Методик биотестирования существует множество, но вне зависимости от выбранной методики, она должна отвечать ряду требований:
· необходимая информация об элементарном составе анализируемой пробы должна быть получена в возможно более короткий срок с возможно меньшими затратами;
· метод должен быть высокочувствительным, информативным, избирательным в отношении определенного химического элемента, а также иметь соответствующий целям исследования рабочий диапазон концентраций;
· получаемые результаты должны быть на уровне заданной точности.
При выборе метода предпочтение отдается тем методам, которые не разрушают структуру образца.
Эксперт выбирает методику согласно своему опыту работы, поставленным перед ним вопросам и, соответственно, материалам и объектам исследования.
После завершения экспертизы все образцы направляются в орган или лицу, которые ее назначили, либо некоторое время хранятся в государственном судебно-экспертном учреждении. (N 73-ФЗ «О государственной судебно-экспертной деятельности в РФ»).
Приведем список, стандартизованных методик биотестирования, рекомендованных в настоящее время для целей токсикологического контроля почв и других объектов с указанием кодов регистрации и разработчиков.
ФР.1.39.2007.03222. Методика определения токсичности воды и водных вытяжек из почв, осадков сточных вод, отходов по смертности и изменению плодовитости дафний (ООО “Акварос”).
ФР.1.39.2007.03221. Методика определения токсичности воды и водных вытяжек из почв, осадков сточных вод, отходов по смертности и изменению плодовитости цериодафний (ООО “Акварос”).
ФР.1.39.2007.03223. Методика определения токсичности вод, водных вытяжек из почв, осадков сточных вод и отходов по изменению уровня флуоресценции хлорофилла и численности клеток водорослей (ООО “Акварос”).
ФР.1.39.2006.02506. ПНД Ф Т 14.1:2:3.13-06 (ПНД Ф Т 16.1:2.3:3.10-06). Методика определения токсичности отходов, почв, осадков сточных, поверхностных и грунтовых вод методом биотестирования с использованием равноресничных инфузорий Paramecium caudatum Ehrenberg (факультет почвоведения МГУ).
ФР 1.39.2006.0250. ПНД Ф Т 14.1:2.14-06 (ПНД Ф Т 16.1:3.11-06). Методика определения токсичности высокоминерализованных поверхностных и сточных вод, почв и отходов по выживаемости солоноватоводных рачков Artemia salina L. (факультеты почвоведения МГУ, биологический факультет МГУ, ЭАЦ “Экотерра”).
ФР.1.39.2007.04104. ПНД Ф Т 16.3.12-07. Методика определения токсичности золошлаковых отходов методом биотестирования на основе выживаемости парамеций и цериодафний (факультет почвоведения МГУ и ОАО “Всероссийский теплотехнический институт”).
ПНД Ф Т 14.1:2:3:4.10-04 (ПНД Ф Т 16.1:2.3:3.7-04). Методика определения токсичности проб поверхностных пресных, грунтовых, питьевых, сточных вод, водных вытяжек из почв, осадков сточных вод и отходов по изменению оптической плотности культуры водоросли хлорелла (Chlorella vulgaris Beijer). (Красноярский государственный университет).
ПНД Ф Т 14.1:2:4.12-06 (ПНД Ф Т 16.1:2:3:3.9-06). Методика определения токсичности водных вытяжек из почв, осадков сточных вод и отходов, питьевой, сточной и природной воды по смертности тест-объекта Dаphnia magna Straus. (Красноярский государственный университет).
ПНД Ф Т 14.1:2:3:4.11-04 (ПНД Ф Т 16.1:2.3:3.8-04). Методика определения токсичности воды и водных вытяжек из почв, осадков сточных вод и отходов по изменению интенсивности бактериальной биолюминесценции тест-системой “Эколюм” на приборе “Биотокс-10” (ООО НЦ “Экологическая перспектива”).
ПНД Ф Т 16.2:2.2-98. Методика определения токсичности почвы и донных осадков по хемотаксической реакции инфузорий (АОЗТ “Спектр-М”).
ПНД Ф Т 14.1:2:3:4.2-98. Методика определения токсичности воды по хемотаксической реакции инфузорий (АОЗТ “Спектр-М”).
