Существует также проблема с суррогатным маркером, используемым для оценки клинической эффективности ингибиторов протеазы. Так называемый тест на вирусную нагрузку, как утверждается, измеряет фрагменты РНК вируса ВИЧ (так называемый номер копии), но анализ не дает никаких указаний на жизнеспособность или инфекционность вирусных частиц, предположительно присутствующих в плазме крови пациента. Еще до начала антиретровирусной терапии 99,9% вирусов, выявленных в ходе теста на вирусную нагрузку, оказались неинфекционными у единственного обследованного человека (34). (Цифра 99,9% согласуется с известным уровнем дефектных вариантов генома ВИЧ (35,36).) И после 2 дней терапии ингибитором протеазы-коктейлем ни одна из более чем 500 000 вирусных частиц на мл в плазме крови этого пациента не была инфекционной (34). Как правило, у наивных пациентов-ингибиторов, как и в клеточных культурах, только 1 из 100 000 вирусных частиц является инфекционным (35,37-40). Таким образом, тест на вирусную нагрузку измеряет в подавляющем большинстве неинфекционный вирус. Значение всего этого неинфекционного вируса не было адекватно рассмотрено.
Чтобы еще больше усложнить ситуацию, терапия ингибиторами протеазы приводит к дефектным, неинфекционным вирусным частицам (2,7-9), которые более стабильны, чем вирус дикого типа, таким образом добавляя к уже ошибочно высокой мере "вирусной нагрузки"."Еще больше запутывая этот вопрос, в 1993 году, Ho et al. сообщалось о 12 пациентах со СПИДом, в том числе 8, у которых имелись "факторы риска СПИДа", которые были полностью свободны от ВИЧ: "анализы специфических антител, вирусные культуры и методы полимеразной цепной реакции (ПЦР)" для ВИЧ были отрицательными (41). Короче говоря, никто не показал, что анализ вирусной нагрузки имеет какое-либо отношение к инфекционному вирусу. Фактически, самое большее, что может быть заявлено для теста на вирусную нагрузку, это то, что в лучшем случае он обнаруживает вирусные обломки.
РЕЗЮМЕ
Степень устойчивости мутантных протеаз к ингибиторам имеет значение только в том случае, когда жизнеспособность и инфекционность мутантных вирусов также количественно оценивают. Общее недоразумение в отношении значимости устойчивых к ингибиторам мутантов можно в значительной степени объяснить общепринятой практикой тестирования мутантных протеаз на одном субстрате без учета восьми последовательных расщеплений, необходимых для жизнеспособного созревания ВИЧ (42). Крайне маловероятно, что мутации фермента, достаточно существенные для защиты протеазы от ингибирования, в то же время оставят практически нетронутой его протеолитическую активность в отношении всех восьми расщеплений. Ни одна из устойчивых к ингибиторам мутантных протеаз ВИЧ, о которых сообщалось до сих пор (даже в отсутствие ингибиторов), не приблизилась к минимальному уровню общей каталитической активности, необходимой для инфекционного жизнеспособного вируса. Заключение этого анализа состоит в том, что ингибитор-резистентные мутантные ВИЧ-протеазы очень маловероятны для обеспечения жизнеспособности вируса in vivo. Поэтому травматизация пациентов с призраком лекарственно-устойчивых мутантов ВИЧ в результате несоблюдения драконовского режима лечения является неоправданной. Важно подчеркнуть, что ингибиторы протеазы являются токсичными соединениями с растущим списком серьезных и опасных для жизни последствий. Наконец, обманчиво названный тест "вирусная нагрузка" не измеряет инфекционный вирус и не должен использоваться для указания на наличие ВИЧ в плазме крови пациентов.
ССЫЛКИ НА ЛИТЕРАТУРУ
1. Дарк, П. Л., Натт, Р. Ф., Брэди, С. Ф., Гарский, В. М., Чиккароне, Т. М., Лей, К. Т., Лумма, П. К., Фрейдингер, Р. М., Вебер, Д. Ф. и Сигал, И. С. (1988) биохимические и биофизические исследования коммуникации 156 (1), 297-303
2. Kageyama, S., Hoekzema, D. T., Murakawa, Y., Kojima, E., Shirasaka, T., Kempf, D. J., Norbeck, D. W., Erickson, J., И Mitsuya, H. (1994) исследование СПИДа и ретровирусы человека 10(6), 735-743
3. Gowda, S., Stein, B., и англичанин, E. (1989) журнал биологической химии 264, 8459-8462
4. Kaplan, A. H., and Swanstrom, R. (1991) Труды Национальной академии наук (США) 88, 4528-4532
5. Mervis, R. J., Ahmad, N., Lillehoj, E. P., Raum, M. G., Salazar, F. H. R., Chan, H. W., И Venkatesan, S. (1988) журнал вирусологии 62, 3993-4002
6. Pettit, S. C., Moody, M. D., Wehbie, R. S., Kaplan, A. H., Nantermet, P. V., Klein, C. A., и Swanstrom, R.(1994) журнал вирусологии 68 (12), 8017-8027
7. Каплан, А. Х., Зак, Дж. А., Книгге, м., Пол, Д. А., Кемпф, Д. Дж., Норбек, Д. В. и Суонстром, Р. (1993) журнал вирусологии 67 (7), 4050-4055
8. Craig, J. C., Duncan, I. B., Hockley, D., Grief, C., Roberts, N. A., and Mills, J. S. (1991) антивирусные исследования 16, 295-305
9. Ashorn, P., McQuade, T. J., Thaisrivongs, S., Tomasselli, A. G., Tarpley, W. G., и Moss, B. (1990) Труды Национальной академии наук (США) 87, 7472-7476
10. Kohl, N. E., Emini, E. A., Schleif, W. A., Davis, L. J., Heimbach, J. C., Dixon, R. A. F., Scolnick, E. M., and Sigal, I. S. (1988) Труды Национальной академии наук (США) 85, 4686-4690
11. Babé, L. M., Rosé, J., and Craik, C. S. (1995) Труды Национальной академии наук (США) 92, 10069-10073
12. Rosé, J., Babé, L. M., и Craik, C. S.(1995) журнал вирусологии 69 (5), 2751-2758
13. Konvalinka, J., Heuser, A.-M., Hruskova-Heidingsfeldova, O., Vogt, V. M., Sedlacek, J., Strop, P., И Kräusslich, H.-G. (1995) Европейский журнал биохимии FEBS 228, 191-198
14. Mergener, K., Fäcke, M., Welker, R., Brinkmann, V., Gelderblom, H. R., и Kräusslich, H. G. (1992) Вирусология 186, 25-39
15. Peng, C., Ho, B. K., Chang, T. W., and Chang, N. T. (1989) журнал вирусологии 63, 2550-2556
16. Pollard, R. B. (1994) фармакотерапия 14 (6 Pt 2), 21S-29S
17. В конце концов, если бы я не знал, что это было бы так, то я бы не мог сказать, что это было бы так, как если бы я не знал, что это было бы так.
18. Schapiro, J. M., Winters, M. A., Stewart, F., Efron, B., Norris, J., Kozal, M. J., И Merigan, T. C. (1996) летопись внутренней медицины 124(12), 1039-1050
19. Якобсен, H., Hänggi, M., Ott, M., Duncan, I. B., Owen, S., Andreoni, M., Vella, S., И Mous, J. (1996) журнал инфекционных болезней 173, 1379-1387
20. В конце концов, если бы я не знал, что это было так, то не мог бы сказать, что это было бы так, если бы я не знал, что это было бы так.
21. Pazhanisamy, S., Stuver, C. M., Cullinan, A. B., Margolin, N., Rao, B. G., и Livingston, D. J. (1996) журнал биологической химии 271 (30), 17979-17985
22. Роуз, Р. Е., Гонг, Y.-F., Грейток, Дж. а., Бехтольд, К. М., Терри, Б. Дж., Робинсон, Б. С., Алам, М., колонно, Р. Дж. и Лин, П.-Ф. (1996) Труды Национальной академии наук (США) 93, 1648-1653
23. Moutouh, L., Corbeil, J., and Richman, D. D. (1996) Труды Национальной академии наук (США) 93, 6106-6111
24. Бартлетт, J. G. (1996) летопись внутренней медицины 124 (12), 1086-1087
25. В то же время, как и в случае с другими учеными, я считаю, что, несмотря на то, что я считаю, что я имею в виду, что я имею в виду, я имею в виду, что я имею в виду, что я имею в виду, когда говорю об этом.
26. Козал, М. Дж., Шах, Н., Шэнь, н., Ян, Р., Фучини, Р., Мериган, т. к., Ричман, Д. Д., Моррис, Д., Хаббелл, Э., Чи, м., И Гингерас, Т. Р. (1996) Nature Medicine 2 (7), 753-759
27. Леха, W. J., Wang, G., Yang, Y. L., Chee, Y., Dorman, K., McCrae, D., Lazzeroni, L. C., Erickson, J. W., Sinsheimer, J. S., И Kaplan, A. H. (1996) журнал вирусологии 70(3), 2038-2043
28. Rasnick, D.(1997) журнал биологической химии 272 (10), 6348-6353
29. Lin, Y., Lin, X., Hong, L., Foundling, S., Heinrikson, R. L., Thaisrivongs, S., Leelamanit, W., Raterman, D., Shah, M., Dunn, B. M., and Tang, J.(1995) Biochemistry 34 (4), 1143-1152
30. Дикс, С. Г., Смит, М., холодный, М., и Кан, J. O.(1997) журнал Американской Медицинской Ассоциации 277 (2), 145-153
31. Сафтиг, П., Гетман, М., Шмахль, В., Вебер, К., Гейне, л., Моссман, Х., Кестер, А., Гесс, Б., Эверс, М., фон фигура, К. и Питер, С.(1995) EMBO Journal 14 (15), 3599-3608
32. Daudon, M., Estépa, L., Viard, J. P., Joly, D., and Jungers, P. (1997) Ланцет 349, 1294-1295
33. Brau, N., Leaf, H. L., Wieczorek, R. L., and Margolis, D. M. (1997) Ланцет 349, 924-925
34. Перельсон, A. S., Neumann, A. U., Markowitz, M., Леонард, J. M., и Ho, D. D. (1996) Science 271 (5255), 1582-1586
35. Ян, Л. С., Кларк, С. Дж., Каппес, Дж. к., лук, К.-К., Хан, Б. Х., шоу, Г. М., и Lifson, J. D. (1993) Science 259, 1749-1754
36. Sheppard, H. W., Ascher, M. S., and Krowka, J. F. (1993) Nature 364(6435), 291-292
37. Cao, Y., Quin, L., Zhang, L., Safrit, J., and Ho, D. D. (1995) N Engl J Med 332(4), 201-208
38. McKeating, J. A., and Moore, J. P. (1991) Nature 349(6311), 660