ВВЕДЕНИЕ
Взрослый желудочно-кишечный тракт является большой площадью слизистой оболочки тела в контакте с Экстером-NAL среды. Трудноразрешимой задачей этого одноклеточного слоя слизистой оболочки эпителии является поддержание физического барьера для экзогенных стимулов, и все же позволяют для селективного ввода необходимых питательных веществ. Желудочно-кишечный тракт населен RESI-Дент микрофлора, необходимая для иммунологического гомеостаза кишечника и в качестве источника для Nutri-энтов. Поддержание числа бактерий-резидентов и одновременной защиты от потенциальных патогенов (в том числе токсоплазма), приобретенных оральным путем, обеспечивается многочисленными не-иммунологических факторов, в том числе барьеров, которые являются как физические (моторику кишечника, эпителиальный слой клеток)
и химический (желудочная кислота, протеолитический фермент поджелудочной железы, желчь, слизь). В этой главе обсуждается роль отдельных отсеках клеток в кишечнике-ассоциированной лимфоидной ткани (GALT) врожденной реакции на паразита.
Энтероцитов
Эпителиальные клетки обеспечивают первую линию врожденной иммунологической защиты хозяина против инфекции полости рта Т. гондий. Во время природных инфекций, токсоплазмы первоначально пересекает кишечный эпителий, dissemi-ягодичной в глубоких тканях, а также пересекает биологически акти-кал барьеров в плаценте, а также гематоэнцефалический и кровь-сетчатка барьеры (Барраган и Сибли, 2003). Узкие переходы
Токсоплазма. Модельные Apicomplexan-перспективы и методы, под редакцией Weiss & Kim
ISBN-13: 978-0-12-369542-0
ISBN-10: 0-12-369542-2
|
|
Copyright © 2007 Elsevier Ltd.
Все права воспроизведения в любой форме зарезервированы.
594 Врожденный иммунитет В токсоплазме ИНФЕКЦИИ
которые обеспечивают комплекс энтероциты-энтероцитами действие между собой физическим барьером против проникновения кишечных микроорганизмов. Это межклеточное барьер, образованный жесткой железнодорожного узла-ционные белками Claudin и occludin, которые Asso-ciate с различными периферийной мембранными белками плазмы, такими как блокатор малой зоны. Тем не менее, несмотря на это физический барьер, токсоплазмы активно пересекают поляризованные монослои клеток (например, INTES-tinal эпителия), и эта способность связана с паром-сайт моторики и вирулентностью в модели мышей (Barragan и Сиб, 2002). Паразит трансмиграция требует жизнеспособных и активно подвижных паразитов, но целостность хоста клеточных барьеров не изменяются во время паразита перерождений. Т. гондий, кажется, использует более одного лиганда в процессе многостадийной проникать в клетки-хозяева. Белок SAG1 и несколько других белков были связаны с процессом адгезии этого apicomplexan пара-сайта. Приложение и инвазия клеток-хозяев Т. гондий включает экзоцитоза в micronemal гомодимерное белка MIC3 (Cerede и др., 2005) и microneme белок MIC2, который, как полагают, участвовать в скользя подвижности и инвазии клеток-хозяина (Барраган и др., 2005). Межклеточной молекулы адгезии 1 (ICAM-1), который является upregu-веден на клеточные барьеры в процессе Toxoplasma Infec-ции, могут взаимодействовать с паразитами, полученных MIC2 (Барраган и др., 2005). которые, как полагают, участвуют в скользя моторику и хост-клеток вторжения (Barragan и др., 2005). Межклеточной молекулы адгезии 1 (ICAM-1), который является upregu-веден на клеточные барьеры в процессе Toxoplasma Infec-ции, могут взаимодействовать с паразитами, полученных MIC2 (Барраган и др., 2005). которые, как полагают, участвуют в скользя моторику и хост-клеток вторжения (Barragan и др., 2005). Межклеточной молекулы адгезии 1 (ICAM-1), который является upregu-веден на клеточные барьеры в процессе Toxoplasma Infec-ции, могут взаимодействовать с паразитами, полученных MIC2 (Барраган и др., 2005).
