Экспресс-метод определения глюкозы в моче тест-полосками «Глюкотест»
Одной из причин глюкозурии является сахарный диабет. Для лечения этого заболевания нужно назначить больному такой режим питания и введения инсулина, чтобы в моче оставались только следы глюкозы. Для этого врачу необходимо знать количество глюкозы, выделяемое больным с мочой за сутки.
Принцип. На реактивной бумаге «Глюкотест» имеется поперечная полоса светло-желтого цвета, пропитанная растворами ферментов (глюкозооксидазы, пероксидазы) и красителем. Глюкоза с помощью глюкозооксидазы (КФ 1.1.3.4.) окисляется кислородом воздуха до глюконовой кислоты с образованием пероксида водорода. Пероксид водорода в присутствии пероксидазы (КФ 1.11.1.7.) окисляет краситель, превращая его в окрашенное соединение. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию глюкозы, что определяется при сравнении с цветной шкалой из набора «Глюкотест».
Подобные тесты выпускают и зарубежные фирмы: «Биофан Г», «Глюкофан», «Тетрафан», «Пентафан» и др. Диагностические полоски могут иметь несколько зон индикаций, в том числе зону выявления и определения глюкозы в моче.
Реактивы. 1) набор диагностических полосок «Глюкотест»;
2) 0,5%, 1%, 2%, 3% растворы глюкозы,
3) 10% раствор NaOH.
Материал исследования.
Моча нормальная и патологическая (содержащая глюкозу).
Проведение анализа.
В пробирки с образцами мочи погружают полоски бумаги «Глюкотест» так, чтобы желтая полоса с реактивами была смоченной. Быстро извлекают, кладут смоченным концом на пластмассовую пластинку. Через 2 мин сравнивают окраску полоски с цветной шкалой из набора «Глюкотест». Содержание глюкозы в моче определяют по наиболее совпадающему со шкалой цвету полоски. Каждой полоске на цветной шкале соответствует определенное содержание глюкозы в моче.
|
|
Практическое значение.
Метод обладает высокой субстратной специфичностью и позволяет обнаружить в моче глюкозу в пределах 0,055-1,11 ммоль/л. Простота и скорость выполнения анализа позволяют применять этот метод как предварительный тест при массовом обследовании больных. Кроме того, он позволяет самому больному следить за содержанием глюкозы в моче и соответственно изменять диету.
Диагностические полоски ФАН и другие для полуколичественного определения нормальных и патологических компонентов мочи позволяют проводить анализ в любых условиях в присутствии больного на приеме у врача или дома. Использование индикаторных тест-полосок незаменимо для профилактики и раннего распознавания заболеваний, непосредственно у постели больного дома и в стационаре, службе скорой помощи, для массовых обследований населения с целью выявления некоторых заболеваний, в том числе самими пациентами или их родственниками в домашних условиях. К настоящему времени в республике на базе научно-технического кооператива «Анализ-Х» налажено производство сухих тест-полосок для определения содержания в моче глюкозы («Глюкотест»), кетоновых тел («Кето-уротест»), «Били-уротест» – билирубина, «ДиаФан» (кетоны, глюкоза), «ТриФан» (глюкоза, белок, рН) и др.
Реагентные зоны тест-полосок содержат сухие реактивы (ферменты и/или неферменты), способные воздействовать на определенные метаболиты биологических жидкостей с изменением окраски индикаторной зоны. Правила пользования тест-полосками сводятся к следующему: быстро окунуть тест-полоску в мочу, вынуть её и вытереть боковую кромку о край ёмкости, чтобы удалить излишнюю мочу, через 60 секунд сравнить реактивное поле с цветной шкалой на этикетке упаковки. При проведении качественного определения глюкозы в моче рекомендуют выполнять следующие указания:
|
|
1) исследуют свежесобранную мочу, полученную до приема пищи;
2) индикаторную бумагу хранить в плотно закрытом пенале, в темном и прохладном месте, но не в холодильнике;
3) соблюдают срок годности.
Для качественного определения глюкозы проводится роба Гайнеса, используются экспресс-методы с применением готового набора реактивов.
Алиментарная глюкозурия, появляющаяся через 30-60 мин после приема пищи богатой углеводами, исчезает, через 2-5 часов. Наблюдается чаще у детей грудного возраста и при беременности.
Иногда с помощью пищевой нагрузки углеводами можно получить так называемую алиментарную глюкозурию у лиц, предрасположенных к диабету, и тем самым выявить предиабетическое состояние.
Следует указать также и на возможность печеночной глюкозурии, встречающейся, например, при так называемом бронзовом циррозе печени, характерным признаком которого является наличие сахара в моче.
Концентрация глюкозы 1,7 ммоль/л в утренней порции мочи оценивается, как физиологическая глюкозурия.
физиологическая глюкозурия может наблюдаться при поступление с пищей большого количества углеводов, когда организм временно теряет способность усваивать сахар (алиментарная*), после эмоционального напряжения и стресса (эмоциональная), приёма некоторых лекарств (кофеина, кортикостероидов)
|
|
Клинические аспекты
Физиологический уровень глюкозы очень низкий (составляет порядка 0,06 - 0,085 ммоль/л) и не обнаруживается обычными лабораторными методами (Фелинга, Гайнеса, Бенедикта, Ниландера и др.), так как находятся ниже порога их чувствительности. Поэтому на данный момент времени концентрация глюкозы в первой утренней порции мочи - 1,7 ммоль/л принята за верхний предел физиологической глюкозурии. Лабораторными исследованиями показано, что содержание глюкозы в моче ниже физиологического уровня или полное ее отсутствие это показатель бактериальной инфекции - бактериурии.
