Иммуномодуляторы. Часть первая.
Для того, чтоб разбирать иммуномодуляторы в ветеринарии, необходимо сначала понимать что это вообще такое, чтоб самостоятельно оценивать любой препарат, который попадет в руки и на упаковке которого заявлено, что это иммунномодулятор. Иммуномодуляторы- это препараты, которые могут изменить активность иммунной системы в любую сторону(активация, супрессия). Специфические иммуностимуляторы, такие как вакцины, стимулируют иммунный ответ на специфические антигенные типы. Неспецифические иммуностимуляторы действуют независимо от антигенной специфичности для усиления иммунного ответа другого антигена или стимуляции компонентов иммунной системы без антигенной специфичности, таких как адъюванты и неспецифические иммуностимуляторы, и широко используются при хронических инфекциях, иммунодефицитных, аутоиммунных и неопластических заболеваниях.
Иммуностимуляторы:
-Бактериальные вакцины (содержат убитые или инактивированные бактерии, которые активируют иммунную систему. Антитела вырабатываются против этих конкретных бактерий и предотвращают бактериальную инфекцию).
-Колониестимулирующий фактор- полипептидный цитокин, относится к группе гранулоцитарно-макрофагальных колониестимулирующих факторов вместе с интерлейкином 3 и интерлейкином 5. Фактор образуется при стимуляции особой популяции B-клеток, IRA-B (активаторные B-клетки врождённого иммунитета). Применяется с целью уменьшения выраженности нейтропении (после противоопухолевой химиотерапии) и лейкопении (в случаях недостаточности костномозгового кроветворения), при инфекционных заболеваниях (включая ВИЧ-инфекцию у людей), после трансплантации костного мозга. Например Филграстим(Нейпоген). В ветеринарии используется в тяжелых случаях нейтропении у собак, вызванной парвовирозом, гиперэстрогенизмом, при лечении противоопухолевыми агентами, апластическим синдромом и у кошек в случаях инфекционной панлейкопении. Филграстим показан при нейтропениях связанных с нарушением общего состояния, сопровождающимся лихорадкой, но не в случаях транзиторных лейкопений. Есть хорошая статья из Journal of Veterinary Science & Medical Diagnosis 2017 года, где рассказывается о панлейкопении кошек, о ее лечении Нейпогеном(филграстим) Авторы отметили главные факторы хорошего успеха в лечении даже у котят от 5 до 6 недель, они были следующие:1) быстрая постановка диагноза; 2) немедленно начатое лечение- Neupogen и антибиотик, активный против e-coli (грамм отрицательный); 3) устранение главных симптомов болезни на первом этапе- высокая температура, диарея и рвота; 4) устранение осложнений на втором этапе- обезвоживание и контроль высоких ферментов печени; и 5) минимизировать септицемию на третьем этапе. Изолирование больных кошек, немедленная вакцинация всех невакцинированных кошек или тех, кто в зоне риска модифицированной живой вакциной. Преимущество заключается в том, что кошка не продуцирует антитела к данному продукту и его можно использовать в долгосрочной перспективе. В статье авторы наблюдали только 33% успеха лечения используя вспомогательную терапию без Neupogen и до 90% выживаемости с использованием Нейпоген с поддерживающей терапией. Рекомендуемая доза составляет около 1/10 человеческой дозы для кошки это около 6 мкг / кг. Можно использовать дозу около 3 мкг на кг. https://www.scitechnol.com/peer-review/successful-treatment-of-feline-panleukopenia-a-guideline-for-rescuers-and-veterinarians-part-i-bxN2.pdf