|
|
По всей вероятности, энтероциты играют решающую роль часовых против вторжения паразитов. Энтероцитов имеют иммунологическую способность ответа действовать как «иммуноциты» по повышающей регуляции маркеров активации, связанным с презентацией антигена. Первой линии обороны белка, альфа-дефензины, могут быть важными иммунные эффекторные молекулы, хотя роль такой молекулы (ов) до сих пор не были исследованы в ответ на Т. гондий инфекции. Один дополнительный механизм, используемый хост для эффективного контроля и удаления кишечных паразитов, приобретенных может быть индукцией оксида азота (NO), антимикробные молекулами, секретируемые кишечным эпителием. Т. гондий прорастает и размножается в энтероцитов, и активация энтероцитов с гамма-интерферона (ИФНγ) Ингибирует репликацию Т. гондий. В отличие от того, что наблюдается в других паразитов, таких как лямблии,
ни азот или кислород, ни производный trypto-Phan голодание не по всей видимости, участвуют в inhi-bition репликации паразита IFN-γ, НЕТ секретируется инфицированными энтероциты не-видимому, участвуют в качестве ответа на эффекторном паразит (Яп и Sher, 1999). В химерных мышей, было показано, что экспрессия иСОА клетками кроветворной происхождения, предусмотренного сопротивления хозяина. Выражение иСОА не-кроветворных клеток было недостаточным, чтобы вызвать сопротивление против Т. гондий. Эксперименты с использованием Fe2+ соль, носитель и хелатор показывают, что репликация внутриклеточного Т. гондий является железо-зависимой, предполагая, что ИФНγ-обработанные энтероциты ингибируют репликацию гондия T., ограничивая доступность внутриклеточного железа для паразита (Dimier и Бута, 1998).
|
|
токсоплазма инфекции кишечника после перорального проблемой в некоторых штаммов инбредных и беспородных мышей, а также грызунов, свиней и приматов, кроме человека, может вызвать тяжелую форму воспаления кишечника. У мышей C57BL / 6, эта патология акций и морфологические и гистологические характеристики с человеческим IBD, такие как потеря кишечной эпителиальной архитектуры, укороченной ворсинок, массовый приток воспалительных клеток в собственной пластинке слизистой оболочки, а также отдельные пятна некроза. Когда нерегулируемые этот воспалительный процесс приводит к ранней смертности восприимчивого хозяина. Самок животных умирают раньше, чем у мужчин после перорального инфекции, предполагая, что оба пола и половые гормоны являются важными факторами для определения чувствительности небольшого INTES-зубца Т. гондий инфекции (Liesenfeld и др., 2001).
На 7-й день после заражения, массивный некроз ворсинок и инфильтрации с полиморфно нейтрофилов (PMNs), макрофаги, дендритные клетки (DC), и наблюдаются лимфоциты (Liesenfeld и др., 1996). Миграция CD11c+и CD11b+моноциты, ДК, макрофаги и ПМЯ в собственной пластинке слизистой оболочки на 7-й день после инфицирования было сообщено после перорального инфицирования кист ткани пара-сайта (Courret и др., 2005). Хемокины, секретируемые на базолатеральную поверхности эпителиальных клеток кишечника (IECS) играют критическую роль в INITI-и модуляции Ц И А Ц иммунного ответа на различные патогены, в том числе Т. гондия. IECS из воспаленного кишечника секретирует цитокин
| нейтрофилы |
и хемокинов, которые ответственны за химио- привлечение макрофагов / моноцитов / нейтрофилов и / или лимфоцитов.
Т. гондий инфекция энтероцитов может инициировать ряд врожденных иммунологических событий, которые приводят к надежному воспалительному процессу в кишечнике. Эти ранние события, кульминация в создании соответствующих условий для долгосрочного защитного иммунитета против реинфекции и, возможно, реакционного vation. Образцы ткани, выделенные из тонкого кишечника Т. гондий-инфицированных мышей отображения сущест-косяк увеличение секреции хемокинов, в том числе хемотаксиса моноцитов белок 1 (МСР-1 / CCL2) и IFN- &γ индуцируемый белок (IP-10 / CXCL10), а также, в меньшей степени, как макрофаги воспалительные белки 1α а также β (MIP-1α а также β/ CCl3 и CCl4), а также MIP-2 / CXCL2 и регулируется при активации и обычно Т-клеток Выраженный вещества (RANTES / CCL5) (Mennechet и др., 2002).
Из-за короткий период полураспада бывших естественных условиями кишечно-cytes, дифференцированных энтероциты клеточной линии, Микрофонcl2, Была использована для оценки экспрессии и секреции этих различных хемокинов. C57BL / 6 (Н-2б) -Derived энтероцитов клеточная линия Miccl2разделяет большинство функций эпителиальных клеток. Он производит сливающийся монослой клеток кубовидных, разделенных плотными соединения, развивается плотной, короткий апикальный микроворсинки, образует купола, и имеет несколько важных свойств, в том числе polariza-ции и дифференцированных функций кишечных клеток крипт. (Бенс и др., 1996). В ответ на Infec-ции в пробирке, эти клетки производят хемокинов - в частности, МСР-1, MIP-2, и MIP-1α а также β - которые усиливают миграцию иммунологически активных клеток, в том числе ПЯЛ, макрофагами и моно-cytes, ДК и Т-клеток (Бузони-Gatel и др., 2001).
Нейтрофилы
Нейтрофилы являются клетки раннего реагирования, которые выделяют несколько провоспалительных цитокинов и хемокинов в ответ на Т. гондий. ПМНО истощение Experi-ка показала, что ПМЯ может иметь реакционноспособные кислородные промежуточные независимые антимикробные функции (Bliss и др., 2001; Denkers и др., 2004). PMNs также проявляют роль иммунорегуляторной такой
что нейтрофильные-дефицитных мышей, коинфицированных Т. гондий и Plasmodium berghei демонстрируют пониженную Th1 ответа, но не сопутствующее увеличение Th2 цитокинов. Toxoplasma инфекция с нейтропенией мышей приводит к депрессии как типа I и типа
II цитокины, что приводит к летальной системной патологии, связанной с повышенными уровнями паразитов (Bliss и др., 2001). ПМН был идентифицирован как источник нескольких провоспалительных цитокинов во время инфекции
с Т. гондий. Оба человека и мыши нейтрофилы производят IL-12 и TNF-αа также несколько хемокинов при стимуляции в пробирке с Т. гондий антигенов (Bliss и др, 1999;.. Denkers и др, 2004). Ил-12-секретирующих ПМЯ traffick в брюшной полости после внутрибрюшинного паразитарной инфекции (Bliss и др., 2000). Этот оборот ПМН зависит от их экспрессии рецепторов хемокинов CXCR2, и отсутствие этого рецептора связан с повышенной восприимчивости оспариваемого хозяина (Del Rio и др., 2001). В организме человека CXCR2 представляет собой рецептор IL-8 - хемокина хорошо известна своей активности хемотаксиса на ПЯЛ. Мыши не выражают гомогенную молекулу для IL-8, но MIP-2 и KC хемокинов связываются с CXCR1 и, вероятно, Medi-ели хемотаксиса нейтрофилов в мышиных моделях.
рецепторов хемокинов CCR1-дефицитных мышей имеют дефекты в нейтрофильных торговли и пролиферации. В
сравнение с мышами родительскими дикого типа, CCR1-/-мышей выставлены резко возросла смертность Т. гондий в сочетании с повышенной нагрузкой ткани паразита. Приток ПЯЛ к периферийным
в крови и в печени была снижена в CCR1-/- мышей на ранних стадиях инфекции, предполагая, что CCR1-зависимой миграции нейтрофилов в крови и тканях может оказывать значительное влияние на контрольно-лин паразита репликации зависит от резистентности хозяина к внутриклеточной инфекции (Хана и др., 2001).
В ответ на Т. гондий инфекцию, эпителиальные клетки секретируют хемокин, которые вербуют ПЯЛА. К тому же
чтобы хемокинов, IL-17, Гранулопоэз цитокин, продуцируемый CD4+Т-клетки и нейтрофилы, индуцирует СХС хемокины, которые могут также способствовать миграции ПЯЛ на зараженные сайты во время ранней инфекции (Келли и др., 2005). Таким образом, набранные ПМЯ к месту инфекции путем выпуска хемокинов, таких как МСР-1 или IL-8 (MIP-2) могут участвовать в привлечении и миграции друга
596 Врожденный иммунитет В токсоплазме ИНФЕКЦИИ
иммунные клетки, такие как дендритные клетки, которые могут участвовать в качестве связующего звена между врожденными и адаптивными иммунными реакциями.
Дендритных клеток
Одна из главных ролей дендритной клетки (ДК), чтобы представить антиген, хотя механизм этого в кишечном отделении не полностью под встал. В кишечнике, контроллеры домена могут иметь два различных локализаций. ДК с характерными особенностями незрелых клеток, были описаны в пейеровых бляшках (ПП), как образуя плотный слой клеток в субэпителиальным куполе. Доступ паразита к ДК из ПП, может быть через микроскладку клетки (M клетки). Эти уникальные клетки находятся в эпителии окружающих ПП, и были связаны с микробным вступлением в хозяин. РС также скат-убито по всей пластинке слизистой. По сравнению с селезенкой РСОМ, РС, выделенный из собственной пластинки демонстрирует характерный фенотип. Большинство кишечных ГЦ (70 процентов) являются CD11c+ CD11b+, Тогда как только 6-8 процентов экспресс-CD11c+ CD8α + CD11b-, Гомеостатические механизмы, посредством которых кишечных РСЫостаются стационарным состояние в прес-ствовании микробного воздействия не понимают. Возможное объяснение состоит в том, что эпителиальные клетки слизистой оболочки могут обусловить дендритные клетки через конститутивное высвобождение тимус стромальных lymphopoi-Этина и другие медиаторы (Rimoldi и др., 2005).
