Лабораторная диагностика
Анаэробных инфекций
(Часть II)
Возбудитель — Clostridium botulinum. Ботулизм кормовая (пищевая) токсикоинфекция, проявляющаяся параличом глотки, гортани и конечностей* Смертность — 100%.
Ботулизм описан в середине XVIII в., его название связано с появлением болезни у людей в результате употребления в пищу кровяной колбасы (лат. botulus — колбаса). Возбудитель же был открыт в 1896 г. Ван Эрменгемом, который выделил его из зараженной ветчины, а также селезенки человека, погибшего от ботулизма.
Восприимчивы все виды животных и человек. Действие на организм оказывает продуцируемый экзотоксин. По антигенной структуре различают несколько типов токсинов: А, В, С, D и Е. Каждый из них нейтрализуется типоспецифической антитоксической сывороткой. Ботулизм у человека обычно вызывают типы А, В и Е; у лошадей — чаще тип В, реже тип С, у крупного рогатого скота В- тип D и С, у овец и птиц — тип С.
Морфология. С. botulinum в окрашенных препаратах имеет вид палочек с закругленными концами длиной 4-9 и шириной 0,6-0,8 мкм. Бактерии располагаются изолированно или парами, иногда в виде коротких цепочек. Микроб подвижен (перитрих); большинство клеток ив старых культур без жгутиков. Образует споры, располагающиеся субтерминально, редко центрально. Оболочки со спорами имеют вид теннисных ракеток. Капсулы не образуют.
Лабораторная диагностика
Материал для исследования. Для лабораторного анализа направляют остатки корма, вызвавшего отравление (у крупных животных), рвотные массы (у собак, кошек). После гибели животного исследуют содержимое желудка, кишечника, лимфоузлы, головной мозг, селезенку. Чтобы избежать инактивации токсина, каждую пробу помещают в отдельную банку темного стекла (или обертывают банку черной бумагой), герметично закрывают. Поступивший в лабораторию материал исследуют бактериологически с целью выделения культуры и обнаружения токсина возбудителя.
Бактериологическая диагностика.
Микроскопия. Препараты окрашивают по Г раму.
Выделение чистой культуры. Для выделения культуры производят посевы на жидкие и плотные питательные среды.
Культуральные свойства. Строгий анаэроб. На среде Китта-Тароцци дает равномерное помутнение с последующим просветлением и осаждением микробной массы на дне пробирки. На кровяном агаре возбудитель образует колонии с отростками и зоной гемолиза.
Биохимические свойства. С. botulinum типа А и В обладает протеолитическими свойствами, разжижает желатину, продуцирует сероводород, аммиак и масляную кислоту. Молоко пептонизирует с образованием газа. Ферментирует глюкозу, глицерин и мальтозу.
Каждую пробу материала заливают физиологическим раствором NaCl для экстрагирования токсина. Через 1-2 ч полученный экстракт фильтруют через пластинки Зейтца. Фильтрат делят на три порции: одну вводят лабораторным животным (при наличии токсина животные гибнут); вторую порцию прогревают при 80°С 30 мин, затем инъецируют морским свинкам — животные должны остаться живыми (токсин термолабильный); третью порцию смешивают с поливалентной антитоксической антиботулинической сывороткой и выдерживают в термостате 1 -2 ч, затем смесь вводят подкожно морским свинкам. Токсин ботулинуса нейтрализуется специфическими антителами сыворотки (антитоксинами) и при инъекции животным гибель не вызывает.
Если необходимо установить тип токсина, фильтрат разливают в пробирки по 1 мл и в каждую добавляют антисыворотку разного типа. После контактирования в течение 1-2 ч смесь токсин (фильтрат)-антитоксин (сыворотка) из каждой пробирки вводят отдельным группам животных. Не погибают только те животные, которым была введена смесь с нейтрализованным токсином (антисывороткой определенного типа).
Возбудитель некробактериоза
Возбудитель — Fusobacterium necrophorum. Принадлежит к семейству Bacteriodaceae, роду Fusobacterium.
Некробактериоз (Necrobacteriosis) — инфекционная болезнь многих видов домашних и диких млекопитающих животных, характеризующаяся гнойно-некротическими поражениями кожи, слизистой оболочки, внутренних органов и конечностей. Болезнь известна давно; описывалась под названиями копытная болезнь, парша губ, энзоотический стоматит ягнят, дифтерия телят, гангренозный мокрец лошадей, попытка северных оленей, некротический стоматит поросят. F. necrophorum обычно вызывает местный некротический процесс, чаще поражаются ткани в области конечностей, но может быть и генерализованный процесс с образованием метастазов в виде некротических очагов в печени, легких, почках и др. У северных оленей болезнь часто приводит к летальному исходу.
Р. Кох в 1881 г. выделил возбудителя некробактериоза, а подробно его описал Леффлер. В нашей стране болезнь изучали Н. Н. Андреев и П. В. Павельский (1931), А. Г. Ревнивых (1932), Н. Камбулин (1937), И. В. Попов (1939), Я. Р. Коимленко (1945) и др.
Морфология. F. necrophorum — сравнительно тонкая, неподвижная, грамотрицательная анаэробная палочка, споры и капсулы не образует.
Лабораторная диагностика
Материал для исследования. Используют пораженную ткань, взятую на границе некротизированной и здоровой ткани.