Освоение техники микроскопии с иммерсионной системой.




Микроскопию окрашенных препаратов в микробиологической практике производят с иммерсионным объективом, который обладает более высокой разрешающей способностью, чем сухой. При этом обязательным условием является погружение объектива в масло, показатель которого совпадает с показателем преломления стекла (1,52). Для этих целей применяют так называемое иммерсионное масло – кедровое или терпеновое масло. В этом случае пучок света, вышедший за пределы предметного стекла, не рассеивается и лучи, не меняя своего направления, попадают в объектив. Иммерсионный объектив дает увеличение х90 (х100), а в сочетании с окуляром х10 получается увеличение в 900 (1000) раз.

Порядок работы с иммерсионным микроскопом:

1. Поднять конденсор вверх до уровня предметного столика, поставить зеркало плоской стороной.

2. Поставить объектив х8 и, глядя в окуляр, движением зеркала добиться наилучшего освещения поля зрения.

3. На предметное стекло с микропрепаратом нанести каплю иммерсионного масла, положить его на предметный столик и установить объектив х90 (х100). Под контролем глаза, глядя сбоку, осторожно опустить, пользуясь макровинтом, тубус до погружения объектива в иммерсионное масло. Нельзя допускать соприкосновения объектива с препаратом, так как это может привести к повреждению фронтальной линзы. Затем, наблюдая в окуляр, при осторожных поворотах макровинта находят контуры микробных клеток и фокусируют изображение микровинтом, вращая его в пределах только одного оборота!

По окончании микроскопии поднимите тубус, снимите препарат и поместите его в дезинфицирующий раствор; осторожно сотрите масло с иммерсионного объектива, опустите конденсор и переведите револьвер на объектив х8.

Изучите приготовленный препарат под микроскопом. Обратите внимание на форму микроорганизмов (кокки, палочки, извитые), на их размеры, взаимное расположение и окраску. При увеличении микроскопа около 900, бактерии, имеющие размер 1 мкм, будут выглядеть равными, примерно 1 мм. Таким образом, можно приблизительно определить размеры бактериальной клетки. Зарисуйте увиденные в поле зрения микроорганизмы в протоколе, соблюдая пропорции клеток. Опишите их, сделайте вывод.

После окончания работы необходимо привести рабочее место в порядок, сдать его дежурному и вымыть руки; в случае необходимости обработать руки дезраствором.

Промикроскопировать демонстрационные препараты стрептококков, бацилл сибирской язвы, окрашенные по методу Грама и полученные результаты занести в протокол.

Ожидаемые результаты: Streptococcus spp. Препарат из бульонной культуры. Грам (+) полиморфные кокки диаметром 0,5-1,5 мкм, расположенные, в основном, цепочками.

Bacillus anthracis – возбудитель сибирской язвы, препарат из бульонной культуры. Грам (+) крупные палочки (5-10 х 1-2 мкм) с обрубленными концами, расположенные длинными цепочками в виде «бамбуковой трости».

 

 

ОБРАЗЕЦ ОФОРМЛЕНИЯ ПРОТОКОЛА ПРАКТИЧЕСКОГО ЗАНЯТИЯ

Протокол-отчет№ ____от________Ф. И. О.____________№ группы________

ТЕМА:

Цель Метод и его содержание Полученные результаты Выводы

5.4 Итоговый контроль знаний:

  1. Классификация царства прокариот.
  2. Морфология бактерий: форма, величина, взаимное расположение.
  3. Простые и сложные методы окраски; их информативность
  4. Метод Грама: методика и значение.
  5. Типы микроскопов (биологический, люминесцентный, электронный и др.) и специальные методы микроскопии (темнопольная, фазово-контрастная).
  6. Устройство биологического микроскопа. Разрешающая способность микроскопа.
  7. Правила работы с иммерсионной системой.

 

6. Домашнее задание для уяснения темы занятия:

- вопросы для самоконтроля:

1. Назовите отличительные признаки микроорганизмов, как представителей царства прокариот.

2. Какие свойства микроорганизмов лежат в основе микроскопического метода исследования?

3. Назовите и обоснуйте какие методы окраски микроорганизмов (простые или сложные) являются более информативными.

4. Обоснуйте дифференциально-диагностическое значение метода Грама в микробиологической практике.

5. Обоснуйте необходимость использования иммерсионной системы для изучения микроорганизмов.

7. Рекомендации по выполнению НИРС:

Темы рефератов

  1. История открытия микроорганизмов.
  2. Особенности мира микробов
  3. Обязательные структурные элементы бактериальной клетки, выполняемые ими функции.
  4. Значение L-трансформации в патогенезе инфекционных заболеваний.
  5. Проблемы диагностики инфекционных заболеваний, вызванных L-формами.

8. Рекомендованная литература по теме занятия:

Обязательная

1. Поздеев, О. К. Медицинская микробиология: Учебник / О. К. Поздеев; ред. В. И. Покровский. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. – 768 с.

Дополнительная

1. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: учебник. в 2 т. / ред. В. В. Зверев, M. Н. Бойченко. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011 – Т. 1. – 448 с.

2. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: учебник. в 2 т. / ред. В. В. Зверев, М. Н. Бойченко. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 2. - 480.

3. Гиллеспи, С. Х. Наглядные инфекционные болезни и микробиология / С. Х. Гиллеспи, К. Б. Бамфорд; ред.-пер. С. Г. Пак, А. А. Еровиченков. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 136 с.

4. Хаитов, Р. М. Иммунология: учебник / Р. М. Хаитов. – 2-е изд., перераб. и доп. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 528 с.

5. Ярилин, А. А. Иммунология: учебник / А. А. Ярилин. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 752 с.

 



Поделиться:




Поиск по сайту

©2015-2024 poisk-ru.ru
Все права принадлежать их авторам. Данный сайт не претендует на авторства, а предоставляет бесплатное использование.
Дата создания страницы: 2019-05-16 Нарушение авторских прав и Нарушение персональных данных


Поиск по сайту: