№ п\п | Этап выполнения | Способ выполнения | Самоконтроль |
«А» 1. | Знакомство с техникой забора крови для постановки серологических реакций (по видеосюжету) | Алгоритм взятия крови из вены для исследования. Цель: для постановки серологических реакций. Показания: По назначению врача. Оснащение: · стерильный лоток; · шарики марлевые стерильные 4-5 штук; · полотенце; · жгут; · этиловый спирт 70; · подушечка клеенчатая; · стерильный шприц емкостью 10-20 мл; · игла для в\в; · стерильные перчатки резиновые; · пробирка с пробкой; · штатив для пробирки; · маска; · растворы дезинфицирующие; · емкость для дезинфекции; · набор «Анти – Спид»; Возможные проблемы пациента: · беспокойство и страх пациента; · негативный настрой. Последовательность действий с обеспечением безопасности окружающей среды: · информируйте пациента о предстоящей манипуляции; · вымойте руки; · усадите или уложите пациента; · подложите под локоть клеенчатую подушечку; |
· наложите жгут на 5 см выше локтевого сгиба через полотенце, сохраняя пульс4 · наденьте стерильные перчатки, маску; · попросите пациента поработать кулаком, а сами нагнетайте кровь; · обследуйте локтевой сгиб, найдите вену; · обработайте дважды марлевым шариком, смоченным спиртом, в направлении сверху вниз; · высушите 3-м стерильным шариком локтевой сгиб; · фиксируйте вену локтевого сгиба нажатием кожи, с помощью большого пальца левой руки, не касаясь места укола; · пропунктируйте вену, введя иглу параллельно вене на одну треть длины, срезом вверх (при сжатом кулаке пациента); · оттяните поршень шприца на себя и убедитесь, что игла попала в вену; · попросите пациента не разжимать кулак; · наберите в шприц 1-2 мл крови; · попросите пациента разжать кулак и снимите жгут; · приложите к месту пунктирования вены сухой стерильный марлевый шарик и извлеките иглу из вены, не снимая ее со шприца; · попросите пациента согнуть руку в локтевом суставе и так фиксируйте еще 5 мин., зажав марлевый шарик; · перенесите кровь из шприца в стерильную пробирку, не касаясь ее краев; · пробирка с кровью для серологических исследований может храниться в холодильнике не более 1 суток с момента забора во избежание гемолиза крови, затрудняющего исследование. Пробирку с кровью поместите в термостат при 37 С на 10-15 мин. После свертывания крови сыворотку отсосите пипеткой и перенесите в другую пробирку. Сыворотка должна быть прозрачной; · Обработайте шприц, иглу, жгут, клеенчатую подушечку в соответствии с требованиями санэпидрежима. | ||||||||
«А» 2. | Развернутая реакция агглютинации для определения титра антител в сыворотке больного с целью серодиагностики брюшного тифа. Ход постановки реакции | Используя методические указания для студентов по системе ООД № 6. 1, поставьте развернутую реакцию агглютинации. 1. Установите в штатив 5 (пять) пробирок. 2. На каждой пробирке укажите степень разведения. На контрольной пробирке поставьте «К» (контроль). 3. Разведите по методике. 4. После того как сделаны разведения сыворотки, во все пробирки, кроме контрольной, внесите 1-2 капли антигена - диагностикума. Пробирки встряхните и сдайте преподавателю. 5. Учет произвести на следующем занятии. Контроль 1 мл физио- логичес- кого р-ра | 1. Для какой цели используется реакция агглютинации? 2. Какой возьмете диагностикум, если исследуете сыворотку, содержащую холерный вибрион? | |||||
Реакция АГ + АТ протекает в 2 фазы: 1 фаза – специфическая (взаимодействуют антиген и антитело с образованием комплекса (АГ + АТ): 2 фаза – неспецифическая (проявление этой реакции, видимый эффект). | ||||||||
Фазы реакции | ||||||||
Определяет | Первая взаимодействуют АГ + АТ | Вторая развитие видимой реакции | ||||||
1. Специфичность реакции | + | |||||||
2. Вид реакции | + | |||||||
3. Чувствительность реакции | + | |||||||
4. Скорость реакции | + | |||||||
«С» Реакция агглютинации (дайте определение) …………………………………....................... ……………………………………………………………………………………………………….. | ||||||||
|
|
(+) феномен агглютинации образование агрегатов (крупнохлопчатых – при наличии у бактерии жгутиков или мелкозернистых – при их отсутствии); (-) феномен агглютинации - равномерная муть. | |||
«А» 3. 4. | Реакция агглютинации на стекле. (Грубера) Учет реакции агглютинации на стекле | 1. На обезжиренное предметное стекло нанесите 2 капли специфической сыворотки в разные места. 2. В одну из капель сыворотки добавьте каплю изотонического раствора хлорида натрия. В эту же каплю добавьте каплю диагностикума – взвесь бактерий. Размешайте ее до образования гомогенной взвеси. 3. Капля сыворотки, в которую не вносили бактерий, называется контролем. Поскольку реакция при комнатной температуре протекает 1-3 минуты, рассмотрите при ярком свете каплю сыворотки с хлоридом натрия и взвесью бактерий, если появились хлопья агглютината или зерна на фоне прозрачной жидкости, то результат реакции считается положительным. Запишите в тетради и зарисуйте. | 1. Как называют реакцию на стекле? 2. Для какой цели используется в медицинской практике? |
Реакция на стекла (Грубера) |
«С» Серодиагностика ………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………………... ………………………………………………………………………………………………………..
|
Принцип реакции агглютинации: Сыворотку больного разводят в нескольких рядах к каждому разведению прибавляют равное количество соответствующего диагностикума.
Диагностикум содержит ингредиенты: Исследуемый материал ______________________ содержит_________________________ Диагностический препарат ___________________ содержит_________________________
«С» Реакция преципитации (дайте определение) …………………………………………… ………………………………………………………………………………………………………...
4. | Постановка и чет реакции преципитации | (+) феномен преципитации – помутнение (-) феномен преципитации – отсутствие помутнения | |||
Типы реакций преципитации. Применение Р.П. 1. В экспресс – диагностике эпидемического цереброспинального менингита (реакция встречной иммунодиффузии на агаре) Принцип реакции: в слое агар – агар вырезают лунки, в которые вносят соответствующие ингредиенты реакции. При встречной диффузии между лунками в зоне эквивалентности образуется линия преципитата. | |||||
Ингредиенты: Исследуемый материал ______________________________________________________ содержит _____________________________________ | Самоконтроль 1. Когда ставится реакция преципитации? 2. Почему нельзя применять мутные ингредиенты? | ||||
«А» | Определение экзотоксина, проводят методом диффузной преципитации в геле. Метод основан на взаимодействии токсина с антитоксином. | ||||
Методика определения. В чашку Петри с питательным агаром раскладывают полоску фильтровальной бумаги 1,5х8 см смоченную противодифтерийной антитоксической сывороткой. Используемую культуру засеивают «бляшками». Посев ставят в термостат на 18-24 часа; 48 часов. Посев изучают через 48 часов. | |||||
Испытуемую культуру считают токсигенной, если линии преципитации четкие и сливаются с линиями преципитации контрольного токсигенного штамма.
Если линии преципитации перекрещиваются с линиями контрольного штамма или вообще отсутствуют, выделенную культуру считают нетоксигенной.