На 5-е дня после заражения с Т. гондий большинство из этих собственной пластинки слизистой оболочки РСА является зрелым, как показано высоким уровнем экспрессии МНС класса II, CD40, CD80, CD86 и. Было высказано предположение, что ДК из собственной пластинки может получить доступ к кишечному содержимому, используя уникальные белки отделить жесткую Junctional границы между энтероцитами, не нарушая целостность монослоя (Rescigno и др., 2001). Этот процесс позволил бы для непосредственного отбора образцов ГЦ патогенов внутри просвета кишечника. В качестве альтернативы, патогенные микроорганизмы, которые пересекают эпителий также могут быть захвачены непосредственно РС, которые обрабатывают антиген для презентации. Дополнительный способ для РСА от собственной пластинки к образцу антигенов с помощью инфицированных энтероцитов. В этой модели,
апоптотические энтероциты усваиваются ДК и обрабатывали для экспрессии антигена.
Когда узлы, в том числе людей, глотают кисты ткани или ооцист, содержащие T.gondii, свободные пару-сайты выпущены в просвете кишечника. Они subse-довательно ввести энтероциты, где они размножаются и инициируют инфекцию. Энтероциты, нагруженные паразиты секретируют хемокин, которые рекрутировать Leuko-cytes в внесосудистом пространстве собственной пластинки. Паразиты затем распространение нескольких удаленных тканей, включая мозг - главный сайт поддержку ING-паразит задержки (Dubey, 1997; Dubey и др., 1997). Это событие имеет важные клинические implica-ции, так как Т. гондий в качестве хронической инфекции является Asso-лемом, связанной с инцистированном брадизоитным, который медленно размножается под контролем уникальных иммунных сигналов хоста-зависимый. Т. гондий может Effi-ciently ввести и выживать в пределах РС (Ченнон и др., 2000).+ клетки) могут быть использованы патогенными для dissemina Тион через тело.
Среди носителя паразита и подвижных кандидатов РС, которые, как известны, для обследования целостности тканей и для транспортировки вирусов, грибков или бактерий эпителия слива лимфатических узлов. Хотя известно их Т-клеточные стимулирующих свойства, ДК обладает способностью распространять Т. гондия. Среди других лейкоцитов в крови родов, нейтрофилы, лимфоциты и моноциты, которые являются разрешающими паразитировать рост в пробирке (Ченнон и др., 2000), моноциты, особенно те, в воспаленной собственной пластинке слизистой оболочки, обеспечивают «троянца» для паразита транспорт в ополчении.
Недавние исследования в одной из наших лабораторий (DBG) показали, что после внутрижелудочного прививка кист у мышей, CD11c+ дендритные клетки из кишечника, собственной пластинке слизистой оболочки пейеровых бл шек, и брыжеечных лимфатических узлов были паразитировать, тогда как паразиты были связаны с CD11c- CD11b+моноцитов в периферической крови. Эти клетки зараженные участвуют в индукции заболевания в головном мозге мышей-реципиентов наивных, как продемонстрировано приемным передачи Experi-ления. Пример виво анализ паразитировали клетки показал, что одиночные тахизоиты, нереплицирующиеся паразиты, могут быть идентифицированы на периферии клетки, часто
| МАКРОФАГИ |
окруженная мембраной принимающей клетки плазмы. По нескольких подходов, в том числе (1) витального окрашивания лейкоцитов, (2) мечения антител, или (3) химерного мышей, в которых кроветворные клетки, выраженной зеленый флуоресцентный белок, было установлено, что Т. гондий-инфицированных CD11b+лейкоциты могут traffick в мозге внесосудистого пространства (Courret и др., 2005). Дополнительные исследования определены CD11c+и 33D1+ Клетки, локализованные на участках воспаления в зараженном мозге (Fischer и др., 2000).
Паразит инфекция энтероциты приводят к повышающей регуляции и экспрессии CD40, CD1d, класс II, предполагая, что энтероциты могут выступать в качестве АРС и принимать участие в активации лимфоцитов. Из-за ограниченную экспрессией CD80 и CD86 обязательных для эффективного лимфоцита Stimula-ции, ДК и макрофаги, которые проникают в зараженном эпителий, вероятно, будет главным образом участвуют в качестве АРС для CD4+активации Т-клеток из собственной пластинки. В дополнение к их решающей роли АРС, контроллеры домена отображать противомикробное функцию. IFN-γ активация РС инициирует кислород зависит-ЛОР ингибирование Т. гондий (Aline и др., 2002).