-Интерфероны. Различают интерфероны типа I (образуются в ответ на обработку клеток вирусами, молекулами двухцепочечной РНК, полинуклеотидами и рядом низкомолекулярных природных и синтетических соединений) и интерферон типа II (продуцируется лимфоцитами и макрофагами, активированными различными индукторами; действует как цитокин). Интерфероны видоспецифичны. Каждый биологический вид, способный к их образованию, продуцирует свои уникальные продукты, похожие по структуре и свойствам, но не способные проявлять перекрёстный антивирусный эффект (то есть действовать в условиях организма другого вида). Интерферонами являются белки, продуцируемые опухолевыми клетками или клетками-хозяевами, которые инфицированы вирусами, бактериями и другими неизвестными нуклеиновыми кислотами. Интерфероны также активируют другие клетки, которые служат частью иммунной системы и разрушают инвазивные патогены. Интерфероны классифицируются на: альфа (из белых клеток), бета (из фибробластов) и гамма (из лимфоцитов). Интерфероны во многих отношениях усиливают иммунную систему, поэтому их можно использовать для лечения различных состояний, связанных с иммунной системой. Интерфероны, используемые терапевтически, производятся с использованием технологии рекомбинантных ДНК. Интерфероны альфа используются для лечения вирусных инфекций (хронический гепатит, папилломавирус человека) и лечения рака (меланома). Механизм действия до конца не изучен и в настоящее время вводится животным(в виде рекомбинантного интерферона человека в качестве экспериментального лечения, безопасность и эффективность интерферонов альфа у животных до сих пор не установлена). Применение у людей имеет целый ряд ограничений – болезни сердца, щитовидной и поджелудочной железы, инфекции в анамнезе, в тч герпес, депрессии. Он снижает количество тромбоцитов в крови, повышает сахар в крови, женщинам применяющих интерферон следует избегать беременности, запрещено использовать у детей, так как может привести к смерти. То есть, данные препараты должны вводится строго под контролем врача. https://www.drugs.com/cdi/interferon-alfa-2a-solution.html. Исследования на животных показали тератогенный эффект. В Applied Pharmacology for Veterinary Technicians 5th Edition говорится о том, что интерферон альфа использовали для попытки предотвращения фатальных осложнений на фоне вирусной лейкемии кошек и для попытки увеличить выживание, у кошек с ФИП может показать улучшение состояния. Коммерческие продукты- Roferon A, Intron A, Alferon N, Virbagen Omega (ветеринарный продукт, который одобрило Европейское агенство https://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/EPAR_-_Summary_for_the_public/veterinary/000061/WC500069605.pdf). Функциональный ген в геноме интерферон омега (IFN-омега)- это мономерный гликопротеин, отдаленно связанный по структуре с IFN-альфа и IFN-бета, но не имеющий отношения к IFN-гамма. IFN-омега секретируется зараженными вирусом лейкоцитами в качестве основного компонента интерферона лейкоцитов. IFN-омега не имеет отношения к IFN-альфа, -бета и -гамма в своих антигенных свойствах, поскольку он не перекрестно реагирует с антисывороткой или моноклональными антителами в иммунологических анализах или биоанализах противовирусной нейтрализации. Антитела, индуцированные у пациентов с помощью долгосрочной терапии ИФН-альфа 2, которые блокируют активность IFN-альфа 2, не дезактивируют ИФН-омега. Поскольку ИФН-омега обладает биологической активностью и видоспецифичен, то оценка его терапевтического потенциала должна будет исследоваться в клинических испытаний. Есть данные о том, что применение его орально у кошек имеет терапевтический потенциал.
Интерферон бета используется для лечения или замедления прогрессирования рассеянного склероза. Продуцируется клетками млекопитающих, а интерферон бета 1b продуцируется модифицированными E.Coli. Не является лекарственным средством для лечения рассеянного склероза, но при раннем назначении может влиять на развитие заболевания. В целом, терапия интерфероном бета приводит к уменьшению воспаления нейронов в головном мозге. Торговые названия препаратов: Avonex был одобрен в США в 1996 году и в Европе в 1997 году и зарегистрирован в более чем 80 странах мира. Rebif. Данных о применении этой группы интреферонов у животных нет.
