Медленно растущие Быстро растущие
(свыше 7 дней) (менее 7 дней)
Пигментообразование
Нехромогенные Хромогенные
Образование ниацина
Ниацинпозитивные Ниациннегативные
Фотоактивация пигментообразования
Нет эффекта Фотохромогены Скотохромогены
Mycobacterium tuberculorsis относится к медленно растущим нефотохромогенным ниацинпозитивным микобактериям.
Mycobacterium bovis относится к медленно растущим нефотохромогенным ниациннегативным микобактериям.
Для идентификаций других патогенных для человека микобактерий используются дополнительные тесты.
В. Методы дифференцирования истинных туберкулезных бактерий
от потенциально патогенных и сапрофитных микобактерий
| Микобактерии | |||
| туберкулезные | потенциально патогенные | сапрофитные | |
| Корд-фактор (трегалозодимиколат) | + | – | – |
| Каталазная проба | – (±) | ++ | ++ |
| Отношение к красителям | адсорбируют | не адсорбируют | не адсорбируют |
| Вирулентность для морских свинок и кроликов | + | – | – |
| Ниациновая проба | + | – | – |
ЗАНЯТИЕ № 6
Дата________________
Тема: МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БРЮШНОГО ТИФА И САЛЬМОНЕЛЛЕЗОВ
План занятия
1. Изучение морфологических, культуральных и биохимических свойств сальмонелл.
2. Бактериологическое исследование крови брюшнотифозного больного. Посев крови на среду с желчью (разбор с демонстрацией).
3. Бактериологическое исследование испражнений брюшнотифозного больного: посев на среду обогащения и дифференциально-диагностические среды (разбор схемы).
4. Реакция Видаля. Постановка реакции агглютинации с O- и Н-диагностикумами. Регистрация результатов реакции Видаля (разбор с демонстрацией).
5. Исследование пищевых продуктов на наличие возбудителей пищевых токсикоинфекций (разбор схемы).
6. Исследование пищевых продуктов на наличие энтеротоксигенного стафилококка и обнаружение стафилококкового энтеротоксина. Разбор методов.
7. Разобрать особенности антигенного строения и принципы современной серологической классификации сальмонелл (демонстрация схемы).
Методические указания
1. Изучение морфологических, культуральных и биохимических свойств сальмонелл
Промикроскопировать препараты-мазки из культур бактерий - возбудителей брюшного тифа, паратифа А, S. enteritidis и кишечной палочки, окрашенных по Граму. Сравнить морфологию бактерий во всех препаратах и отметить морфологическое сходство их друг с другом. Препараты зарисовать.
Исследовать характер роста возбудителей брюшного тифа, паратифа А, S. enteritidis и кишечной палочки на МПА, МПБ, Эндо.
Изучить и записать в тетрадь биохимические свойства бактерий тифо-паратифозной группы по готовым демонстрационным наборам посевов на среды "пестрого ряда".
2. Бактериологическое исследование крови брюшнотифозного
больного. Посев крови на среду с желчью (разбор с демонстрацией).
Взятая из вены больного кровь в количестве 8-10 мл для выделения гемокультуры засевается в среду с желчью (МПБ + 10 процентов желчи + 1 процент глюкозы + индикатор Андреде).
Посев крови производят непосредственно у постели больного в десятикратный (по отношению к количеству крови) объем питательной среды. Посев помещают в термостат при 37°C, а на следующие сутки производят высев на скошенный агар и на дифференциально-диагностические среды (Левина, Плоскирева, висмут-сульфит-агар, Эндо).
Отметить изменения, наступившие в среде Рапопорт в результате роста возбудителей брюшного тифа (покраснение среды) и паратифов или других возбудителей сальмонеллёзов (покраснение среды и наличие газа). Пересев культуры бактерий со среды Рапопорт на скошенный МПА и среды Плоскирева, Эндо, Левина (демонстрация).
Окончательная идентификация проводится по биохимическим свойствам и антигенным свойствам – агглютинация на стекле с монорецепторными Vi-, О- и Н-сыворотками.
| Рис. 1. Возбудитель брюшного тифа Salmonella typhi | Рис. 2. Возбудитель паратифа А S. paratyphi А |
| Ub ybJ3dJPRgeXUymbSFy43g0yiaC2N7i0vdHqk547qU3U2CLt2W61nqUKqjrvXkJ6+9m8qRry9WbZP IAIt4S8Mv/iMDiUzHdzZNl4MCI9ZxkkExQfYVvdZDOKAkKQqAVkW8v+B8gcAAP//AwBQSwECLQAU AAYACAAAACEAtoM4kv4AAADhAQAAEwAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAW0NvbnRlbnRfVHlwZXNdLnht bFBLAQItABQABgAIAAAAIQA4/SH/1gAAAJQBAAALAAAAAAAAAAAAAAAAAC8BAABfcmVscy8ucmVs c1BLAQItABQABgAIAAAAIQCDpfWIJgIAADIEAAAOAAAAAAAAAAAAAAAAAC4CAABkcnMvZTJvRG9j LnhtbFBLAQItABQABgAIAAAAIQDALEsI3QAAAAgBAAAPAAAAAAAAAAAAAAAAAIAEAABkcnMvZG93 bnJldi54bWxQSwUGAAAAAAQABADzAAAAigUAAAAA "/> | |
| Рис. 3. Возбудитель паратифа В S. enteritidis | Рис. 4. Кишечная палочка Escherichia coli |
3. Бактериологическое исследование испражнений брюшнотифозного больного: посев на среду обогащения и дифференциально-диагностические среды (разбор схемы)
Испражнения брюшнотифозного больного засевают на одну из сред обогащения (среда магниевая, среда с селенитом) и одновременно на дифференциально-диагностические среды: Эндо, Плоскирева, Левина или висмут-сульфит-агар. Через 8-10 часов инкубирования в термостате со среды обогащения также производится посев на плотную дифференциально-диагностическую среду.
На чашках с посевами находят бесцветные прозрачные колонки, типичные для возбудителей тифо-паратифозной группы. Половину колонии используют для приготовления препарата-мазка (окрасить по Граму), оставшуюся часть колонки засевают на среды "пестрого ряда", среду Пешкова (для исследования подвижности) и на скошенный МПА.
Окончательная идентификация проводится по биохимическим свойствам и антигенным свойствам – агглютинация на стекле с монорецепторными Vi-, О- и Н-сывоторками.