Нуклеиновые кислоты. Впервые были описаны в 1869 году швейцарским биохимиком Ф. Мишером (1844-1895 гг.).
В зависимости от пентозыразличают два типа нуклеиновых кислот: рибонуклеиновую (РНК, входит рибоза) и дезоксирибонуклеиновую (ДНК, входит дезоксирибоза). В нуклеотидах РНК содержатся азотистые основания: аденин (А), гуанин (Г), цитозин (Ц), урацил (У).
ДНК состоит из двух полинуклеотидных цепей.
В нуклеотидах ДНК содержатся азотистые основания: аденин (А), тимин (Т), гуанин (Г), цитозин (Ц).
Они соединены между собой водородными связями, которые образуются между нуклеотидами: два — между аденином и тимином, три — между цитозином и гуанином.
Американский биохимик Дж. Уотсон и английский генетик Ф. Крик в 1953 году предложили модель пространственной структуры ДНК. Позднее она была подтверждена экспериментально. 1) Первичная структура: ДНК состоит из двух полинуклеотидных цепей. Они соединены между собой водородными связями, которые образуются между нуклеотидами: дв е связи — между аденином и тимином, три — между цитозином и гуанином
2) Вторичная структура:Две полинуклеотидные цепи ДНК, образуют спираль. Между азотистыми основаниями расстояние составляет 0,34 нм.Шаг спирали равняется 3,4 нм и содержит десять пар азотистых оснований, диаметр спирали составляет около 2 нм.
3) Третичная структура: двойная спираль ДНК соединяется с ядерными белками (гистонами), и сокращается в 5 раз.
Образуется нуклеосома (от лат. nucleus — ядро, от греч. сома — тело). 4) Четвертичная структура: хромосома, которая наиболее компактна в период деления. Т.е. 1 уровень –связи между нуклеотидами (аденин, тимин, гуанин, цитозин), 2- й – спираль, 3- й нуклеосома, 4 – й – хромосома. Причём, аденин соединяется с тимином в противоположной цепи, гуанин с цитозин.
|
У многих прокариот, некоторых вирусов, в митохондриях и хлоропластах эукариот ДНК имеет кольцевую структуру и не соединяется с белками.
Денатурация ДНК - разрыв водородных связей между комплементарными азотистыми основаниями. (действие кислот, щелочей, высоких или низких температур и т. п.)
Ренатурация – восстановление ДНК после прекращения действия неблагоприятных факторов.
Деструкция — это процесс разрушения первичной структуры ДНК.
Функции ДНК: сохраняет, воссоздает наследственную информацию, во время деления материнской клетки обеспечивает ее передачу дочерним клеткам, с нее происходит синтез белка. Количество ДНК в клетке является видовым признаком.
Основная часть ДНК сосредоточена в хромосомах клетки. Незначительная ее часть находится в митохондриях и пластидах. У прокариот — кольцевая ДНК, плазмиды
Рибонуклеиновые кислоты (РНК). РНК состоит, как правило, из одной цепи, закрученной в спираль. У вирусов есть двухцепочные РНК. РНК содержится в ядрышке, ядре, цитоплазме, рибосомах. Молекулы РНК более длинные, чем молекулы ДНК.
Различают три типа РНК:
рибосомную, матричную (информационную — иРНК), транспортную (тРНК).
Синтезируется РНК с участием ферментов PHК-полимераз на молекуле ДНК. Последовательность нуклеотидов участка молекулы ДНК определяет порядок расположения нуклеотидов в молекуле РНК. У большинства клеток содержание РНК значительно большее (от 5 до 10 раз), чем содержание ДНК. Наибольшая часть РНК приходится на рибосомную.
|
Функции РНК: реализует наследственную информацию, принимает участие в синтезе белков. Информационная (матричная) РНК (иРНК) представляет собой копию участка ДНК, то есть одного или нескольких генов. Она переносит генетическую информацию к месту синтеза полипептидной цепи и принимает в нем непосредственное участие. Аденину в РНК соответствует урацил.
Подобно молекуле ДНК, иРНК имеет вторичную и третичную структуры, которые формируются с помощью водородных связей, гидрофобных, электростатических взаимодействий и т. п.
Рибосомная РНК Входит в состав рибосомы и взаимодействует с ее белками. Выполняет структурную функцию: обеспечивает определенное пространственное расположение иРНК и тРНК на рибосоме.
Транспортная РНК (тРНК) — переносит аминокислоты к месту синтеза белка. К месту синтеза белка каждая аминокислота транспортируется своей тРНК. тРНК транспортируются элементами цитоскелета клетки.
Имеет форму трехлистника (листка клевера), наверхушке тРНК расположен триплет нуклеотидов – антикодон, соответствующий кодону иРНК.
Возле основания т - РНКесть участок, к которому благодаря ковалентной связи молекула аминокислоты прикрепляется.