В дополнение к ПЯЛ, РС (Aliberti и др., 2003), а также макрофагов (Оливейра и др., 2000) производят IL-12 следующий паразитарной инфекции. Селективная роль РСА в паразита-индуцированной продукции IL-12 в естественных условиях была оценена, когда живые тахизоиты или их Сол-BLE тахизоит экстракт (STAG) вводили мышь. IL-12p40-продуцирующие клетки наблюдались в течение нескольких часов в регионах Т-клеток селезенки. Это население было идентифицировано как состоят-ки почти полностью CD11c+Контроллеры домена. Окрашивание одних и те же участки селезенки с анти-CD11c моно-клонального антителом показало сдвиг ДК в селезенке, как следствие Т. гондий воздействия. Там, как представляется, большое количество ячеек leav-Инг красной пульпы и краевая зоны и кластеризации в области Т-клетки. Селезенки ДК также показал высокую реагировать STAG в пробирке, производя значительные уровни IL-12.
Интерлейкин-12 (IL-12) является основным цитокин-Геринг аккуратного IFN-γСинтез с помощью NK и Т-лимфоцитов в ходе Т. гондий инфекции. ИЛ-12-дефицитных мышей в равной степени восприимчивы к острым токсоплазмозом как IFN-γ-/-дефицитный мышей. Следствием этого является то, что IL-12 является главным сигналом для инициирования хоста
устойчивость к паразиту. IL-12 также считается ответственным за Т-хелперов 1 (Th1) эффектор выбор в T. Gondii инфекции, хотя и не по умолчанию для производства цитокина фенотипа Th2 не рассматривается в IL-12-дефицитных животных, подвергшихся воздействию паразита (для обзора см Sher и др., 2003).
МАКРОФАГИ
Макрофаги играют также важную роль в врожденного иммунитета против Т. Gondii инфекции. Они обладают мощной антимикробной функцией, а также эффективен процессом и представить пептидные антигены для активации Т-клетки. IFN-γявляется основным индуктором классической активации макрофагов. Активированные макрофаги мышей приобретают антимикробные действия, которые могут зависеть от двух факторов. Во-первых, лишение триптофана, требуемой аминокислоты, необходимой для роста паразита. Триптофан деградация происходит после индукции indoleamine 2,3-диоксигеназы. Стимуляция индуцибельной синтазы оксида азота (INOS) производства является еще одним противомикробным Mech-ханизм, вызванное IFN-γ-активированная макрофаги. иОАС индукция приводит к получению химически активных промежуточных продуктов азота, которые являются токсичными для пара-сайта. Активированные макрофаги синтезируют TNF-α которые, в дополнение к TNF-αполучает с помощью Т-клеток CD4 от инфицированной собственной пластинки слизистой оболочки, повышает выработку Inos (Liesenfeld и др., 1999). Соответствующее значение этих двух механизмов в изменении репликации паразита может меняться в зависимости от инфицированных тканей (кишечника, легких, головного мозга) (Fujigaki и др., 2003). Несмотря на том тонкое регулирование NO производств самого паразита (Luder и др., 2003), а также наличие IL-13 и IL-4 в инфицированном кишечнике через STAT6-зависимый путь-путь (Rutschman и др., 2001) может произойти, чрезмерное производство NO, IFN-γ, и TNF-αвносит свой вклад в общее воспаление в кишечнике зараженных мышей и, если неконтролируемым, приводит к смерти (Хан и др, 1997;.. Liesenfeld и др, 1999). Клеточные факторы, которые необходимы для IFN-γ эффект в значительной степени неизвестны, хотя IGTP и LRG-47, члены IFN-γ-regulated семейство P47 ГТФаз, необходимо для устойчивости к острой инфекции Т. гондия в естественных условиях. Было показано, что
598 Врожденный иммунитет В токсоплазме ИНФЕКЦИИ
IGTP в основном совместно локализуется с эндоплазматическими маркерами reticu-Lum, в то время как LRG-47 в основном ограничивается телом Гольджи. Эти результаты свидетельствуют о том, что IGTP и LRG-47 способны регулировать сопротивление хозяина к острой инфекции T.gondii, через их способность ингибировать рост паразитов внутри макрофагов (Butcher и др., 2005а).
взаимодействие CD40 / CD154, участвует в ственного-ушной продукции макрофагами ИЛ-12 и Т-клеточного производства IFN-γ, Заражение мышого C57BL / 6 с результатами T.gondii при качестве повышающей регуляции экспрессии CD40 на вспомогательных клеточные популяции на локальных участках инфекции, а также в лимфоидных тканях. CD40 / CD154, лигирование имеет важное значение для INITI-ель кишечной воспалительной реакции наблюдается после перорального заражения мышея C57BL / 6 (Li и др., 2002), и взаимодействие CD40 / CD40L, имеет решающее значение в резисте-ANCE к Т. гондиям (Райхманн эт и др., 2000). взаимодействие CD40 / CD154, может также способствовать противопаразитарную функции макрофагов в отсутствии затравки с IFN-γа также отсутствие накопления запасов, производства реактивных промежуточных продуктов азота. CD40-стимулированные макрофаги приобрела анти-T. Активность гондий, которая не была ингибирована нейтрализующим анти-IFN-γ моноклональное антитело, но было абляции путем нейтрализации TNF-α(Andrade и соавт., 2005). Кроме того, в то время индукции анти-Т. гондий активности в ответ на стимуляцию CD40 была незатронутой в макрофагах от IFN-γ-/- мыши, макрофаги TNF-рецептора 1/2-/-мышь не реагирует на взаимодействие CD40. В противоположность этому, CD40-стимуляция не индуцирует экспрессию NOS2 и не вызывают выработку реактивного азота интер-опосредует. CD40, может индуцировать антимикробный Activ-ность макрофагов против внутриклеточного патогена, несмотря на отсутствии двух центральных особенностей классический активированные макрофаги: заливка с IFN-γ, И производство реактивных промежуточных соединений азота.
