Определение содержания эритроцитов и лейкоцитов в крови. Значение этих форменных элементов.
https://www.igma.ru/attachments/article/2056/1%20Praktikum%20blood.pdf
3-5 страница
ПОДСЧЁТ КОЛИЧЕСТВА ЭРИТРОЦИТОВ В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
Пробирочным методом по Николаеву
Эритроциты – красные кровяные тельца, имеющие форму двояковогнутого диска, не имеющие ядра и содержащие в своем составе гемоглобин. Количество эритроцитов у мужчин – 4,0-5,0•1012/л, у женщин – 3,9-4,7•1012/л. Увеличение количества эритроцитов в крови человека
называется эритроцитозом, уменьшение их количества – эритропенией. Выделяют относительный и абсолютный эритроцитоз. Относительный – за счет потери плазмы и сгущения крови, при этом общее количество эритроцитов в организме остается в пределах нормы. Абсолютный – истинное увеличение количества эритроцитов, за счет усиленной их продукции костным мозгом. Эритропения также бывает относительной и абсолютной. Относительная – увеличение объема плазмы (разведение крови) без уменьшения общего количества эритроцитов. Абсолютная – уменьшение общего количества эритроцитов в результате усиленного разрушения эритроцитов или снижения их продукции костным мозгом.
Оснащение: микроскоп, донорская кровь, капилляр 0,02 мл (от гемометра Сали), штатив с пробирками, 3% раствор NaCl, пипетка на 5 мл, счетная камера Горяева с покровным стеклом, стеклянная палочка, ватные шарики, марлевые салфетки.
Ход работы: в сухую, чистую пробирку наливают 4 мл 3% раствора NaCl для разведения крови. Кровь набирают в капилляр до метки (0,02 мл) и добавляют в пробирку, тщательно перемешивают, достигая разведения в 200 раз. Затем суспензией эритроцитов заполняют камеру Горяева и, поместив ее под микроскоп, производят подсчет эритроцитов в маленьких квадратах, расположенных по диагонали (5 больших квадратах, разделенных на 16 маленьких квадратов). При подсчете
количества эритроцитов руководствуются правилом Егорова: к данному квадрату относятся эритроциты, лежащие внутри квадрата, а также на его верхней и левой границах. Эритроциты, лежащие на правой и нижней границах в данном квадрате не подсчитываются.
Количество эритроцитов (Эр) в 1 л крови рассчитывают по формуле:
Эр = А · 4000 · 200 ´106,
где А – сумма эритроцитов в 80 маленьких квадратах,
1/4000 мм3 – объем камеры Горяева над одним маленьким квадратом, 200 – разведение крови в 3% NaCl,
80 – число маленьких квадратов, в которых подсчитывают эритроциты.
Рекомендации к оформлению работы: зарисуйте капилляр и пипетку, определите количество эритроцитов в исследуемой крови, сделайте вывод о соответствии данного результата с нормой и клиническом значении данного показателя.
ПОДСЧЁТ КОЛИЧЕСТВА ЛЕЙКОЦИТОВ В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА
пробирочным методом по Николаеву
Лейкоциты – белые кровяные тельца, имеющие ядро. Выделяют следующие формы лейкоцитов: гранулоциты – эозинофилы, базофилы, нейтрофилы. Агранулоциты – моноциты, лимфоциты. Увеличение количества лейкоцитов в крови человека – лейкоцитоз, уменьшение их количества – лейкопения. Различают физиологические лейкоцитозы: пищеварительный (возникает после еды), миогенный (при физической нагрузке), эмоциональный, при болевых воздействиях. В норме количество лейкоцитов в крови человека (4,0-9,0)•109 /л.
Оснащение: микроскоп, донорская кровь, капилляр 0,02 мл (от гемометра Сали), штатив с пробирками, 3% раствор уксусной кислоты, подкрашенный метиленовым синим, пипетка на 1 мл, счетная камера Горяева с покровным стеклом, стеклянная палочка, ватные шарики, марлевые салфетки.
Ход работы: в сухую, чистую пробирку наливают 0,4 мл 3% раствора уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим. Кислота разрушает оболочки форменных элементов, а краска окрашивает ядра лейкоцитов. Кровь набирают в капилляр до метки (0,02 мл) и добавляют в пробирку, тщательно перемешивают, достигая разведения в 20 раз. Затем полученным раствором заполняют камеру Горяева и, поместив ее под микроскоп, производят подсчет лейкоцитов в 100 больших квадратах.
Количество лейкоцитов (Л) в 1 л рассчитывают по формуле:
Л = В · 4000 · 20 ´106,
где В – сумма лейкоцитов в 25 больших квадратах,
1/4000 мм3 – объем камеры Горяева над одним маленьким квадратом, 20 – разведение крови в 3% растворе уксусной кислоты,
1600 – площадь 100 больших квадратов, которая соответствует 1600 малым квадратам.
Эритроциты
Важнейшая функция эритроцитов — дыхательная. Они переносят кислород от альвеол лёгких к тканям и углекислый газ от тканей к лёгким. Двояковогнутая форма эритроцита обеспечивает наибольшее отношение площади поверхности к объёму, что обеспечивает его максимальный газообмен с плазмой крови. Белок гемоглобин, содержащий железо, заполняет эритроциты и переносит весь кислород и около 20 % углекислого газа (остальные 80 % транспортируется в виде иона бикарбоната). Кроме того, эритроциты участвуют в свёртывании крови и адсорбируют на своей поверхности токсичные вещества. Они переносят разнообразные ферменты и витамины, аминокислоты и ряд биологически активных веществ. Наконец, на поверхности эритроцитов находятся антигены — групповые признаки крови.
Лейкоциты
Основная функция лейкоцитов — защитная. Они фагоцитируют микроорганизмы, инородные частицы, продукты распада тканей, синтезируют и инактивируют различные биологически активные вещества, опосредуют реакции гуморального[en]* и клеточного иммунитета[6].