.

CИТУАЦИОННЫЕ ЗАДАЧИ

1. На занятии студент рассматривает микропрепарат под микроскопом с увеличением объектива в 40 раз и окуляра в 15 раз. Во сколько раз видимое изображение структур больше истинного.
2. При проведении хирургической операции возникла необходимость в гистологическом анализе оперируемого органа. Какие методы гистологического исследования следует при этом использовать?
3. На лабораторном занятии по гистологии студент изучил микропрепарат при малом увеличении микроскопа, а затем хотел рассмотреть интересующую его структуру при большом увеличении, но, несмотря на попытки сфокусировать изображение, четкости он не добился, а стекло препарата разбилось. Какие ошибки были допущены при изучении микропрепарата?
4. При изучении микропрепарата в световом микроскопе интересуемая структура находится у края поля зрения, справа. В какую сторону следует переместить микропрепарат на предметном столике микроскопа, чтобы она оказалась в центре поля зрения?

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОРОСЫ

1. Что такое разрешающая способность микроскопа и от чего она зависит.
2. Чему равна разрешающая способность светового и электронного микроскопов.
3. Назовите основные этапы изготовления гистологических препаратов.
4. В чем сущность фиксации, и какие требования предъявляют к фиксаторам.
5. Для чего необходимо уплотнение ткани при изготовлении гистологического препарата, и какие используют уплотняющие среды.
6. Какими преимуществами обладает заливка материала в парафин.
7. Как называются приборы для получения срезов, и какие основные части в них выделяют.
8. Назовите оптимальную толщину срезов при использовании заливки в парафин и целлоидин.
9. Какова цель окрашивания гистологических препаратов.
10. Какие группы красителей используют в гистологической практике. Назовите примеры.
11. Какие структуры при окрашивании называются «оксифильными» и «базофильными». От чего зависит тинкториальные свойства структур.
12. Что является целью последнего этапа изготовления гистологического препарата.
13. Назовите фиксаторы, используемые в электронной микроскопии, которые стабилизируют белки и фосфолипиды.
14. Какие среды применяют для уплотнения в электронной микроскопии. Чему равна оптимальная толщина срезов, используемая для электронной микроскопии.
15. Как называется окрашивание в электронной микроскопии, и какие соединения используются для этих целей.