Т. гондий приняли уникальные стратегии по подрыву макрофагов антимикробных функций. Паразит вмешивается хост-клетки бактерицидных деятельности через сложные манипуляции внутриклеточных сигнальных путей макрофаг. Эта подрывная деятельность, вероятно, продиктована необходимостью уйти от бактерицидной эффекторной функции, а также избежать провоспалительных патологий, которые могут дестабилизировать взаимодействие хоста-паразит (Denkers и Butcher, 2005). Некоторые из молекулярного
механизмы, лежащие в действие паразита на подавляющие макрофаги провоспалительной продукции цитокин были расшифрованы.
Таким образом, макрофаг вторжение живых Т. гондий паразитов сопровождается быстрой и устойчивой активации STAT3-хозяина, которая коррелирует с подавлением ЛПС-триггерным ФНО-αи IL-12 синтез. Паразит-индуцированной STAT3 phosphoryla-ние и подавление LPS-триггерным TNF-αи ИЛ-12 был цел в IL-10-дефицитных макрофагов, что исключает роль этого противовоспалительного моль-Cule в этом пути. Таким образом, Т. гондий использует хост STAT3, чтобы предотвратить LPS-триггерным IL-12 и TNF-α производство (Butcher и др., 2005b).
В КЛЕТКАХ
Участие В-клеток в анти-воспалительных процессов обсуждается. В модели IFN-γдефицитная инфекция мыши, субпопуляции В-2 выставлены иммуномодулирующие функции, повышение Produc-Тион IL-4 и IL-10 и не понижающая регуляция NO в макрофагах высвобождения из брюшной полости (Ман и др., 2003a).
В модели воспалительного заболевания кишечника, разработанной в В6 мышей перорально инфицированных кист, мы описываем разные роли В-клеток в регуляции или индукции воспаления. Таким образом, В-клеток обедненного мышей, зараженных T.gondii, имеют повышенную выработку TNF-α и IFN-γ по CD4+ и CD8+Т-клетки, а также ИЛ-12 дендритными клетками. Это, как правило, быть отменено, когда В-клеточный обедненным мышей транс-минаются под общим до инфицирования наивных В-клетки, и в меньшей степени с D7-загрунтованными В-клетками. Кроме того, анализ двойных химерных мышей, у которых клетки В являются только CD1d-Клетки, (Henard и др., представленные) поддерживает теорию о том, что ингибирующее действие В-клеток зависит, по меньшей мере, частично на экспрессию CD1d. Это наблюдение привело нас к предположению, что В-клетки действуют на NKT клеток, следовательно, понижение inflamma-тори ответ (Laurence Mennard, в процессе подготовки).
СИГНАЛИЗАЦИЯ ПУТЕЙ
Из-за их важную роль в микробном признании, вовлечение путей рецепторов, связанное с
| сигнальные пути |
Toll-подобный рецептор (TLR) / IL-1R в надсемействе-Gering аккуратного и постоянный ток IL-12, производство и хост устойчивость к T.gondii, недавно была решен. Врожденное иммунное распознавание основывается на ограниченном числе зародышевой линии кодируются рецепторов, такие как TLRs, которые распознают Возбудитель ассоциированные молекулярные паттерны (PAMPs) микробного происхождения (Quesniaux и др., 2004). На сегодняшний день, 11 членов семейства TLR были охарактеризованы. Несмотря на то, TLRs выражаются в широком диапазоне тканей, наибольшее разнообразие TLR мРНК находится в профессиональной АРС, что указывает на ключевую роль в TLRs врожденного иммунитета, что имеет важное значение в развитии приобретенного иммунного ответа, характеризующийся поляризацией наивных CD4+хелперов Т-клеток в сторону фенотипа Th1 или Th2. Мыши, лишенные миелоидный фактор дифференцировки 88 (MyD88), молекула адаптера используется всеми TLRs, а также IL-1R и IL-18R, показали почти полное отмену Оленя-индуцированной IL-12 ответа, и когда чал-lenged с Т. гондий нокаут (KO) животных продемонстрировали потерю устойчивости к инфекции equiva-одолжил, что ИЛ-12-дефицитных мышей (Scanga и др., 2002). TLR-2 было показано, что вклад в принимающей устойчивости мышей до очень высоких доз вызов Т. гондий (Mun и др., 2003b), а также STAG-индуцированной продукции хемокинов нейтрофилами. Тем не менее, TLR-2-дефицитный ДК, а также нейтрофилы производят нормальное количество IL-12 следующего STAG стимуляции (Scanga и др., 2002;. Del Rio и др, 2004).