Наиболее известным соединением – рибонуклеотидом является АМФ (аденозинмонофосфорная кислота), которая может присоединять еще два остатка фосфорной кислоты и образовывать АТФ — аденозинтрифосфорную кислоту. Это богатое энергией соединение. При образовании связей между остатками фосфорной кислоты в нуклеотидах накапливается много энергии. При разрыве этой связи выделяется много энергии, значительно больше, чем при разрыве обычной ковалентной связи.
|
Такая связь называется макроэргической (от греч. макрос — большой, эргон — работа).
В молекуле АТФ две макроэргические связи. АТФ гидролитично расщепляется до АДФ (аденозиндифосфорной кислоты), а затем до АМФ с выделением энергии. Восстанавливается из АДФ путем присоединения остатка фосфорной кислоты, и сопровождается это аккумулированием энергии. Отщепление 1 молекулы фосфорной кислоты сопровождается выделением почти 4 0 кДж энергии. (всего АТФ содержит 80кДж).
Правило Чаргаффа (для ДНК): число адениловых нуклеотидов равняется количеству тимидиловых, а гуаниловых — количеству цитозидиловых, то есть А = Т, Г = Ц, или А + Г = Т + Ц. Принцип комплементарности (от лат. complementum — дополнение) — это правило строгого соответствия:
аденина (А) — тимину (Т) или урацилу (У) в РНК,
гуанина (Г) — цитозину (Ц).
Молекулы ДНК способны к самоудвоению — репликации (от англ. replica — отражение), редупликации (от лат. duplicatio — удвоение). В основе ее лежит принцип комплементарности. В новообразованной цепи последовательность нуклеотидов определяется их последовательностью в цепи первичной молекулы ДНК. Одна цепь принадлежит материнской молекуле, вторая — синтезируется. Такой метод называется полуконсервативным (рис. 12.2 стр 64 старого учебника). Синтез новых цепей катализируется ферментом ДНК-полимеразой.
Скорость репликации ДНК у млекопитающих составляет приблизительно 50 нуклеотидов в секунду. Под влиянием внешних факторов могут возникнуть любые повреждения. Они могут быть исправлены на матрице второй цепи. Соответствующие ферменты (рестриктаза) удаляют поврежденные участки, встраивают новые. Этот процесс называется репарацией.
рис. 4 Репликация ДНК |
Решение задач по репликации и транскрипции.
1. Укажите последовательность нуклеотидов во второй цепи ДНК:
ЦАГ – ЦГТ – АЦЦ – ГАА – ТЦГ
ГТЦ – ГЦА – ТГГ – ЦТТ – АГЦ
2. Укажите последовательность нуклеотидов молекулы и - РНК, синтезированных на участке гена ДНК: ААЦ – ЦАЦ – ЦАГ – ГАЦ
УУГ – ГУГ – ГУЦ – ЦУГ
3. Укажите антикодон т – РНК, соответствующий кодону на и – РНК: АГЦ
а) ТЦГ б) УГЦ в) ТАГ г) УЦГ
4. В составе нуклеотидов молекулы и – РНК гуанина - 24%, аденина - 38%, цитозина - 22%.
Определить название и количество четвёртого нуклеотида.
Решение: 1) 24+38+22=84; 2) 100 – 84 = 16% урацила.
5. Двойная цепочка ДНК содержит 1400 тимидиловых нуклеотидов, что составляет 28% от общего количества нуклеотидов. Определить длину этой ДНК.
Решение: 1) Составляем пропорцию: 28% - 1400 нуклеотидов;
100% - х нуклеотидов. 1400 · 100: 28 = 5000 нукл.
2) 5000: 2 = 2500 нуклеотидов – количество нуклеотидов в одной цепочке.
3) 2500 · 0,24 = 850 нм – длина ДНК.
2. Фрагмент молекулы ДНК содержит 440 адениловых нуклеотидов, что составляет 22% от общего количества нуклеотидов в фрагменте. Определите, сколько цитодиловых, гуаниловых, и тимидиловых нуклеотидов содержится в данном фрагменте, каковы его длина и молекулярная масса.
Дано: А = 440 нуклеотидов = 22%.
Найти: Г -? Т -? Ц -?, и их количество; l фрагмента -?, m фрагмента -?
Решение:
- По принципу комплементарности, А = Т = 440 = 22%.
- По правилу Чаргаффа, (А + Т) + (Г + Ц) = 100%; А + Т = 22% + 22% = 44%.
Тогда Г + Ц = 100% - 44% = 56%. На Г и Ц отдельно – по 28%.
3. Найдём количество гуанина и цитозина:
22% - 440
28% - х
Х = 440 · 28 = 560 нуклеотидов. Г = Ц = 560.
- Определим общее количество нуклеотидов в данном фрагменте ДНК:
440 + 440 +560 + 560 = 2000 нуклеотидов. Найдём вес этого фрагмента:
m фрагмента = 345 · 2000 = 690000 дальтон.
- Длина фрагмента. Так как ДНК состоит из двух цепочек, то нам надо определить длину
2000: 2 = 1000 нуклеотидов.
Длина фрагмента: 0,34· 1000 = 340 нм.
Ответ: Т = 440 = 22%, Г =28%, Ц = 28%, Тимина – 440, Гуанина – 560, Циттозина – 560.
l фрагмента = 340 нм, m фрагмента = 690000 дальтон (аем).