Появление глюкозы в моче зависит либо от её концентрации в крови либо от процессов фильтрации и реабсорбции глюкозы в нефроне. Повышение глюкозы в крови выше 9,9 ммоль/л (средняя величина почечного порога) вызывает появление глюкозурии.
При нормальном сахаре в крови глюкозурия появляется в случае нарушения процессов реабсорбции - почечная (ренальная) глюкозурия. Ренальная глюкозурия может быть первичной (врождённой) или вторичной (возникает при хронических гломерулонефритах, нефротическом синдроме, острой почечной недостаточности и др.)
Существуют качественные и количественные методы определения глюкозы в моче. В основу качественных реакций положены восстановительные (редукция) свойства глюкозы. Между тем следует знать, что не каждое вещество, которое даёт положительную редукционную пробу является глюкозой. Если в посуде, куда собирают мочу, находились сахаристые вещества (например, банка из-под компота), то в моче может быть обнаружена сахароза. При избыточном потреблении фруктов может наблюдаться фруктозурия, пентозурия; в конце беременности или после прекращения кормления грудью отмечается лактозурия; после употребления молока, у людей, страдающих ферментопатией, наблюдается галактозурия и гипогликемия. Эти состояния ошибочно могут приниматься лабораторией за глюкозурию.
В настоящее время появление ферментативных биохимических методик определения с использованием биохимических тест-полосок, позволяют однозначно определять глюкозурию и не допускать лабораторных ошибок.
Различают физиологическую и патологическую почечную глюкозурию.
Физиологическая глюкозурия может наблюдаться при поступление с пищей большого количества углеводов, когда организм временно теряет способность усваивать глюкозу (алиментарная), после эмоционального напряжения и стресса (эмоциональная), приёма некоторых лекарств (кофеина, кортикостероидов).
Патологические глюкозурии (от 0,3 - 0,5 г/л до нескольких грамм глюкозы в литре мочи) делятся на панкреатогенные (важнейшая из панкреатогенных — диабетическая глюкозурия) и непанкреатогенные (наблюдается при раздражении ЦНС, тиреотоксикозе, синдроме Иценко-Кушинга, акромегалии, феохромоцитоме, патологии почек, печени).
Лекарственная глюкозурия может развиваться при введении больным морфина, анестетиков, седативных средств, а также препаратов, обладающих гипергликемическим и нефротоксическим эффектами.
Разнообразие причин глюкозурии усложняет дифференциацию. Однако на практике следует исходить из следующего. До тех пор, пока соответствующие исследования не исключат возможность сахарного диабета, любой случай глюкозурии следует рассматривать как проявление этой болезни. Есть глюкозурия, исследуется содержание сахара в крови; если оно повышено, практически может быть поставлен диагноз сахарного диабета. Если содержание сахара в крови нормальное, то следует провести тест толерантности к глюкозе (ТТГ). При получении нормальных результатов ТТГ следует установить природу вещества, вызвавшего редукцию. Если обнаруженное вещество является глюкозой, то имеет место почечная глюкозурия (врождённая или вторичная).
Для правильной оценки степени выраженности глюкозурии (особенно у больных с сахарным диабетом) необходимо рассчитывать суточную потерю глюкозы с мочой.
Массовые обследования населения с целью выявления лиц, страдающих сахарным диабетом, привели к заключению, что начальные стадии этого заболевания характеризуются отсутствием каких-либо явных симптомов. По различным оценкам остаются нераспознанными от 30 до 50 % людей с сахарным диабетом. Своевременное диагностирование и применение терапии на ранних стадиях заболевания предотвращает или задерживает развитие различных осложнений.
В обязательном порядке обследованию должны подвергаться лица, у которых имеются симптомы, характерные для сахарного диабета: ожирение; гиперлипопротеинемия; полиурия; гипертония; гепатобилиарная патология; хронические инфекции мочевых и дыхательных путей; сердечно-сосудистые заболевания; хронические дерматозы и др.
Другие группы риска: лица старше 40 лет; лица с диабетической наследственностью; матери, родившие детей весом более 4,5 кг; женщины после преждевременных родов или абортов.
Примерно одна треть пациентов с глюкозурей, после алиментарной нагрузки, страдает сахарным диабетом. Определение глюкозурии другого характера также имеет существенное диагностическое значение. На данный момент времени тест определения глюкозы в моче является обязательным при исследовании мочи в клинико-диагностических лабораториях во всех странах с развитой системой здравоохранения.
Глюкозурия
Глюкозурия является результатом нарушения углеводного обмена вследствие патологических изменений в поджелудочной железе (сахарный диабет, острый панкреатит и т.д.).
При тяжелых формах сахарного диабета содержание глюкозы в моче может достигать 8-10%. Осмотическое давление мочи повышается. Суточный диурез возрастает до 5-10 л и более (полиурия). Развивается обезвоживание организма и как следствие его - усиленная жажда (полидипсия).
Реже встречается глюкозурия почечного происхождения, связанная с недостаточностью резорбции глюкозы в почечных канальцах.
Как временное явление глюкозурия может возникнуть при некоторых острых инфекционных и нервных заболеваниях, после приступов эпилепсии, сотрясения мозга.
Отравления морфином, стрихнином, хлороформом, фосфором также обычно сопровождаются глюкозурией.
Может быть глюкозурия алиментарного происхождения, глюкозурия беременных и глюкозурия при нервных стрессовых состояниях (эмоциональная глюкозурия).