Profilins представляют собой класс небольших актин-связывающих белков, присутствующих только в эукариотических клетках, которые имеют регуляторную роль в процессе полимеризации актина. Профилин представляет собой молекулу, которая производится из T.gondii, и присутствует в избытке в растворимых препаратах антигенов, которые производятся с использованием культур паразита. Молекулы профилина от токсоплазма генерирует мощный интерлейкин-12 (IL-12) в ответ мышиного ДК, которое зависит от-лор MyD88 Т. гондий профилин активирует РС через TLR11 (Яровинский и др., 2005). Это событие распознавания играет важную роль в защите хозяина мыши, хотя и не все различия, наблюдаемые у мышей MyD88 KO можно увидеть у мышей TLR11 KO. Несмотря на то, что до сих пор нет доказательств для Toll Реджепа-TOR, участвующей в распознавании Т. гондий во время заражения человека, и люди не выражают
TLR11, можно представить себе, что TLR11 может сыграть решающую роль в заболевании человека косвенно из-за сложный жизненный цикл паразита с участием кота и мышей.
Недавно мы определили роль в TLR9 воспалительного ответа Th1-типа, которая следует после пероральной инфекции с Т. гондий. Классически определяется лиганд для TLR9, бактериальный неметилированным ДНК CpG, имеет иммуномодулирующий эффект на клеточном уровне, и TLR9-/-Мышь не реагирует на иммуностимулирующий CpG ДНК (Хемй и др., 2000; Рутц и др., 2004; Вагнер, 2004). Человек TLR9-присвоили отзывчивость к CpG-ДНК происходит также через признание видоспецифических CpG мотивов (Бауэр и др., 2001). После вовлечения единения ДНК CpG с TLR9, A MyD88-зависимый сигнальный путь активирует NF-κВ, ULTI-счете приводит к секреции провоспалительных цитокинов Th1, такие как IL-12. В то время как TLR1, TLR2 и TLR4 являются клеточной поверхностью экспрессируется, текущее мнение предполагает, что TLR9 имеет преобладающую внутриклеточную локализацию в макрофагах и DC - выгодное положение для признания внутриклеточных патогенов.
После перорального заражения Т. гондий, suscepti-BLE В6, но не TLR9-/- (В6) мышей фона разработать Th1-зависимый острый илеит по сравнению с TLR9-/-мыши (B6 фон), которые свободны от кишечника воспаления. TLR9-/- мыши имеют более высокую нагрузку пару-сайт, чем контроль WT мышей, предполагая, депрессии ИФНЫγ-зависимая паразит убийство. IL-12, продуцирующих РС были уменьшены в TLR9-/ - мышей по сравнению с контрольной группой WT, которые Corre-вовали со снижением общей частоты Т-клетки, а также IFN-γ-продуцирующих Т-клетки из собственной пластинки. Заражение химерных мышей, имеющих выброска-Тион TLR9 либо в кроветворной или негемопоэтических отсеков указывает на то, что экспрессия TLR9 в обоих отсеках участвует (Миннс и др., 2006).
Участие второго типа рецептора и сигнального пути было обнаружено в исследованиях investi-стробирования роль хемокинов в миграции ДК в селезенке областей Т-клеток после инъекции STAG. Было установлено, что селезенке мышей, лишенных рецептора CCR5 CC хемокинов не отображается только нарушение миграции постоянного тока, но также выставлены Dimin-отполированными производство DC IL-12 (Aliberti и др., 2000).
600 Врожденный иммунитет В токсоплазме ИНФЕКЦИИ
Кроме того, контроллеры домена от наивных мышей CCR5 KO показали весьма дефектные IL-12 ответов при стимуляции STAG в пробирке. В соответствии с этими obser-дениями, мышей CCR5 KO отображенный уменьшился IL-12 производство и выживаемости после живой инфекции Т. Gondii. Кроме того, аналогичные снижение IL-12 ответа и выживаемость были замечены у мышей, обработанных токсином коклюша (PTX), который расцепле- сигнальный путь G-белка, используемого рецепторов хемокинов (Aliberti и Sher, 2002). Лечение PTX также отменили остаточный IL-12 производства наблюдается в РС от мышей MyD88 KO, предполагая, что ответ постоянного тока IL-12, зависит от того, как G-белок-связанных и MyD88-зависимых сигнальных путей-ки. Т. гондий выражает секретируемый моль-Cule, связанный в паразита с секреторными гранулами. Этот секретируемый белок, С-18,
С-18 было показано, что CCR5, а не лиганд TLR. Таким образом, рекомбинантный С-18 связывает CCR5 с умеренной аффинностью и инициирует передачу сигналов рецептора хемокинов, как измерено с помощью Ca2+Поток (Aliberti и др., 2003). (. Голдинг и соавт, 2003, 2005. Яровинский и др, 2004) Из-за связывание с CCR5, С-18 было показано, что эффективное Antago-NIST блокирующий как вирусный индуцированного слияния и клеток инфекционность ВИЧ-со-рецептора.