Интерферон гамма представляет собой димеризованный растворимый цитокин, который является единственным членом класса интерферонов типа II. Важность интерферона гамма в иммунной системе частично связана с его способностью ингибировать репликацию вируса напрямую, имеет решающее значение для врожденного и адаптивного иммунитета против вирусных, некоторых бактериальных и протозойных инфекций. Рекомбинантный человеческий интерферон-гамма, как дорогостоящий биофармацевтический препарат, экспрессируется в различных системах экспрессии, включая прокариотические, простейшие, грибковые (дрожжи), растения, насекомые и клетки млекопитающих. Человеческий интерферон-гамма обычно экспрессируется в Escherichia coli, продается как ACTIMMUNE®, однако полученный продукт системы прокариотической экспрессии не гликозилируется с коротким периодом полураспада в кровотоке после инъекции; процесс очистки от бактериальной экспрессионной системы также очень дорог. Другие системы экспрессии, такие как Pichia pastoris, не показали удовлетворительных результатов с точки зрения выхода. Интерферон гамма одобрен FDA для лечения хронического гранулематозного заболевания. Было показано, что интерферон- гамма, хотя и официально не одобрен, но эффективен при лечении пациентов с умеренным и тяжелым атопическим дерматитом. Интерферон гамма не одобрен для лечения иммунотерапией рака.Однако, наблюдали улучшение выживаемости, когда гамма - интерферона вводили пациентам с карциномами мочевого пузыря и при меланоме. Исследование in vitro интерферона-гамма в раковых клетках результаты указывают на антипролиферативную активность, приводящую к ингибированию роста или гибели клеток, обычно вызванные апоптозом, но иногда аутофагией https://www.sciencedirect.com/topics/agricultural-and-biological-sciences/interferon-gamma
Применение интерферона гамма в ветеринарии. The IGRA(ID Screen® Ruminant IFN-g sandwich ELISA) для диагностики туберкулеза у крс. Суть в том, что лейкоциты больных животных будут выпускать интерферон-гамма (IFN-g) при смешивании с антигенами (веществами, которые могут продуцировать иммунный ответ), полученными из M. Tuberculosis. https://www.id-vet.com/produit/id-screen-ruminant-ifn-g/. Препаратов, содержащих собачьи или кошачьи интерфероны гамма не описано.
-Интерлейкины. Это группа цитокинов(, большинство интерлейкинов синтезируются вспомогательными CD4- лимфоцитами, а также моноцитами, макрофагами и эндотелиальными клетками. Они способствуют развитию и дифференциации T- и B-лимфоцитов и гемопоэтических клеток. +Интерлейкин 1 (делятся на 1 альфа и 1 бета) представляют собой цитокины, которые участвуют в регуляции иммунных реакций, воспалительных реакциях и гемопоэзе. +Интерлейкин 2 -Т-лимфоциты регулируют рост и дифференцировку Т-клеток и некоторых В-клеток за счет выделения секретируемых белковых факторов. Представляет собой лимфокин, который индуцирует пролиферацию чувствительных Т-клеток. Кроме того, он действует на некоторые В-клетки через рецептор-специфическое связывание в качестве фактора роста и стимулятора продуцирования антител. +Интерлейкин 3 (IL3) представляет собой цитокин, который регулирует гемопоэз, контролируя продукцию, дифференцировку и функцию гранулоцитов и макрофагов. +Интерлейкин 4 (IL4) продуцируется CD4 Т-клетками, специализирующимися на оказании помощи В-клеткам для пролиферации и перехода к рекомбинации класса и соматической гипермутации. +Интерлейкин 5 (IL5), также известный как фактор дифференцировки эозинофилов (EDF), представляет собой специфический цитокин для эозинофилпоэза. +Интерлейкин 6 играет существенную роль в окончательной дифференцировке В-клеток в клетки, секретирующие иммуноглобулин, а также индуцирует рост миеломы / плазмоцитомы, дифференцировку нервных клеток и в гепатоцитах - реагенты с острой фазой.