для микробиологического исследования.

Гельминты локализуются во многих органах и тканях человека.

Большинство паразитических червей находится в ЖКТ или сооб­щающихся с ним органах, поэтому чаще всего исследуют фекалии. Проводят забор свежевыделенных фекалий. При этом отбирают кал из разных участков в количестве не менее 50 г. Собранный материал помещают в чистую сухую стеклянную или пластмассовую посуду с плотной крышкой. Возможно хранение материала при температуре 0-4 °С в течение 1 сут. В консервирующем растворе материал может храниться до 1 года. Также берут соскоб с перианальных складок шпателем или глазными палочками. После забора материала шпатели и палочки вкладывают в пробирку или флакон.

Забор мокроты проводят при естественном откашливании, мате­риал сразу же помещают в стерильную посуду с крышками и хранят до исследования не более 2 ч.

Кровь берут шприцем из локтевой вены и в нем отправляют в лабораторию для исследования.

Биоптаты двуглавой или икроножной мышцы помещают в сте­рильную посуду с физиологическим раствором и исследуют в течение 15 мин либо замораживают.

 

 

Методы обнаружения гельминтов в биологическом материале (кал, моча), яиц и личинок в объектах окружающей среды (почва, вода) и промежуточных хозяевах (например рыбе, мясе)

Анализ воды, почвы, овощей, различных предметов прово­дят для определения их роли в передаче яиц гельминтов и зара­жении человека, степени загрязненности окружающей среды и выбора необходимых профилактических мероприятий. В окру­жающей среде яйца гельминтов постепенно погибают, и опас­ность для человека представляют только жизнеспособные инва­зионные яйца и личинки. Поэтому необходимо в каждом случае обнаружения яиц определить степень и процент их жизнеспо­собности. Это даст возможность правильно оценить роль того или иного фактора передачи, выяснить условия и сроки сохра­нения яиц в окружающей среде, обосновать определенные ме­роприятия по обезвреживанию (деинвазии) факторов окружаю­щей среды. Определение жизнеспособности личинок гельмин­тов, обнаруженных в мясе или рыбе, необходимо в случаях, когда приходится решать вопрос о степени их опасности для зараже­ния человека или эффективности обезвреживания загрязненно­го продукта. При обнаружении в мясе финн (цистицерков) бы­чьего или свиного цепней их осторожно извлекают, помещают в подогретую до 40 °С смесь из равных частей изотонического ра­створа хлорида натрия и желчи скота. Затем переносят в термо­стат при температуре 37 °С. В течение 10 минут — 1 часа головки начинают выворачиваться, причем длительно сохраняется их легкая подвижность. Погибшие финны при наблюдении в тече­ние 2 часов не выворачиваются. Подобными специальными ме­тодами определяют жизнеспособность личинок трихинелл, яиц цестод, личинок описторха, личинок дифиллоботриид.

 

Профилактика гельминтозов

Профилактика включает в себя мытье рук перед едой, тща­тельное мытье овощей, фруктов и ягод, употребляемых в пищу в сыром виде, и термическую обработку пищи. Нельзя загрязнять фекалиями почву, воду. Пить лучше кипяченую воду. Защищать от мух продукты питания. При появлении подозрений о нали­чии глистов — обратиться к врачу. Обязательна термическая об­работка сырой рыбы и мяса, употребляемых в пищу (или для корма домашних животных).

Желательно воздержаться от купания в загрязненных пресных водоемах, расположенных неподалеку от пастбищ, водопоев жи­вотных.