Во время Т. гондий инфекции, рецепторы хемокинов и TLRs могут функционировать вместе в активации APC. Если Th1-подобный иммунный ответ не контролируется, оральное заражение мышей В6 завершится летальным илеит в течение 7-9 дней после заражения. был найден IL-12, ответ селезеночного РСА до STAG в естественных условиях чрезвычайно быстро, достигая максимум через 36 часов, и сопровождался сопутствующим увеличением экспрессии клеточной поверхности CD40 (Seguin и Kasper, 1999;. Шульц и др, 2000;. Subauste и др, 1999; Subauste и Wessendarp., 2000; Вильегаса и др, 2000). Непосредственный спад в ответ затем наблюдал, со снижением до исходных условий
24 ч. Это сокращение производства IL-12 произошло параллельно с развитием отсутствия чувствительности к вторичной администрации STAG. Это явление было обнаружено, что длится в течение приблизительно 1 неделю, а не из-за апоптоз постоянного тока или подавление ИЛ-10. Последний
наблюдения свидетельствуют о том, что после начальной стимуляции Т. гондий, ответ DC IL-12 активно выключен.
Основываясь на наблюдении, что этот дендритный клеточный ответ сопровождается подавлением CCR5 рецептора, что (как описано выше) участни-паштеты в STAG-индуцированной продукции IL-12, механизмы, стимулированные Т. гондий, что приведет к вниз модулированных выражение CCR5 были рассмотрены. Lipoxin (LX) А4, метаболит арахидоновой кислоты, порожденный 5-липоксигеназы (LO) -зависимый путем, был идентифицирован в качестве основного ингибитора DC производств IL-12 (Aliberti и др., 2002). Т. гондий-инфицированный 5-LO-дефицитный мышей показал расширение производства IL-12 по CD11c+а также CD11c клеток в срезах головного мозга, предполагая, что LXA4 регулирует выработку IL-12 с другим АРС в дополнении к РСУ в естественных условиях. В дополнение к торможению провоспалительных цитокинов произ-вом, IL-10 оказывает значительное влияние на downregulatory IL-12 и IFN-γсигнализации, которые, как полагают, является результатом его индукции нескольких членов громителей сигнализации семейства цитокинов (SOCS), в частности, SOCS-1 и SOCS-3. В то время как лечение с помощью аналога LX было показано, чтобы побудить SOCS-2, эта активность не была формально связана с понижением модулирующих эффектов эйкозаноидов в естественных условиях, особенно в ее подавлении продукции провоспалительных цитокинов (Bannenberg и др., 2004; Aliberti, 2005).
Производство постоянного тока IL-10 сам не представляется, основной механизм, ответственный за увлажняющее производство IL-12, так как у мышей ДК от IL-10 KO произвести нормальные уровни IL-12 в пробирке и в естественных условиях следующие Stag (Gazzinelli и соавт., 1996;. Wille и др, 2004).
НК и НКТ КЛЕТКИ
В дополнение к IL-12, макрофаги и дендритные клетки производят IL-15. ИЛЫ-15 проявляет плейотропные функции на границе раздела между врожденным и адаптивным иммунитетом. ИЛ-15 представляет собой 14-кДа цитокин, который разделяет общие черты с IL-2 и проявляет стимулирующее действие на пролиферацию Т-клеток. Тем не менее, ИЛ-15 можно отличить от IL-2,
| НК и НКТ КЛЕТКИ |
его широкое распределение клеточного типа, его мощным в естественных условиях антиапоптотических эффектов, и, самое непосредственное отношение к этому обзору, в качестве моста между врожденной и Adap-TIVE иммунного ответа. IL-15 является необходимой для дифференциации и / или гомеостатического содержания трех подмножеств лимфоцитов, связанных с врожденной иммунной реакцией: НК, НКТ, и CD8ααинтраэпителиальная лимфоциты (IEL). IL-15 также является обязательным для выживания памяти CD8 Т-лимфоцитов. IL-15 индуцирует эффекторную Func-ции НК и CD8 Т-лимфоцит