+ Интерлейкин 7 представляет собой цитокин, который служит фактором роста ранних лимфоидных клеток как линий B-, так и T-клеток.+ Интерлейкин 9 представляет собой цитокин, который поддерживает независимый от ИЛ-2 и ИЛ-4 независимый рост хелперных Т-клеток. +Интерлейкин 10 представляет собой белок, который ингибирует синтез ряда цитокинов, включая IFN-гамма, ИЛ-2, ИЛ-3, Фактор некроза опухоли, продуцируемые активированными макрофагами и хелперными Т-клетками.+ Интерлейкин 11 представляет собой секретируемый белок, который стимулирует мегакариоцитопоэз, что приводит к увеличению производства тромбоцитов, а также к активации остеокластов, ингибированию пролиферации эпителиальных клеток и апоптозу и ингибированию выработки медиаторов макрофагов. +Интерлейкин 12 участвует в стимуляции и поддержании клеточных иммунных реакций Th1, включая нормальную защиту хозяина от различных внутриклеточных патогенов, индуцирует выработку интерферона гамма.+ Интерлейкин 13 является плейотропным цитокином, который может иметь важное значение для регуляции воспалительных и иммунных реакций. Он ингибирует образование воспалительных цитокинов и взаимодействует с ИЛ2 в регуляции синтеза интерферона-гамма. Последовательности ИЛ-4 и ИЛ-13 дистанционно связаны. +Интерлейкин 15 представляет собой цитокин, который обладает множеством биологических функций, включая стимуляцию и поддержание клеточных иммунных реакций. + Интерлейкин 17 является мощным провоспалительным цитокином, продуцируемым Т-клетками с активированной памятью. И др ИЛ. На основе интерлейкинов созданы такие препараты, как Oncept IL2 для лечения фибросаркомы у кошек, ALVAC IL2 – кошачий интерлейкин 2, так же для лечения фибросаркомы(препараты будут рассмотрены отдельно). Так же интерлейкины широко используются для лечения меланомы, опухолевого плеврита, в исследованиях получают хорошие результаты, но требуются дальнейшие исследования. Интерлейкин 2 одобрен FDA и Европейским агенством. Но ИЛ2 дозозависимый и может вызвать ряд тяжелых побочных эффектов. ИЛ 2 находится на клинических испытаниях для лечения хронических вирусных инфекций и в качестве адъюванта для вакцин(отдельная тема). В Infectious Diseases of the Dog and Cat 4th Edition дана такая информация:«потенциальное применение включает лечение неопластических и вирусных заболеваний. Было показано, что IL2 в низких дозах увеличивает иммунный ответ на одновременную вакцинацию у людей с иммунодефицитом. Нет данных о его использовании у собак и кошек»
Есть статья 2016 года, где описывают лечение герпеса кошек интрелейкином и интерфероном гамма. (https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0147957116300625?via%3Dihub). В исследовании были кошки с клиническими симптомами болезни FHV-1, такие как окулярные и назальные выделения, конъюнктивит. Критериями исключения были одновременная инфекция FelineImmunodeficiency Virus-FIV или Feline Leukemia Virus-FeLV, любая вакцинация и несколько домашних домашних животных. С января 2013 по июнь 2014 года было собрано 333 носовых, орофарингеальных или конъюнктивальных мазков из 35 кошек с респираторными признаками, связанных с синдромом поражения верхних дыхательных путей. В отношении этих 35 животных только 25 были положительными на FHV-1 с помощью ПЦР-анализа, и были включены в проспективное рандомизированное плацебо-контролируемое двойное слепое клиническое исследование. Кошек в контрольной группе лечили в течение 6 месяцев плацебо (30% водно-спиртового раствора). Группа лечения получала интерферон-гамма и IL-12 человека. Оба цитокина вводили в концентрации 10 мкг / мл примерно в 500 л 30% водного спиртосодержащего раствора в 5 мл воды, два раза в день через рот в течение 6 месяцев. Выводы были таковы: «Мы продемонстрировали, что положительные кошки на FHV-1, обработанные низкими дозами последовательного кинетического активированного IL-12 плюс IFN-гамма в течение 6 месяцев