ПНД Ф 14.1:2:4:15-09 (16.1:2:2.3:3.13-09) ФР.1.31.2009.06301. Методика выполнения измерений индекса токсичности почв, почвогрунтов вод и отходов по изменению подвижности половых клеток млекопитающих in vitrо (факультет почвоведения МГУ, Институт экологического почвоведения МГУ, ЗАО ФИРМА “БМК-ИНВЕСТ”, ООО НПФ “Биогнозис”, ЭАЦ “Экотерра” и Институт проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова РАН).
Как видно, широко используемые в экотоксикологическом контроле методики, главным образом, основаны на реакциях гидробионтов разной таксономической принадлежности: низших ракообразных, зеленых протококковых водорослей, равноресничных инфузорий [6, 14, 15, 20– 23, 25, 27, 29]. (Терехова В.А., 2011)
Оценка воздействия токсикантов производится на основании подсчета показателей смертности особей, плодовитости, подавления прироста численности популяции клеток водорослей, потере подвижности инфузорий и др. Кроме того, для анализа природных сред и техногенных объектов рекомендованы люминесцентные бактерии (лиофильно высушенный препарат “Эколюм”). Тест-функцией в этом случае служит уменьшение интенсивности свечения препарата под влиянием токсиканта. Для анализа почв в агроценозах обычно применяются семена высших растений. Тест-параметрами для них служат показатели прорастания: всхожесть, энергия прорастания, дружность прорастания, скорость прорастания, а также показатели интенсивности начального роста семян (длина корней, длина зеленых проростков, масса корней, масса зеленых проростков). Согласно наиболее распространенным методическим указаниям, лучшие результаты дают мелкие семена (кресс-салат, редис, горчица, пшеница и др.) с небольшим запасом питательных веществ, а, следовательно, более подверженные воздействию влиянию внешних факторов. Однако зачастую используются крупные семена. В зависимости от целевого использования почв агроценозов под посев тех или иных культур испытания проводят на семенах однодольных (злаковых) или двудольных растениях. (Бурдина В.М., 2005).
Заключение
Биотестирование востребовано в разных сферах контроля экологического качества почв: природоохранной, сельскохозяйственной, санитарно-эпидемиологической. Существуют организационные сложности из-за межведомственных барьеров в согласованном использовании одних и тех же методов и интерпретации результатов биотестов. Спектр тест-организмов широк, однако ни один из видов не может служить универсальным сенсором, в равной степени чувствительным ко всем экологическим факторам, из-за избирательности действия потенциальных токсикантов.
Биологические методы контроля в ряде ситуаций, позволяют быстро оценивать качество окружающей среды и наличие некоторых загрязнений, не обнаруживаемых химическими методами.
Биологические методы имеют над аналитическими методами ряд преимуществ: они достаточно просты в использовании, быстры в определении результатов и сравнительно не дороги. (Баева Ю.И. и др, 2016).
Список литературы
1. Судебная экология: учеб. пособие: в 6 т. / Ю.И.Баева, Н.А.Черных. –
М.: РУДН, 2016. – Т.1. Исследование экологического состояния объектов почвенно-геологического происхождения. – 2016. – 252с.
2. Бурдина В.М., Терехова В.А. Анализ эффективности методик биотестирования в экологической оценке загрязненных почв и отходов различного происхождения // Проблемы биодеструкции техногенных загрязнителей окружающей среды. Мат-лы межд. конф. Саратов, 2005. C. 125–126.
3. Гельцер Ю.Г. Биологическая диагностика почв / Ю.Г. Гельцер. – М.: Изд-во Моск. Ун-та, 1986. – 82 с.
4. Еремеева А. С., Донченко М. И., Бучельников В. С., Перегудина Е. В., Азарова С. В. Обзор методов биоиндикации и биотестирования для оценки состояния окружающей среды // Молодой ученый. — 2015. — №11. — С. 537-540.
5. Ляшенко О. А. Биоиндикация и биотестирование в охране окружающей среды. — Санкт- Петербург: Издательство СПбГТУРП, 2012. — 67 с.
6. Мелехова О. П. Биологический контроль окружающей среды: биоиндикация и биотестирование: учебное пособие / О.П. Мелехова и др. - М.: Издательский центр «Академия», 2010. - 288 с.
7. Терехова В.А. Биотестирование почв: подходы и проблемы. – Биология почв, «Почвоведение №2» - М.: МГУ, 2011. – 190 - 198 с.
8. Федеральный закон от 31 мая 2001 г. N 73-ФЗ «О государственной судебно-экспертной деятельности в Российской Федерации». URL: https://base.garant.ru/12123142/