 

Методы микробиологической диагностики гельминтозов

Гельминтологические методы исследования направлены на выявление яиц (личинок) или фрагментов гельминтов. Посколь­ку основная масса гельминтов человека паразитирует в желудоч­но-кишечном тракте или сообщающихся с ним органах, чаще всего исследуют фекалии больного. Фекалии должны доставлять­ся в лабораторию свежими, в чистой посуде. При необходимости их консервируют путем добавления жидкости, содержащей 1900 мл 0,2%-ного водного раствора азотнокислого натрия, 250 мл крепкого раствора Люголя, 300 мл формалина и 75 мл глице­рина. Для обнаружения фрагментов гельминтов фекалии про­сматривают невооруженным глазом, затем смешивают с водой и исследуют небольшими порциями в чашке Петри на темном фоне. Все подозрительные частицы помещают на предметное стекло в каплю воды и исследуют под лупой. Можно суточную порцию кала поместить в цилиндр с добавлением 5-10-кратно­го количества воды. После размешивания сосуд оставляют до полного осаждения взвешенных частиц. Поверхностный слой жидкости сливают и наливают чистую воду. Отмытый осадок про­сматривают небольшими порциями в чашках Петри невоору­женным глазом или под лупой. Для обнаружения яиц применя­ют микроскопические методы исследования.

 

 

Метод нативного мазка

1. Небольшое количество кала из разных мест исследуемой порции растереть на предметном стекле в капле 50%-ного раство­ра глицерина, изотонического раствора хлорида натрия или воды.

2. Смесь накрыть покровным стеклом.

3. Просмотреть под микроскопом.

Данный метод годен при массивных инвазиях.

 

Метод всплывания по Фюллеборну

1. Одну часть фекалий размешать в 20 частях насыщенного раствора хлорида натрия (удельный вес 1,18), добавляемого не­большими порциями.

2. Всплывшие на поверхность крупные частицы немедленно удалить, а смесь оставить на 45 минут. В течение этого времени яйца гельминтов, имеющие меньший удельный вес, чем раствор хлорида натрия, всплывают на поверхность.

3. Поверхностную пленку снять проволочной петлей диамет­ром около 1 см.

4. Перенести на предметное стекло.

5. Просмотреть под микроскопом.

Методом Фюллеборна хорошо выявляются яйца нематод.

 

Метод Калантарян

1. Эффективность метода всплывания повышается при за­мене хлорида натрия насыщенным раствором азотнокислого на­трия. Смесь выдержать 10—15 минут.

2. Поверхностную пленку, образующуюся после отстаивания смеси кала с раствором хлорида натрия или азотнокислого на­трия, снять на предметное стекло.

3. Баночку, налитую до краев смесью испражнений с раство­ром соли, накрыть предметным стеклом так, чтобы нижняя его поверхность соприкасалась с жидкостью.

4. После отстаивания стекло снять.

5. Просмотреть под микроскопом.

При необходимости анализ может быть повторен через 10— 15 дней.

 

Соскоб с перианальных складок

(делают утром до совершения туалета)

1. Деревянным шпателем, смоченным в воде или в 50%-ном растворе глицерина, произвести соскабливание вокруг аналь­ного отверстия.-

2. Перенести на предметное стекло в каплю воды или 50%- ного раствора глицерина.

3. Просмотреть под микроскопом.

Данный соскоб применяют для выявления яиц остриц и он­косфер бычьего цепня.

 

Метод Бермана

1. Металлическую сетку с нанесенными на нее 5-6 г фека­лий укрепить на стеклянной воронке, вставленной в штатив.

2. На нижний конец воронки надеть резиновую трубку с за­жимом.

3. Воронку наполнить водой, подогретой до температуры 50 °С; так, чтобы нижняя часть сетки с калом соприкасалась с водой.

4. Через 4 часа жидкость спустить в центрифужные про­бирки.

5. Осадок процентрифугировать.

6. Просмотреть под микроскопом.

Метод Бермана применяют для выявления личинок.

 

Метод культивирования личинок анкилостомида

1. Свежие фекалии (0,5 г) намазать на полоску фильтроваль­ной бумаги размером 15х 150 мм так, чтобы края полоски остава­лись свободными.