имели значительное улучшение в клинических оценках по сравнению с контрольной группой плацебо при оценке 6-месячного лечения. Поэтому мы проводим низкотоксичную терапию цитокинами в качестве альтернативы традиционной антивирусной терапии для лечения инфекции FHV-1 у кошек». Интерлейкин 12 на данный момент выпускается только для исследований. Есть данные о введении ИЛ2 в цистерны молочной железы коровам при маститах, пришли к выводу, что местное лечение ИЛ может быть оправданно. В Small Animal Clinical Pharmacology 2nd Edition (Editors: Jill Maddison Stephen Page David Church) информация об ИЛ2 такова: «Рекомбинантный ИЛ2 человека может использоваться у собак в качестве вспомогательной терапии после хирургической резекции и / или химиотерапии, у которых неопластическая болезнь, с целью усиления эндогенного противоопухолевого иммунного ответа. Пациенты с рядом опухолей были изучены, но наибольшее обещание было получено от последовательного введения TNF и IL2 собакам, у которых оральная меланома или мастоцитома. ИЛ 2 применялся совместно с IFN у кошек с FeLV заболеванием, но клинический ответ был разочаровывающим. Побочные эффект применения IL2 у собак включают рвоту, диарею и летаргию. Хотя использование IL2 показывают клинические перспективы, существует ряд сообщаемых побочных эффектов».
Интнолейкин 2 в России известен в виде препарата- Ронколейкин «Биотех».
-Другие иммуностимуляторы: микробного происхождения(БЦЖ), нуклеиновые кислоты, химические (левамизол), дезоксихолевая кислота, растительного происхождения(?)
- Лечебные вакцины. K9-ACV- MediVet Biologics(вакцина при омж, меланоме, ангиосаркоме)
- Вирусные вакцины- искусственно приготовленные препараты, содержащие антигены, которые используются для усиления образования специфических антител, обеспечивающих активный и/или пассивный иммунитет в организме. Вакцины получают из убитого, аттенуированного или живого патогенного микроорганизма, а также создают на основе синтетических пептидов или рекомбинантных молекул.
-Индукторы интерферонов. Некоторые индукторы активны только in vivo, тогда как другие активны как in vivo, так и in vitro. Полная классификация индукторов интерферона по химической структуре в настоящее время невозможна. Существует слишком большая вариация в представленных структурных типах (полианионы различной структуры, нейтральные молекулы, основные молекулы, белки, полисахариды, живые организмы). Идеальный индуктор интерферона для использования у животных и человека должен быть свободен от токсичности, инфекций, нонтигенности, свободен от тератогенного или канцерогенного потенциала, должен быть приемлемой стоимости. Индукторы интерферона до сих пор мало изучены, информацию о конкретных продуктах можно найти от российских ученых. На Pabmed https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20027350, например информация об Анафероне. Никаких клинических исследований не предоставлено, мало того, это гомеопатическое средство, у которого вообще не может быть эффективности. У каждой крупной вирусной группы есть члены, которые могут индуцировать интерферон. То есть, одноцепочечные РНК-вирусы,двухцепочечные РНК-вирусы и ДНК-вирусы способны индуцировать интерферон. Это включает в себя- вирусы млекопитающих, микофагии бактериофаги, например, Escherichia coliphage, вирусная или фаго-зараженная клетка.
Подведем итоги: Иммунитет стимулировать просто так нельзя. Если есть симптомы заболевания, но необходимо установить истинный диагноз. По умолчанию в здоровом организме,без получавшего иммуностимуляторы, не происходит ровным счетом ничего. Симптомы «сниженного иммунитета» неспецифичны, любые недомогания могут быть субклинической формой инфекционного заболевания, эндокринных, аутоиммунных, неврологических, онкологических нарушений. Иммуностимулятры существующие на ветеринарном рынке РФ будут рассмотрены позже.