Бактериологического исследования аэробных бактерий

(4-й день исследования)

Таблица 3.

Свойства культур № 1 и № 2

№ пп	Ферментация (К, КГ или (-)	Образование (+ / -)	Подвижность (+/ -)	Наличие спор (+ / -)	Предположительный вид бактерий
глюкозы	лактозы	сахарозы	мальтозы	маниита	индола	H2S
№1
№2

 

Заключение: на основании изученных морфологических, тинкториальных, культуральных и биохимических свойств выделенных бактерий можно предположить, что культура №1 относится к виду ____________________, а культура № 2 представляет собой вид ____________________.

Для окончательной идентификации исследование нужно продолжить.

 

 

4. Изучить характер роста анаэробных бактерий (посев почвы) в среде Китта-Тароцци.

1. Без прогрева. Рост 24 ч при 37оС ___________________

1. Прогрев при 800С, 25 мин. Рост 24 ч при 37оС ___________________

 

 

5. Приготовить мазки и окрасить их по Граму, микроскопировать и зарисовать.

 

Рис. 1.Препарат-мазок из среды Китта-Тароцци. Окраска по Граму

 

 

6. Произвести пересев смешанной культуры из среды Китта-Тароцци в высокие столбики МПА с глюкозой (0,5 %) методом разведения для по-

лучения изолированных колоний.

 

7. Дополнить схемы выделения чистой культуры анаэробных бактерий с использованием методов Цейслера и Вейнберга.

 

1

2

3

Рис. 2. Схема выделения чистой культуры анаэробных бактерий с использованием метода Цейсслера

Рис. 3. Схема выделения чистой культуры анаэробных бактерий с использованием метода Вейнберга.

 

8. Изучить культуральные свойства анаэробных бактерий в сахарном МПА и среде Вильсона-Блера.

9. Произвести учет ферментативных свойств клостридий в средах Гисса и

внести данные в таблицу.

Таблица 4.

Дифференциально-диагностические свойства некоторых видов клостридий

	Наименование вида	Ферментация углеводов	Расположение спор	Отношениек О2
глюкоза	лактоза	мальтоза
	Cl. botulinum
	Cl. tetani
	Cl. perfringens

Вывод: _____________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

 

10. Изучить культуральные свойства грибов рода Candida на среде Сабуро.

11. Изучить культуральные свойства плесневых грибов.

 

Подпись преподавателя ________________

 

Дата__________________

 

Занятие №7

 

Тема: Вирусы. Классификация. Морфология и строение вирионов. Взаимодействие вируса с клеткой.

 

Вопросы для обсуждения:

1. Классификация вирусов.
2. Общая характеристика царства вирусов.
3. Морфология вирионов.
4. Структура простых и сложных вирионов.
5. Капсиды вирионов, типы симметрии. Форма и размер вирионов.
6. Строение внешней оболочки (суперкапсида).
7. Вирусный геном, его структура.
8. Неструктурные вирусные белки.
9. Стадии взаимодействия вируса с клеткой: продуктивная и интегративная формы.
10. Последствия интеграции вирусного генома в геном клетки.
11. Особенности репликации ДНК- и РНК-содержащих вирусов. Вирусы с позитивной и негативной полярностью.
12. Синтез вирусных белков.
13. Мишени для действия противовирусных препаратов.
14. Противовирусные химиотерапевтические препараты (общие понятия).

 

Практические задания:

1. Изучить классификацию вирусов, морфологию и строение вирионов с помощью таблиц.

2. Зарисовать структуру простого и сложного вириона.

 

 

Рис. 1. Схема строения простого Рис. 2. Схема строения сложного

вириона. вириона.

 

3. Подписать типы симметрии капсидов:

 

 

5. Изучить стадии взаимодействия вируса с клеткой.

 

1._________________________ 2. ________________________ 3. ________________________ 4. ________________________ 5.________________________ 6.________________________

 

6. Заполнить таблицу:

 

Эклипс-фаза для следующих вирусов:
Тип вируса	+ РНК	ДНК	Ретровирус
Транскрипция вируса
Репликация вирусного генома

 

Пример заполнения таблицы:

Транскрипция вируса	“-” РНК	РНК зависимая РНК-полимераза ---------------->	“+” РНК	-------> R -------> рибосома	Синтез белка
Репликация вирусного генома	“-” РНК	Вирусная РНК-полимераза ---------------->	“+” РНК	Вирусная РНК-полимераза ---------------->	“-” РНК

 

 

Подпись преподавателя ________________

Дата__________________

Занятие №8

 

Тема: Методы культивирования вирусов. Индикация вирусов в клеточных культурах и курином эмбрионе. Вирусы бактерий (фаги). Идентификация бактерий с помощью фагов.

 

Вопросы для обсуждения:

1. Вирусологический метод исследования, его этапы.

2. Методы культивирования вирусов.

3. Получение и приготовление первичных, перевиваемых и полуперевиваемых культур клеток.

4. Что представляют собой однослойные, суспензионные и органные культуры клеток?

5. Способы заражения куриного эмбриона.

6. Индикация вирусов в клеточных культурах и курином эмбрионе.

7. Культивирование вирусов в организме лабораторных животных (биологический метод исследования).

8. Ультраструктура и морфологические типы вирусов бактерий.

9. Взаимодействие вирулентного фага с бактериальной клеткой.

10. Взаимодействие умеренного фага с бактериальной клеткой и результат этого процесса.

11. Отличия лизогенных бактерий от нелизогенных. Фаговая конверсия.

12. Практическое использование вирусов бактерий.

13. Тесты на фагочувствительность и фаготипирование бактерий.

Практические задания:

 

1. Ознакомиться с методами приготовления клеточных культур и назначением сред (199, Игла), солевых растворов (раствор Хенкса, раствор фосфатного буфера с антибиотиками), специальных реактивов (трипсин, версен).

2. Изучить методы заражения и вскрытия куриного эмбриона. Подписать способы заражения, применяемые для накопления различных вирусов.

3. Микроскопировать клеточную культуру Hela, зараженную энтеровирусами, с целью обнаружения цитопатического действия вирусов.

4. Выявить цитопатическое действие энтеровирусов по образованию бляшек в культуре клеток под бентонитовым покрытием.

5. Поставить реакцию гемагглютинации с аллантоисной жидкостью куриного эмбриона, зараженного вирусом гриппа, по схеме.

6. Учесть результат реакции гемагглютинации (РГА) и определить гемагглютинационный титр вируса. Данные внести в таблицу.

 

 

Таблица 1.

Схема постановки реакции гемагглютинации для определения титра вируса

Ингредиенты в мл	Лунки	Контроль эритроцитов
1-я	2-я	3-я	4-я	5-я	6-я
0,85% раствор NaCl	0,9	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Аллантоисная жидкость	0,1	→	→	→	→
Полученные разведения	1: 10	1:2 0	1: 40	1: 80	1: 160
1% взвесь куриных эритроцитов	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Учет результатов

Условные обозначения:

(+) - полная агглютинация эритроцитов, имеет вид зонтика

(-) - компактный осадок эритроцитов, как в контроле, имеет вид «пуговки»

7. Зарисовать видимые проявления РГА:

Лунки полистиролового планшета

Контроль