2. Полоску поместить в пробирку диаметром 18 мм, содер­жащую 3 мл воды.

3. Пробирку закрыть пробкой и выдерживать при темпера­туре 25 °С в течение 5—7 дней.

4. Развившиеся из яиц личинки спускаются по бумаге на дно пробирки.

5. Нагреть осадок.

6. Просмотреть под микроскопом.

 

Анализ мокроты, носовой слизи и

влагалищных выделений для выявления яиц

1. Исследуемую порцию слизи (выделений) намазать на стекло.

2. Просмотреть на черном и белом фоне макроскопически.

3. Просмотреть под микроскопом.

4. Добавить к исследуемому материалу 25%-ный раствор антиформина.

5. Тщательно взболтать и выдержать 1—1,5 часа в термостате для растворения слизи.

6. Смесь центрифугировать.

7. Осадок просмотреть под микроскопом.

Данный метод применяют для выявления легочной тремато­ды парагонимуса, личинок аскарид и анкилостомид, яиц ост­риц, фрагментов эхинококкового пузыря.

 

Анализ дуоденального и желудочного сока

1. Все три порции дуоденального содержимого, полученные при зондировании, центрифугировать.

2. Осадок просмотреть под микроскопом. Данный метод применяют для выявления яиц печеночных трематод, анкилос­томид, личинок Strongyloides.

 

Исследование тканей

1. Кусочки биопсированной мышцы тщательно расщепить на волоконца.

2. Сдавливать между компрессорными стеклами (толстые стекла с винтами).

3. Просмотреть под микроскопом с затененным светом.

Данный метод применяют для выявления личинок трихинелл.

 

Анализ крови

1. Исследовать висячую каплю на покровном стекле, окан­тованном вазелином.

2. 0,3 мл крови смешать с 10-кратным количеством 3%-ного раствора уксусной кислоты.

3. Смесь центрифугировать.

4. Осадок просмотреть под микроскопом.

5. Для обогащения препаратов к 1 мл венозной крови приба­вить 3 мл 2%-ного раствора формалина или 5-кратное количе­ство жидкости, состоящей из 95 мл 5%-ного раствора формали­на, 5 мл уксусной кислоты и 2 мл концентрированного спирто­вого раствора гематоксилина.

6. Смесь центрифугировать.

7. Осадок промыть дистиллированной водой.

8. Смесь центрифугировать.

9. Осадок просмотреть под микроскопом.

Данный метод применяют для выявления личинок филярий, также исследуют мазки, окрашенные по методу Гимзы—Рома­новского.

 

Методы иммунологической диагностики

Применяют серологические реакции (агглютинации, преци­питации, связывания комплемента) и аллергические диагнос­тические пробы с антигенами из соответствующего вида гель­минта. Серологические реакции (РСК) ставят с антигенами из ткани гельминтов (аскарид, трихинелл), на латексе — при эхинококкозе и цистицеркозе головного мозга. РГА применяется для диагностики шистосомозов, трихинеллеза, эхинококкоза.

Внутрикожные аллергические пробы со специально приготов­ленными аллергенами применяют для диагностики эхинокок­коза, филяриоза, парагонимоза. Некоторые пациенты эти про­бы переносят тяжело, с развитием общих аллергических реак­ций вплоть до анафилактического шока, что следует учитывать при их назначении (внутрикожные пробы нежелательно прово­дить лицам с отягощенным аллергоанамнезом).

 

Вопросы для самоконтроля

1. Перечислите основные классы паразитических червей.

2. Как называется организм. в котором паразитирует гельминт?

3. Охарактеризуйте гельминтов, встречающихся в организме человека.

4. Характерные особенности круглых червей.

5. Патогенное действие гельминтов.

6. Профилактика гельминтозов.

7. Гельминтозы — клинические проявления.

8. Механизмы передачи инвазий.

9. Лабораторные методы исследования гельминтов.

10. Жизненный цикл гельминтов.